轉錄因子陰陽1在多囊卵巢綜合征患者性激素合成中的調節作用研究

王婉雪，張加苗，謝易冉，李哲鄖，朱潔茹，歐建平，楊一華,2*

（1．桂林醫學院，廣西 桂林 541000；2．廣西醫科大學第一附屬醫院生殖醫學研究中心，廣西 南寧 530022；3．中山大學第三附屬醫院生殖中心，廣東 廣州 510000）

多囊卵巢綜合征合并胰島素抵抗不僅引起患者內分泌調節紊亂進而不排卵，也是PCOS患者高雄激素血癥的重要因素，被認為是多數PCOS患者病理生理學紊亂的始因[1]。

YINYANG 1（YY1）作為一個重要的轉錄調節因子，可以結合到基因啟動子區域，募集其他協調作用因子，通過表觀修飾作用調節靶基因的轉錄[2]。提示YY1在細胞中具有廣泛的作用，調控一個復雜的調節網絡從而在不同的細胞信號通路發揮重要作用[3,4]。之前我們曾經研究了YY1在子宮內膜腺樣癌發病過程表觀遺傳調控，并發現YY1能結合在APC基因啟動子區特定靶點，通過募集聚梳蛋白基因家族抑制復合體2（Polycomb Repressive Complex 2），引起組蛋白H3賴氨酸K27上三甲基化（H3K27me3），后者使得APC表達沉默，wnt/beta-catenin信號激活，促進細胞增殖和侵襲，最終導致腫瘤發生發展[5]。鑒于YY1轉錄調控活性的廣泛性和顯著性，我們推測其在PCOS患者內分泌及代謝紊亂病理生理過程中發揮表觀修飾作用，故進行本研究。

1　資料與方法

1.1　資料

PCOS診斷標準（2003年鹿特丹）。排除標準：（1）臨床資料不齊全。（2）伴隨其他影響糖代謝疾病的患者，如1型糖尿病等。（3）后續助孕無可用胚胎移植患者。

1.2　方法

顆粒細胞及卵泡液收集：本研究收集桂林醫學院附屬醫院進行IVF-ET助孕患者穿刺取卵術后丟棄卵泡液60份。在4℃以3000 rpm離心10 min，取上清液凍存于-70℃待檢。YY1濃度采用ELISA法測定。入選標準：對照組，即非胰島素抵抗PCOS組（30份）：年齡20～40歲，月經規律，因為男方因素、輸卵管因素等原因進行IVF-ET助孕患者，HOMA＜2.7。胰島素抵抗型PCOS患者（30份）：年齡20～40歲，月經不規律，診斷為PCOS患者并進行IVF-ET助孕，HOMA≥2.7。所有入選患者均隨訪并簽署研究知情同意書。

1.3　統計學分析

采用SPSS 22.0統計學軟件，連續變量采用T檢驗，分類變量采用秩和檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結 果

表1　患者一般情況比較

表2　患者臨床結局情況比較

YY1在PCOS-IR組平均濃度0.255±0.078 ng/ml，對照組0.185±0.05 ng/ml，P=0.000，兩組間差異具有統計學意義。然后我們對YY1與臨床數據進行了相關性分析（皮爾森相關），發現有顯著性差異的為AFC（r=0.462，P=0.000），BMI（r=0.285，P=0.027），HOMA（r=0.456，P=0.000），空腹血胰島素（r=0.429，P=0.001）。

3　討 論

目前對于YY 1在PCOS發病中研究較少，但部分研究提示其在糖尿病小鼠模型骨骼肌和肝臟細胞葡萄糖代謝中發揮重要作用，研究證實YY1在骨骼肌中表達沉默，繼而激活insulin/IGF信號通路，有助于改善mTOR蛋白特異性抑制劑-雷帕霉素誘發的胰島素樣癥狀[6]。寧光教授的團隊最近在C57BL/6小鼠研究中發現胰島素抵抗可增加小鼠肝臟細胞YY1表達，進而YY1可以通過上調糖皮質激素受體促進肝細胞糖異生作用[7]。但關于YY 1對PCOS患者類固醇激素合成調節的相關研究鮮有報道，2002年有研究發現YY1通過抑制NF-Y與類固醇激素合成急性調節蛋白（StAR）啟動子結合，抑制后者的表達[8]。

至此我們僅進行了臨床樣本的表型驗證，但YY1在PCOS患者胰島素抵抗的病理生理過程中，究竟怎樣發揮表觀遺傳調控的作用尚未知曉，還需要我們進一步深入的研究。本課題組后續正在進行動物造模，細胞體外培養模擬胰島素抵抗環境，高通量測序，染色質免疫共沉淀以及雙熒光素酶報告基因等實驗，這將拓寬我們對PCOS內分泌紊亂發病分子機制的認識，為PCOS患者合并胰島素抵抗的治療提供實驗基礎。

4　結 論

我們推測YY1促進PCOS患者胰島素抵抗的發生發展；YY1可以作為PCOS患者胰島素抵抗程度的判斷指標以及在該病治療上的分子靶標。

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