87株兒童感染肺炎鏈球菌的臨床耐藥監測情況分析

黃錦蓮

（福建省沙縣醫院檢驗科 福建 沙縣365050）

肺炎鏈球菌是引起社區獲得性肺炎的一種常見病原菌，可導致慢性支氣管炎、中耳炎、肺炎等,嚴重者甚至并可引起腦膜炎、敗血癥等疾病。近年來，我國肺炎鏈球菌感染率呈上升趨勢，已成為全球肺炎鏈球菌感染相關疾病死亡最為嚴重的國家之一。同時抗生素耐藥的肺炎鏈球菌已在全球蔓延，導致肺炎鏈球菌感染治療失敗的危險性增高。肺炎鏈球菌對常用藥物的耐藥性不斷增長，也存在明顯地域差異。本研究通過對我院2014年1月至2017年6月分離到的87株肺炎鏈球菌進行臨床耐藥監測回顧分析，以便指導臨床治療合理用藥。

1.材料與方法

1.1 臨床資料

選擇在我院門診及住院病人診斷為肺炎的991例兒童，男576例，年齡2周～12歲，平均年齡3.82±1.18歲，女415例，年齡1周～13歲，平均年齡3.68±1.24歲，采集臨床標本（痰液、咽拭子、血液、腦脊液等）進行肺炎鏈球菌分離培養鑒定等。

1.2 主要試劑及儀器

膽汁溶菌、奧普托欣紙片為杭州天和微生物試劑有限公司生產，哥倫比亞血平板，美國BD Phoenix 100全自動微生物分析儀及配套的試劑。

1.3 肺炎鏈球菌的分離培養、鑒定和藥敏實驗

取臨床標本(痰液、咽拭子）接種于哥倫比亞血瓊脂培養基上，置于5%的二氧化碳培養箱中，在37℃條件下培養18～24h，或者腦脊液血液標本接種于血培養瓶中，置于血培養箱儀中，陽性瓶報警后接種于血平板中。對疑似肺炎鏈球菌的菌落通過革蘭染色鏡檢、奧普托欣(optochin)和膽汁溶解試驗初步鑒定，菌落典型者采用美國BD Phoenix 100全自動微生物分析儀及配套試劑進行鑒定及藥敏MIC測定，采用標準菌株肺炎鏈球菌ATCC 49619進行質控。

1.4 統計學分析

采用WHONET5.4軟件對分離出的肺炎鏈球菌感染患兒的相關臨床資料及藥敏結果進行統計分析。

2.結果

2.1 標本的種類來源

991 份臨床樣本中，共分離到87株肺炎鏈球菌，陽性率為8.78%。見表1。

表1 標本種類來源情況

2.2 耐藥情況分布

87株肺炎鏈球菌中，對紅霉素、四環素、復方新諾明耐藥率比較高，耐藥率依次為72.41%、74.71%、67.82%，對厄他培南、利奈唑烷、萬古霉素三種藥物未發現耐藥情況。見表2。

表2 耐藥分布情況表

3.結論

本研究中通過對991份臨床樣本進行肺炎鏈球菌的分離培養，共分離到87株肺炎鏈球菌，陽性率為8.78%，陽性率略低可能有些肺炎兒童已經有自行服用抗生素后，對培養結果產生的影響。本文中的臨床標本來源主要采集了患兒的痰液、咽拭子、血液、腦脊液等，通過這些標本的選擇可以避免定植于鼻咽部的肺炎鏈球菌影響，有利于臨床分離到致病的肺炎鏈球菌病原生物學鑒定。在991份標本中，從625份痰液標本中分離到47株，陽性率7.52%，235份咽拭子中分離到23株（9.79%），109份血液中分離到14株（12.84%），22份腦脊液中分離到3株（13.64%）。不同標本種類都能分離到肺炎鏈球菌，痰液標本是比較容易見到獲取的標本，但需要嚴格控制是否為合格的臨床標本，否則易影響到菌株的分離率。咽拭子也是比較好獲取的標本，是無創檢查，患兒及家屬也較容易接受。而血液及腦脊液標本，是種有創檢查，兒童及家屬難于接受，一般在重癥患兒才采集此類標本，為此本研究中血液及腦脊液的標本較少。

肺炎鏈球菌耐藥已經成為全世界范圍一個突出問題，且呈逐年增長。表2中結果顯示，87株肺炎鏈球菌對抗生素耐藥較高的為四環素74.71%（65/87）、紅霉素72.41%（63/87）、復方新諾明67.82%（59/87）；同時青霉素34.48%（30/87）,阿莫西林32.18%、頭孢噻肟24.14%、頭孢曲松22.99%，也是出現不同程度的耐藥；而厄他培南、利奈唑烷、萬古霉素這三種未發現耐藥菌株。不同藥物的耐藥機制是不一樣的，如四環素耐藥機制主要是通過主動外排系統，將藥物排除菌體；其次為產生一種保護核糖體的蛋白，使藥物不能與核糖體結合，本研究中四環素的耐藥率為74.71%,是所監測的16種抗生素中耐藥最嚴重的。本監測數據中發現紅霉素耐藥率為72.41%（63/87），與國內其他學者報導情況相近[1]。泰利霉素是種半合成的紅霉素衍生物，對耐紅霉素的肺炎鏈球菌表現出很高的抗菌活性，本研究顯示泰利霉素敏感性高，其毒副作用低，可為臨床治療耐藥肺炎鏈球菌提供一種抗生素選擇。87株肺炎鏈球菌對青霉素耐藥率34.48%（30/87）。肺炎鏈球菌對青霉素耐藥的機制主要是細菌細胞壁上的青霉素結合蛋白（PBP）基因發生變異，隨即高分子量PBP的結構發生改變，使其對抗生素分子的親和力降低而產生耐藥[2]。青霉素結合蛋白變異或多或少涉及到頭孢菌素，這是肺炎鏈球菌對頭孢菌素耐藥的一個重要原因。監測結果顯示對頭孢噻肟和頭孢曲松耐藥率分別為24.14%和22.99%。本組資料左氟沙星耐藥率為3.45%，氧氟沙星耐藥率為1.15%，莫西沙星耐藥率為1.15%，由于喹諾酮耐藥率比較低，可作為耐青霉素肺炎鏈球菌感染的備用選擇。厄他培南、利奈唑烷、萬古霉素這三種抗生素對肺炎鏈球菌具有良好的抗菌效果，本研究的肺炎鏈球菌對該藥物全敏感，與其他文獻報道一致[3]。雖然體外藥物敏感性較高，但由于氯霉素、萬古霉素和喹諾酮類藥物對兒童骨骼生長發育有影響，因此兒童對該類藥物的使用受到較大的限制。

綜上所述，肺炎鏈球菌感染引起的高發病率和致死率且對抗菌藥物的耐藥狀況比較嚴峻，為此我們必須加強肺炎鏈球菌的篩查及耐藥性監測，指導臨床合理用藥。

【參考文獻】

[1]陳文標，朱焱，黃東紅，等.2013-2014年泉州地區肺炎鏈球菌感染的分布與耐藥性分析[J].海南醫學，2015，26（24）：3655-3658.

[2]郭映輝，何寶花，王穎童,等.182株兒童患者肺炎鏈球菌的分子生物學鑒定及分型[J].中國感染控制雜志,2017,16(4):326-328.

[3]鄧林強，陳會，郭建軍，等.100株肺炎鏈球菌耐藥性分析[J].實驗與檢驗醫學，2011，29（6）：633-634.