天津七里海野生葦蘑菌絲體液體培養基的優化

徐營莉 郭成金 呂紹生

摘要 以一株分離自天津七里海濕地野生葦蘑為研究對象，以其菌絲體生物量為主要測量指標，對其菌絲體液體培養基進行優化，首先采用不同碳源、氮源進行單因素初選，再結合正交設計，最終得到其菌絲體最佳液體培養基配方為蔗糖20 g/L，蛋白胨4 g/L，MgSO4·7H2O 15 g/L，KH2PO4 3 g/L，VB1 0.004 g/L，pH值自然。29 ℃培養20 d，菌絲體生物量達到1.980 g/L。

關鍵詞 野生葦蘑；菌絲體；液體培養基；正交設計；生物量

中圖分類號 S646.9 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2018）21-0012-03

Abstract A strain of wild weimo isolated from Tianjin Qilihai wetlands was studied in the experiment.The mycelial biomass was choosed as the main index to optimize liquid culture medium of wild weimo mycelium.Firstly，the single factor primary election was conducted with different carbon sources and nitrogen sources，then，in combination with orthogonal design.The optimum liquid nutrient medium was：20 g/L sucrose，4 g/L peptone，1.5 g/L MgSO·7H2O，3 g/L KH2PO4，0.004 g/L vitamin B1，pH natural.Under the condition of dark at 29 ℃，the biomass of mycelium could reach 1.980 g/L after culturing 20 days.

Key words Wild weimo；Mycelium；Liquid nutrient medium；Orthogonal design；Biomass

食用蕈菌的液體培養稱為液體發酵[1]，液體發酵法能大大縮短生長周期，實現菌種快速生長，普遍提前10～20 d，且菌齡一致，生長發育均勻一致，接種簡便，液體菌種便于接種工作的機械化，適合食用菌的工廠化、標準化生產[2]。目前研究主要集中在葦蘑的抗氧化活性、種屬鑒定，對葦蘑菌絲體液體培養基篩選的有關報道較少。以一株采自天津七里海地區的野生蕈菌為研究對象，通過碳氮源單因素初選，并結合L9（34）正交設計[3]，試圖篩選出其菌絲體最適液體培養基，實現天津七里海野生葦蘑的可持續合理有序開發利用，提高生物量，為其發酵生產、細胞學育種等進一步研究開發提供物質基礎、理論依據和技術支撐，為拯救和恢復該瀕危野生蕈菌種質資源提供有力支持[4]。

1 材料與方法

1.1 供試菌種 供試菌株為一株野生葦蘑，采自天津市寧河縣七里海濕地保護區，現存于天津師范大學蕈菌研究所。

1.2 試劑

蔗糖、葡萄糖、麥芽糖、可溶性淀粉、蛋白胨（含氮量14.5%）、酵母粉（含氮量9%）、牛肉膏（含氮量117%）、硫酸銨（含氮量99%）、硝酸銨（含氮量99%）、KH2PO4、MgSO4·7H2O、VB1、瓊脂粉（上海藍季），以上均為分析純，馬鈴薯、豆粕（含氮量45.4%）?！?br>