新生兒CMV感染情況及其與連接蛋白Cx26基因突變的相關性

熊雨美，楊好妹，劉光明，李佩青

(廣州市婦女兒童醫療中心急診科，廣東 廣州 510120)

人類巨細胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)是人類皰疹病毒組中最大的一種病毒，臨床上亦被稱為涎病毒，由于其進入人體細胞后很容易使細胞增大，因此稱為巨細胞病毒。有研究表明，聽力損害與連接蛋白Cx26基因突變密切相關[1]。為此，本研究將2014年5月至2017年2月廣州市婦女兒童醫療中心收治的104例新生兒作為研究對象，探討其巨細胞病毒(cytomegalovirus，CMV)感染情況及與連接蛋白Cx26基因突變的相關性。

1對象與方法

1.1研究對象

將2014年5月至2017年2月廣州市婦女兒童醫療中心收治的104例新生兒作為研究對象，其中42例CMV-DNA陰性新生兒作為甲組，62例CMV-DNA陽性新生兒作為乙組。甲組中男23例，女19例；乙組中男32例，女30例。兩組性別的比較，差異無統計學意義(P>0.05)。本研究經本院醫學倫理委員會批準。

1.2納入與排除標準

所有入選新生兒均出生胎齡大于37周且無嚴重并發癥；所有新生兒家屬均知情同意。排除標準：胎齡低于37周的新生兒；合并有重大臟器并發癥的新生兒；需采取重癥監護治療的新生兒；因各種原因無法配合完成本次研究的新生兒。

1.3研究方法

采集兩組新生兒臍血，根據反轉錄-聚合酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)法對兩組新生兒的Cx26基因mRNA表達情況進行檢測，同時分析兩組新生兒的血生化情況，即血清總膽紅素(total bilirubin，TBil)、天門冬氨酸轉氨酶(aspartate amino￣transferase，AST)、谷氨酸轉氨酶(alanine transaminase，ALT)等。將先天性CMV感染的新生兒劃分為肝功能異常型和肝功能正常型兩種。追蹤兩組新生兒的聽力情況，分析兩組新生兒的聽力檢測結果、Cx26基因變異情況和CMV感染類型的相關性。

1.4聽力隨訪

對于早產兒，在其出生3～14天內采用耳聲發射儀進行聽力初步篩查，而足月新生兒則在其出生2～3天內采用耳聲發射儀進行聽力初步篩查；對于沒有通過初步篩查的新生兒，在出生42天時采用耳聲發射儀進行復篩，如果仍然沒有通過，則在出生3個月時進行腦干誘發電位檢查，將雙耳聽閾大于25dBnHL的新生兒判斷為感音神經性聾(sensorineural hearing loss，SNHL)[2]。根據結果對非先天性和先天性CMV感染新生兒的聽力變化進行分析，同時將新生兒的聽力變化情況與其Cx26基因突變情況進行相關性分析。

1.5統計學方法

2結果

2.1比較各組新生兒的生化指標

甲組血生化指標檢測均無異常，乙組27例新生兒的AST、ALT水平顯著高于正常值，且TBil水平也顯著升高，因此將該27例新生兒劃分為肝功能異常型的先天性CMV感染，而另外35例新生兒則劃分為肝功能正常型的先天性CMV感染。乙組的TBil、AST、ALT值都高于甲組，差異均有統計學意義(t值分別為9.57、15.73、12.04，均P<0.05)，見表1。

表1 兩組新生兒的生化指標比較Table 1 Comparison of biochemical indexes

2.2 Cx26基因突變結果

甲組新生兒中有2例出現235delC突變，有1例出現多態性改變343A-G1。乙組新生兒中肝功能正常型有21例出現235delC突變，有1例出現多態性改變79G-A；肝功能異常型中有18例出現235delC突變。

2.3聽力隨訪結果

甲組新生兒中有36例通過聽力初篩，其余6例均通過聽力復篩。乙組肝功能正常型新生兒中，有24例通過聽力初篩，有4例通過聽力復篩，其余7例新生兒中有3例經腦干誘發電位檢查判斷為異常；乙組肝功能異常型新生兒中有8例通過聽力初篩，有6例通過聽力復篩，其余13例新生兒中有8例經腦干誘發電位檢查判斷為異常，見表2。

2.4 Cx26基因突變與CMV感染和感音神經性聾的關系

在控制感音神經性聾變量時進行偏相關分析，Cx26基因突變與CMV感染的相關系數r=0.571，P<0.05；在控制CMV感染變量時進行偏相關分析，感音神經性聾與Cx26基因突變之間的相關系數r=0.209，P<0.05；在控制Cx26基因突變變量時進行偏相關分析，感音神經性聾與CMV感染之間的相關系數r=0.381，P<0.05，見表3。

