內皮素-2基因多態性與老年原發性高血壓發生及非洛地平降壓作用的關系

王健楠 王立忠 習瑾昆 李永樂

(天津醫科大學總醫院心內科，天津 300050)

原發性高血壓為一種環境因素和遺傳因素相互作用的疾病，是腎衰竭、腦卒中和冠心病的危險因素。臨床上高血壓的治療藥物有多種，但不同患者對不同降壓藥的反應不同，因此合理選擇降壓藥具有重要意義〔1，2〕。分子遺傳學的發展為從基因水平研究疾病的易感因素和藥物反應差別提供了技術和理論支持，對高血壓患者進行基因多態性研究可以為高血壓的預防、診斷和治療提供依據〔3，4〕。內皮素是縮血管物質〔5，6〕，本文對內皮素-2基因多態性與老年原發性高血壓發生及降壓治療效果的關系進行研究。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇天津醫科大學總醫院2011年1月至2016年12月診治的漢族老年原發性高血壓患者200人作為高血壓組，健康體檢老年人200例作為對照組。高血壓組年齡(71.23±8.32)歲，男127例，女73例；對照組年齡(70.03±6.57)歲，男114人，女86人，高血壓組和對照組性別和年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)。高血壓組高血壓家族史高于對照組(P<0.05)，體重指數、總膽固醇和三酰甘油水平均高于對照組(P<0.05)。見表1。高血壓診斷標準：至少3次非同日未服降壓藥的情況下收縮壓≥140 mmHg和(或)舒張壓≥90 mmHg。排除標準：相互之間有血緣關系者，冠心病者，繼發性高血壓者，糖尿病者，肝腎功能異常者，惡性腫瘤者，拒絕參與者。

表1 高血壓組和對照組臨床資料比較

1.2方法

1.2.1高血壓患者降壓治療 高血壓患者給予非洛地平(5 mg，1次/d)口服治療2個月。

1.2.2內皮素-2基因A985G位點基因型檢測 對照組于體檢時抽取外周靜脈血3 ml于抗凝管中，高血壓組于高血壓診斷時和高血壓常規治療2個月后抽取外周靜脈血3 ml于抗凝管中，采用基因芯片技術測定內皮素-2基因A985G位點基因型。具體步驟：將擴增液分裝，將各離心管中加入血液，并混勻，加入紅細胞裂解液，震蕩后離心，抽提裂解細胞，加入擴增液進行擴增，擴增條件為50℃ 5 min，94℃ 5 min，94℃ 25 s、56℃ 25 s、72℃ 25 s共40個循環，72℃延伸5 min。擴增后加入雜交液進行雜交，雜交后用蒸餾水把芯片清洗干凈，烘干，采用基因芯片分析軟件對芯片基因型進行分析。

1.3統計學方法 采用SPSS20.0軟件，基因多態性遺傳平衡檢驗及率的比較采用χ2檢驗，均數比較采用t檢驗，高血壓影響因素分析采用多因素二分類Logistic分析。

2 結 果

2.1高血壓組和對照組內皮素-2基因A985G位點基因型基因多態性遺傳平衡檢驗 經Hardy-Weinberg平衡檢驗，兩組內皮素-2基因A985G位點基因型均符合Hardy-Weinberg遺傳平衡(P>0.05)，可見，高血壓組和對照組樣本具有群體代表性。

2.2高血壓組和對照組內皮素-2基因A985G位點基因型比較 高血壓組和對照組內皮素-2基因A985G位點基因型比較差異有統計學意義(P<0.05)，高血壓組GG基因型〔157例(78.5%)〕顯著高于對照組〔113例(56.5%)，P<0.05〕，AA基因型〔4例(2.0%)〕和AG基因型〔39例(19.5%)〕顯著低于對照組〔14例(7.0%)，73例(36.5%)，均P<0.05〕。

2.3高血壓組和對照組內皮素-2基因A985G位點等位基因頻率比較 高血壓組和對照組內皮素-2基因A985G位點等位基因頻率比較差異有統計學意義(P<0.05)，高血壓組G等位基因頻率〔353例(88.3%)〕顯著高于對照組〔299例(74.8%)，P<0.05〕，A等位基因頻率〔47例(11.8%)〕顯著低于對照組〔101例(25.3%)，P<0.05〕。

2.4高血壓相關因素的二分類Logistic回歸分析 將體重指數、總膽固醇、三酰甘油、內皮素-2基因多態性作為自變量，有無高血壓作為因變量進行二分類Logistic回歸分析，結果顯示：體重指數、總膽固醇和內皮素-2基因多態性與高血壓的發生有關(P<0.05)。見表2。

表2 高血壓相關因素的二分類Logistic回歸分析

2.5高血壓患者治療前后血壓變化情況 200例高血壓患者治療后收縮壓〔(133.26±9.67)mmHg〕和舒張壓〔(82.14±7.68)mmHg〕均明顯低于治療前〔收縮壓(153.24±10.32)mmHg,舒張壓(98.67±8.53)mmHg，P<0.05〕。

