乳腺癌HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達的一致性及其與臨床病理特征的關系

周國江 楊 勇 趙子龍 程肇平 王 娟

乳腺癌是1種惡性腫瘤，發生在人體的乳腺上皮組織。乳腺癌的發病率較高，現如今已經成為一個重大的公共衛生問題[1]。人表皮生長因子受體-2基因與乳腺癌之間關系密切，通過對其蛋白表達及與臨床病理之間關系的分析研究，可以更好地指導臨床治療方案的制定，提高預后[2]。本次研究旨在探討乳腺癌HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達的一致性及其與臨床病理特征的關系。

1 材料與方法

1.1 材料

收集安康市中心醫院病理科80例乳腺癌患者的組織標本進行檢測，年齡25～67歲，平均年齡(39.25±10.15)歲。入組患者均具備完整的臨床資料，收集其石蠟組織標本進行研究。完整收集患者的相關臨床病理資料，包括淋巴結轉移情況和病理分期以及雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)檢測結果。針對本次研究的相關研究形式和內容等向醫院倫理學部門進行匯報，接受審核，并經批準準予實施。

1.2 方法

采用熒光標記原位雜交(FISH)與免疫組織化學法(IHC 法)檢測Her-2 基因擴增與蛋白表達情況，并分析其與ER、PR 表達、腫瘤大小等之間的關系[3-4]。試劑盒均由福州邁新生物科技有限公司提供，進行IHC法免疫組化染色。用已知陽性切片作為陽性對照，PBS緩沖液替代第一抗體為陰性對照。ER、PR，計算陽性腫瘤細胞占比腫瘤細胞≥1%核呈現棕黃色以上時，即為陽性[5]，HER-2判讀標準依據乳腺癌HER2檢測指南(2014版)[6]，Ki-67的陽性表達位于細胞核，棕色或棕褐色陽性程度；陽性細胞占比<20%為低表達，陽性細胞占比≥20%為高表達[7]。

1.3 統計學處理

完整收集各項數據結果，采用SPSS 15.0軟件進行處理，經比較存在統計學差異的標準以α=0.05進行判定。

2 結果

2.1 乳腺癌HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達的一致性

對乳腺癌HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達的一致性進行檢測和統計，可得-/+的FISH與IHC的符合率為12.50%(2/16)，++的符合率為48.94%(23/47)，+++的符合率為58.82%(10/17)。統計可得結果存在一致性，且結果之間存在正相關關系(γ=6.124，P<0.05)，見表1。

表1 乳腺癌HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達的一致性/例

2.2 乳腺癌HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達與臨床病理特征的關系

統計乳腺癌HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達與臨床病理特征的關系，可得ER、PR、ER/PR表達狀態與癌HER-2基因擴增之間存在統計學差異(P<0.05)，其中ER表達與HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達之間呈現出負相關關系(P<0.05)，PR、ER/PR表達狀態與HER-2基因擴增之間呈現出負相關關系(P<0.05)。腫瘤大小與HER-2neu蛋白表達之間呈現出正相關關系(P<0.05)。其余臨床病理特征包括患者年齡等則與HER-2基因擴增以及HER-2neu蛋白表達之間無關系，P均>0.05，見表2。

3 討論

作為惡性腫瘤中常見的一種，乳腺癌會對患者身體健康產生極大危害。受多種因素影響，乳腺癌發生、發展、轉移、復發情況較為復雜。當前對乳腺癌的研究主要以原癌基因及細胞增殖抗原為研究重點[8]。

乳腺癌患者病理檢測中，ER(雌激素受體)，Her-2，PR(孕激素受體)三大符號出現頻率最高，且具備較強的共見性。三者均為患有陰性乳腺癌的患者臨床表現，且病程侵襲性較強，內臟轉移，遠處轉移，骨轉移較高，此類患者的預后情況一般較差[9]。Her-2與乳腺癌的發生及發展之間聯系非常密切。作為能夠對人體各類表皮組織細胞生長產生強烈促進作用的基因片段，人體表皮生長因子出現表達程度超標時，Her-2就呈現陽性。此時，人體各類表皮組織增殖程度過大，形成腫瘤[8]。臨床治療過程中，一旦Her-2被激活，則腫瘤就會出現轉化活化情況。相較其他類型，Her-2陽性乳腺癌表現出更強的浸潤性，復發和轉移程度高，無病生存期短[9]。但目前用于Her-2陽性乳腺癌治療的靶向藥物治療效果非常好，因此越早實施治療，效果就越明顯。Her-2一旦與配體發生結合，其構象會出現變化，隨之發生一系列較為劇烈的連鎖反應，細胞增殖速度加快，周期加速，表現出明顯的惡性增強，并伴有抗凋亡現象[10]。本次研究結果顯示，對乳腺癌HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達的一致性進行檢測和統計，可得-/+的FISH與IHC的符合率為12.50%(2/16)，++的符合率為48.94%(23/47)，+++的符合率為58.82%(10/17)。統計可得結果存在一致性，且結果之間存在正相關關系。上述結果表明，乳腺癌HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達存在良好的一致性。ER(雌激素受體)、PR(孕激素受體)的本質都是具備某些特定功能的蛋白，能夠對乳腺癌的分化和生長起到調節作用。ER、PR表現出陽性的程度越高，則代表內分泌治療效果及預后效果越好[11]。作為和各種惡性腫瘤預后有著密切聯系的核蛋白，Ki-67抗原屬于核增殖標志物[12]。本研究結果還顯示，統計乳腺癌HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達與臨床病理特征的關系，可得ER、PR、ER/PR表達狀態與癌HER-2基因擴增之間存在統計學差異。ER表達與HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達之間呈現出負相關關系。PR、ER/PR表達狀態與HER-2基因擴增之間呈現出負相關關系。腫瘤大小與HER-2neu蛋白表達之間呈現出正相關關系(P<0.05)。其余病理情況，包括患者年齡等則與HER-2基因擴增以及HER-2neu蛋白表達之間無關系。上述結果表明，乳腺癌HER-2基因擴增與HER-2neu蛋白表達與臨床病理之間存在一定的關系。Her-2在能夠對乳腺癌患者預后情況起到預測作用的同時還是預測乳腺癌生物學行為的因子，研究其擴增和表達情況能夠對乳腺癌患者的預后情況、乳腺癌的轉移復發進行有效預測，同時還能夠預測患者對各類治療方法的敏感性[13]。在對乳腺癌組織進行檢測時，要給予ER、PR、Her-2三大指標足夠的重視，將其設為常規檢測必須項，不僅要檢測ER、PR的表達，還要注重對Her-2的檢測，并以檢測所得的Her-2表達結果為依據，進行乳腺癌患者治療方案調整，以避免預后效果看似良好的患者出現錯失治療時機的情況，更好地保證臨床治療效果[14]。

