試論全自動生化分析儀的參數設置

李雪明

摘要：隨著研究的深入全自動生化分析儀的應用有效提升了檢驗速度和質量，因此分析儀各項參數的設置直接影響檢測數據的準確性，因此本文著重討論自動生化分析儀的參數設置，以此提高生活檢測效率，減輕工作人員的勞動強度。

關鍵詞：自動生化分析儀 參數設置

全自動生化分析儀通過儀器自動完成檢測的整個流程，通過試劑的添加、加樣、測定、清洗、結果處理等流程，得到最終的檢測數據，從而減少傳統檢測主觀誤差的弊端，其分析方法多樣且具有良好的靈敏度，具備自檢功能以提升分析結果的準確性。

一、全自動生化分析儀應用

全自動生化分析以已廣泛應用于各個領域，逐步涌現各種商品化的試劑盒，其中主要分為單一試劑及雙試劑兩種，與之對應的不同類型的測定程序，其中一種以樣品啟動反應為測定程序的初始狀態，多使用單一符合試劑的工作溶液，另一種則是以試劑啟動反應為測定程序初始的，多采用雙試劑。

作為自動分析測試操作程序而言，使用相比于二步法雙試劑而言選擇單一試劑肯定比較方便簡單，但如果針對測試結果而言二步測定程序具備明顯的優點的情況下，應需要選擇雙試劑，需要充分考慮其穩定性和酶預活化的需要采取樣品空白測試的方法有效降低或消除可能的干擾。

二、全自動生化分析儀的參數設置

（一）方法類型的設置。全自動生化分析儀可根據試劑盒的類型、要求、反應原理進行設置，針對傳統的生化分析儀參數設置終點法智能進行一點終點法而言，選有的設備可以根據試劑類型進行選擇，單試劑則對應一點終點法，雙試劑對應的兩點終點法，例如對大多數酶測定是選擇使用速率法，而尿素氦和肌酐的測定選用兩點法進行。

（二）測定波長的選擇。測定波長的選擇首選收集3個條件數據，首先需要對待測物質在指定波長下的光吸收做出判定，充分考慮常見干擾物對該波長下光吸收對的影響，確保其吸收的峰值較寬且鈍。重視試劑盒標明和提供的波長參數范圍，部分全自動生化分析儀收濾光片數量的限制，在使用過程中以就近原則進行選擇。

（三）溫度的設置。與傳統的半自動生化儀不同，目前全自動生化分析儀的測定未定都固定在37攝氏度，沒有原有的室溫、25、30、37攝氏度溫度的設定。對于終點法而言測定均在機外進行，將溫度設定為室溫能夠減少調整時間，有效提高工作效率。如果選擇速率法或兩點法則將溫度設定在37攝氏度比較合適。

（四）設定樣品體積分數。將樣品體積與反應液總體積的比值稱為樣品體積分數，在酶活力的特定中，將全自動生活分析儀的總體積比例控制在10%的范圍下。通常情況下待測物質在樣品中的勝利波動范圍較大且含量較低，這就需要加大樣品用量。在測定膽固醇及血清葡萄糖數值是需要將樣品試劑的比值控制在1：100的范圍，如果測定高密度脂蛋白膽固醇或血尿酸數值是則調整為1：50，根據試劑情況進行參數設置。在全自動生化分析儀的參數設置方面均已試劑的說明為主，根據最終反應液量計算試劑量和樣本量，不輕易進行改動。

（五）吸液量的測定。無論是傳統的半自動生化分析儀或全自動洗液量均針對流動比色進行設定，原則上吸入量的參數設置控制在反應液總體積數值一下，避免導致出現比色池氣泡，同時注意留100～200μl的吸入量余地。

（六）延遲時間參數設置。試劑與樣品混合后監測開始之間的時間稱之為延遲時間，針對延遲時間的參數設置依據被測樣品的濃度或酶活性的大小。酶促反應的級數、樣品中所含干擾物消除所需時間及反應速度的快慢等，例如在檢測CHE活性是需要20-30秒的時間，ALT則需要40-60秒、對于傳統的半自動生化儀中酶活性的連續檢測需要重視延遲時間的設定，對單一樣品進行逐一測定，并將延遲時間全部設置在儀器內，延遲加監測的時間至少需要1分鐘左右，造成守候時間較長的情況發生。全自動生化分析儀將控溫、加樣、讀數、實際特點、室溫情況等參數考慮在內，將部分延遲時間移除在設備外，確保機內延遲時間不進入結果數據的線性反應期，限制延遲、監測、反應時間的影響，有效減少測定樣品反應的線性范圍，避免發生底物耗盡的情況。

針對酶促反應的延遲時間，在過量底物存在的情況下全自動生化分析儀反應速率加快以至于到達反應速率穩的階段，使得酶促反應的速率保持恒定，不受反應液濃度的影響，這個階段稱之為線性反應期或零級反應期，全自動生化分析儀的檢測時間就在這個時期。以酶監測為例采用連續檢測法至少保持在90-120秒的范圍內，或者至少有4個點的△A，否則不能計算其線性度。如果檢測時間過長則會造成底物耗盡的情況，可測范圍也會相應的變窄。

（七）設置標準的確定。針對終點法和兩點法而言必須設置標準，對于全自動生化分析儀而言設置合適的標準品對于測量結果的準確性尤為重要。部分試劑盒內配有標準液但存在定標偏差較大的問題，例如使用干粉復合羅氏校準液，如果復溶則采用分裝冷凍的方式保存，確保水質的質量，避免反復凍融對測試和校準結果造成影響。在實際使用中注意校準液的獲取發放，根據不同的方法與之對應的耙值存在差異，不可簡單套用。

（八）吸光度的參數設置。針對全自動生化分析儀而言吸光度的上下限參數需要進行設置，用以檢測試劑的質量，但試劑的吸光度上下線不是試劑質量的唯一指標，需要校準頻率和室內質控對質量進行保證，例如在入場的酶活力測定時試劑的空白數據在規定限值內如果質控物測定見過持續偏低，則難以判斷最終數據。

三、結束語

在使用全自動生化分析儀時為了確保測定結果的準確性需要對上機參數進行設定，充分考慮試劑之間的相互影響因素，避免測試項目中使用的試劑成分對下一個測定項目或成分造成影響。注意將PH數值不同或差異較大的試劑分開測定，避免相互干擾影響最終的測試結果。重視樣本測試完畢后的清潔工作，選用無水乙醇作為擦洗試劑，避免對后續的檢測造成誤差。