表2 聽力隨訪結果[n(%)]Table 2 Results of hearing followed up[n(%)]

3討論

3.1 CMV對新生兒的危害

CMV在我國流行較為廣泛，其中成人感染率高達95%，一般情況下大多數正常人會有CMV潛伏，其潛伏部位主要是白細胞、睪丸、子宮頸、腎臟、乳腺、唾液腺及其他腺體之中[3]。該病毒可致畸，作用機制主要是染色體分裂異常、基因整合、同源基因表達受影響以及胎盤和絨毛損害等[4]。但是對于大對數免疫正常的個體而言均表現為無癥狀感染，在部分胎兒、嬰幼兒及免疫抑制個體中感染則會出現明顯的病癥。臨床上人類CMV感染可以根據感染的時間分為先天性感染和后天性感染兩種類型，前者是由于孕婦接觸病毒，使得病毒進入胎盤致胎兒感染，另外部分隱性感染的孕婦，其病毒在妊娠后期被激活，經產道或泌尿道排出使得分娩時新生兒在經過產道時被感染。據報道，先天性感染CMV的新生兒絕大多數會有如感音神經性聾等較為明顯的后遺癥，其發生時間一般在新生兒出生后至數年之間，并且大多數都會呈現為漸進性惡化[5]。無癥狀感染的新生兒雖然具有較好的預后，但是也會存在單側或雙側的進行性神經性耳聾。據有關資料顯示，先天性CMV感染肝功能異常型新生兒有35%～65%的幾率會出現聽力障礙，而肝功能正常的新生兒出現聽力障礙的幾率為7%～15%，并且前者出現聽力障礙的時間更早，亦較為嚴重[6]

3.2 Cx26基因突變是導致患兒出現感音神經性聾的根本原因

本次研究中，甲組新生兒的血生化指標檢測均無異常，乙組新生兒中則有27例新生兒的AST和ALT的水平顯著高于正常值，且TBil水平也顯著升高。因此將該27例新生兒劃分為肝功能異常型的先天性CMV感染，而另外35例新生兒則劃分為肝功能正常型的先天性CMV感染。甲組新生兒中有2例新生兒出現235delC突變，有1例出現多態性改變343A-G1；乙組新生兒中肝功能正常型有21例出現235delC突變，有1例出現多態性改變79G-A；肝功能異常型中有18例出現235delC突變。本次研究中Cx26基因突變主要表現為235delC突變，與既往調查資料相符[7]，而多態性基因改變由于不是致病性突變，因此不需要分析該基因突變與聽力損害的關系。縫隙連接是完成細胞間通訊的結構基礎，而Cx26基因則參與該連接中離子通道的形成，因此Cx26基因突變會破壞該蛋白質的正常結構，上皮細胞間連接通道完整性破壞及通道開關異常，使細胞間信息傳遞受阻或紊亂，而細胞內外的離子濃度是毛細胞能量轉換的基礎，從而形成異?？p隙連接使得鉀離子回流受阻，最終導致患兒出現感音神經性聾[8]。

3.3 Cx26基因、CMV和感音神經性聾三者間的關系

在本次研究中，甲組新生兒中有36例通過聽力初篩，其余6例均通過聽力復篩；乙組肝功能正常型新生兒中，有24例通過聽力初篩，有4例通過聽力復篩，剩下7例新生兒中有3例經腦干誘發電位檢查判斷為異常；乙組肝功能異常型新生兒中有8例通過聽力初篩，有6例通過聽力復篩，剩下13例新生兒中有8例經腦干誘發電位檢查判斷為異常。在控制感音神經性聾變量時進行偏相關分析，Cx26基因突變與CMV感染的相關系數r=0.571，P<0.05，提示Cx26基因突變與CMV感染有正相關關系。在控制CMV感染變量時進行偏相關分析，感音神經性聾與Cx26基因突變的相關系數r=0.209，P<0.05，提示感音神經性聾與Cx26基因突變之間具有弱相關關系。在控制Cx26基因突變變量時進行偏相關分析，感音神經性聾與CMV感染之間的相關系數r=0.381，P<0.05，提示感音神經性聾與CMV感染之間具有正相關關系。

綜上所述，新生兒CMV感染會使其Cx26基因發生突變，并且會進一步損害患兒的聽力，其中肝功能異常型CMV感染會大大增加患兒出現感音性神經性聾和Cx26基因突變的概率。

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[專業責任編輯：艾 婷]