2.6內皮素-2基因多態性對高血壓降壓治療效果的影響 不同內皮素-2基因型患者治療后血壓下降值比較差異有統計學意義(P<0.05)，其中GG基因型收縮壓〔(18.32±5.64)mmHg〕和舒張壓下降值〔(15.42±5.12)mmHg〕明顯高于AA基因型〔(8.56±3.24)mmHg,(6.45±3.02)mmHg〕和AG基因型〔(13.21±4.35)mmHg,(12.13±4.64)mmHg，P<0.05〕，AG基因型收縮壓和舒張壓下降值明顯高于AA基因型(均P<0.05)。

3 討 論

內皮素為一種活性多肽，由血管內皮細胞合成，內皮素通過和血管平滑肌細胞上的相應受體結合發揮內皮素加壓作用和血管收縮作用，促進血管平滑肌增殖，具有非常強的縮血管作用。內皮素收縮血管的機制可能為通過細胞內存儲鈣離子釋放或鈣離子通道開放引起細胞內鈣離子水平增加，從而引起血管收縮。內皮素可增加血管對5-羥色胺、去甲腎上腺素等縮血管物質的縮血管反應而增加外周血管阻力，從而引起血壓升高〔7,8〕。內皮素-1的基因多態性和血壓水平的關系已被研究證實〔9～11〕，A985G基因多態性是內皮素-2基因多態性研究比較多的基因位點〔12,13〕。本文對內皮素-2基因A985G位點和漢族老年原發性高血壓患者的關系進行研究，結果發現老年原發性高血壓具有家族聚集性，內皮素-2基因A985G位點基因多態性和高血壓的發生關系密切，考慮內皮素-2基因A985G位點基因多態性是老年原發性高血壓的易感因素。

血管內皮細胞分泌的內皮素在原發性高血壓的發生過程中發揮重要作用，內皮素和一氧化氮共同參與維持血壓穩定和調節血管張力，如果內皮素和一氧化氮比例失調可引起左心室肥厚、原發性高血壓、心力衰竭等。非洛地平為選擇性鈣離子拮抗劑，對小動脈平滑肌細胞鈣內流具有抑制作用〔14〕。本結果發現，內皮素-2基因A985G位點基因多態性和老年原發性高血壓的降壓效果有關，非洛地平對內皮素-2基因A985G位點GG基因型患者的效果較其他基因型好。

1Nakamura K，Stefanescu Schmidt A.Treatment of hypertension in coarctation of the aorta〔J〕.Curr Treat Options Cardiovasc Med，2016；18(6)：40.

2Solak Y，Afsar B，Vaziri ND，etal.Hypertension as an autoimmune and inflammatory disease〔J〕.Hypertens Res，2016;39(8)：567-73.

3Yang W，Lu J，Yang L，etal.Association of matrix metalloproteinase-9 gene -1562C/T polymorphism with essential hypertension：A systematic review and meta-analysis article〔J〕.Iran J Public Health，2015；44(11)：1445-52.

4Yang W，Zhu Z，Wang J，etal.Evaluation of the relationship between T663A polymorphism in the alpha-epithelial sodium channel gene and essential hypertension〔J〕.Saudi Med J，2015；36(9)：1039-45.

5Davenport AP，Hyndman KA，Dhaun N，etal.Endothelin〔J〕.Pharmacol Rev，2016；68(2)：357-418.

6Gillis EE，Sasser JM，Sullivan JC.Endothelin，sex and pregnancy：unique considerations for blood pressure control in females〔J〕.Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol，2016;310(8)：R691-6.

7Rosanò L，Bagnato A.Endothelin therapeutics in cancer：Where are we〔J〕?Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol，2016;310(6)：R469-75.

8Saleh L，Verdonk K，Visser W，etal.The emerging role of endothelin-1 in the pathogenesis of pre-eclampsia〔J〕.Ther Adv Cardiovasc Dis，2016；10(5)：282-93.

9王 鎮，張 勇，吳 懇，等.內皮素-1基因多態性與海南漢族人原發性高血壓的相關性〔J〕.中國老年學雜志，2014；34(19)：5368-70.

10Ahmed M，Rghigh A.Polymorphism in endothelin-1 gene：an overview〔J〕.Curr Clin Pharmacol，2016；11(3)：191-210.

11徐 歡，寧 麗，連玉龍，等.油田作業工人職業緊張、ET-1基因和 GDF-15基因與高血壓的關系研究〔J〕.新疆醫科大學學報，2016；39(3)：357-61.

12Nagai T，Ogimoto A，Okayama H，etal.A985G polymorphism of the endothelin-2 gene and atrial fibrillation in patients with hypertrophic cardiomyopathy〔J〕.Circ J，2007；71(12)：1932-6.

13趙鵬飛，胡 松，王 欣，等.內皮素2基因多態性與頸動脈內中膜厚度的關聯性研究〔J〕.中華老年醫學雜志，2013；32(4)：433-4.

14Navadiya K，Tiwari S.Pharmacology，efficacy and safety of felodipine with a focus on hypertension and angina pectoris〔J〕.Curr Drug Saf，2015；10(3)：194-201.