血清Irisin及其基因多態性與糖尿病腎病患者微血管病變的相關性

汪晶華，遲雁青，楊新軍，王麗暉，黃旭東,楊 潔,周 峰

糖尿病腎病是糖尿病的嚴重并發癥，是終末期腎病的主要原因之一，其發病率高，且呈逐漸增高趨勢[1-2]。糖尿病腎病一旦發展至終末期腎病，比其他類型終末期腎病治療難度更大。導致糖尿病腎病的主要原因是未控制的血糖和復雜的代謝紊亂。最近研究顯示，血清Irisin及其基因多態性與糖代謝、血脂代謝等復雜的代謝紊亂有關[3-4]。有研究顯示，血清Irisin的異常參與了妊娠期糖尿病的發病過程[5]。Shanaki等[6]研究則顯示血清Irisin水平降低與非酒精性脂肪肝、2型糖尿病有關。Irisin是近年來發現的由骨骼肌分泌的一種因子，具有促進白色脂肪棕色化、增加能量消耗、減輕體重、改善胰島素抵抗等生物學作用，從而參與人體代謝。但是目前血清Irisin及其基因多態性與糖尿病腎病患者尿蛋白的相關性尚不清楚。本研究對其進行探討，現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年1月—2017年1月解放軍白求恩國際和平醫院收治的糖尿病腎病92例。納入標準：①糖尿病腎病(依據2007年美國糖尿病學會制定的糖尿病診治指南中的診斷標準)；②尿蛋白≥30 mg/24 h；③年齡18～75歲；④同意參與本研究。排除標準：①高血壓病；②惡性腫瘤；③肝腎等臟器功能不全；④高脂血癥；⑤心肺功能不全；⑥不能配合完成本研究。根據患者入院時尿蛋白水平分為臨床蛋白尿組(尿蛋白≥300 mg/24 h)43例和微量蛋白尿組(尿蛋白30～300 mg/24 h)49例。2組性別、年齡、病程、體重指數等方面比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

表1 2組糖尿病腎病臨床資料比較

1.2觀察指標

1.2.1血清Irisin：清晨空腹條件下，抽取患者靜脈血5 ml，3000 r/min離心后，取上層血清置于-80℃冷柜中待檢。使用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清Irisin水平，具體步驟參考ELISA試劑盒，血清Irisin ELISA試劑盒購買自上海酶聯生物科技有限公司。

1.2.2血清Irisin基因多態性：采用Haploview軟件根據HapMap中國人數據庫選取FNDC5基因的3個標簽單核苷酸多態性位點，分別是rs1570569、rs16835198和rs3480作為檢測位點，以枸櫞酸鈉為抗凝劑，抽取所有患者外周靜脈血各5 ml，采用蛋白酶鹽析法提取血液中白細胞DNA。血清Irisin基因多態性位點rs1570569、rs16835198和rs3480為候選基因，以單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphisms， SNP)位點作為遺傳標記，應用聚合酶鏈-連接酶方法確定個體基因型。

2 結果

2.1血清Irisin和尿蛋白水平的相關性 臨床蛋白尿組血清Irisin低于微量蛋白尿組,蛋白尿水平高于微量蛋白尿組(P<0.01)。見表2。相關性分析顯示血清Irisin水平與糖尿病腎病尿蛋白水平呈負相關(r=-0.239,P=0.021)。見圖1。

表2 2組糖尿病腎病血清Irisin和尿蛋白水平比較

圖1血清Irisin水平與糖尿病腎病患者尿蛋白水平的相關性分析

2.2血清Irisin基因rs16835198差異 2組血清Irisin基因rs16835198多態性分布比較差異有統計學意義(P<0.05)。2組血清Irisin基因rs1570569和rs3480多態性分布比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 2組糖尿病腎病血清Irisin基因rs16835198、rs1570569和rs3480多態性分布(例)

3 討論

隨著飲食結構和生活方式的改變，糖尿病發病率越來越高，如控制不良，可進展為糖尿病腎病。糖尿病腎病是糖尿病的終末期，也是導致患者死亡的重要原因[7-11]。對于糖尿病腎病患者，目前尚無良好的治療方法，因此臨床醫生更關注如何防止糖尿病進展為糖尿病腎病。

血清Irisin是一種肌肉因子，由膜蛋白含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5經過蛋白水解形成，其本質是一種多肽片段。血清Irisin可以通過促進能量產生、機體代謝、參與糖代謝等影響機體功能。糖尿病腎病是以糖代謝紊亂為主、同時伴有脂肪代謝等一系列代謝異常的全身性疾病，因此血清Irisin可能參與了糖尿病腎病的發展過程，但目前相關研究較為缺乏。本研究結果顯示，糖尿病腎病患者血清Irisin與尿蛋白水平呈負相關，且臨床蛋白尿和微量蛋白尿患者血清Irisin基因rs16835198多態性分布存在差異。

我國學者研究則顯示血清Irisin濃度與糖尿病腎病、糖尿病視網膜病變有關[12]。糖尿病腎病、糖尿病視網膜病變均與糖尿病微血管病變有關，提示血清Irisin濃度降低加速了糖尿病患者微血管病變的發展過程。Khidr等[13]研究顯示，血清Irisin濃度降低與2型糖尿病的發生和發展有關，但該研究未觀察到血清Irisin基因rs16835198多態性分布對腎臟病變有影響。而Sanchis-Gomar等[14]研究則顯示血清Irisin基因rs16835198多態性位點中T等位基因較G等位基因更有生物學活性。本研究結果顯示，臨床蛋白尿組血清Irisin基因rs16835198多態性位點中T等位基因表達水平較低(7/43)，提示血清Irisin基因rs16835198變異后，導致其生物學活性降低，血清Irisin表達水平下降，而參與了糖尿病腎病的發展過程。在其他病變的患者中也證實了血清Irisin水平降低與微血管病變有關[15-17]。

綜上所述，糖尿病腎病患者血清Irisin水平下降、血清Irisin基因rs16835198多態性分布與腎微血管病變有關。

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