綜上所述，Her-2與乳腺癌患者的臨床病理因素情況存在密切聯系，因此，治療過程中可將Her-2檢測結果作為乳腺癌患者病情變化及預后情況的預測指標。

[1] 張 虹，司婧文，張 爽,等.伴17號染色體多體的乳腺癌患者人表皮生長因子受體2狀態的評估及意義〔J〕.中華腫瘤雜志，2016，38(2)：124-129.

[2] 蘇 靜，楊 郁，馬曉龍,等.熒光原位雜交檢測乳腺癌人表皮生長因子受體2基因擴增及與臨床病理特征的關系〔J〕.北京大學學報(醫學版)，2011，43(2)：199-203.

[3] 宋 展，文 博，孫萬日,等.老年乳腺癌組織中激素受體與人表皮生長因子受體-2及特異性核基質結合蛋白表達的相關性〔J〕.中華實驗外科雜志，2016，33(8)：2030-2032.

[4] 李文婷，王 瑩，張銀華,等.年輕女性乳腺癌中ER、PR、HER-2和Ki67的表達與臨床病理意義〔J〕.重慶醫科大學學報，2012，37(9)：783-786.

[5] 《乳腺癌雌、孕激素受體免疫組織化學檢測指南》編寫組.乳腺癌雌、孕激素受體免疫組織化學檢測指南〔J〕.中華病理學雜志，2015，44(4)：237-239.

[6] 王新昭，左文述，劉 琪，等.2013年St Gallen乳腺癌會議國際專家共識薈萃〔J〕.中華腫瘤防治雜志，2013，20(23)：1859-1864.

[7] 《乳腺癌HER2檢測指南(2014版)》編寫組.乳腺癌HER2檢測指南(2014版)〔J〕.中華病理學雜志，2014，43(4)：262-267.

[8] 劉 君，楊艷芳，顧 林,等.曲妥珠單抗在HER-2陽性乳腺癌患者新輔助治療中的應用研究進展〔J〕.中國腫瘤臨床，2014(16)：1065-1068.

[9] 馬 婕，孫圣榮，陳 創,等.納米量子點標記探針技術對乳腺癌人表皮生長因子受體2及Ⅳ型膠原蛋白的原位標記成像及臨床意義〔J〕.中華普通外科雜志，2014，29(10)：775-778.

[10] 周海豐，范玉宏，王立坤,等.乳腺癌組織中人表皮生長因子受體-2的表達與基質金屬蛋白酶-9的相關性研究〔J〕.中國臨床藥理學雜志，2016，32(8)：687-689.

[11] Pena L，Gama A，Goldschmidt MH,et al.Canine mammary tumors：a review and consensus of standard guidelines on epithelial and myoepithelial phenotype markers，HER2，and hormone receptor assessment using immunohistochemistry.(Special Focus：Investigative techniques.)〔J〕.Vet Pathol，2014，51(1)：127-145.

[12] Hanker AB，Pfefferle AD，Balko JM,et al.Mutant PIK3CA accelerates HER2-driven transgenic mammary tumors and induces resistance to combinations of anti-HER2 therapies〔J〕.Proc Natl Acad Sci U S A，2013，110(35)：14372-14377.

[13] Liu JC，Voisin V，Bader GD,et al.Seventeen-gene signature from enriched Her2/Neu mammary tumor-initiating cells predicts clinical outcome for human HER2 ～+：ERα ～- breast cancer〔J〕.Proc Natl Acad Sci USA，2012，109(15)：5832-5837.

[14] 江澤飛，邵志敏，徐兵河,等.人表皮生長因子受體2陽性乳腺癌臨床診療專家共識〔J〕.中華腫瘤雜志，2010，32(2)：158-160.