兒童嚴重膿毒癥溶酶體膜蛋白分子變化及意義

常海霞，張麗波，張中馥

(1.河北省兒童醫院急診科，河北 石家莊 050031；2.河北省軍區門診部內科，河北 石家莊 050081)

膿毒癥目前可作為導致小兒死亡的最常見的一種危重疾病，對患兒的身心健康造成了較大的影響。據調查研究資料顯示，該病的病死率可高達30%～50%之間，總結其發病機制主要是因炎癥反應、凝血活化及纖維抑制等相互作用所形成的級聯反應，同時凝血系統的活化在膿毒癥發生發展過程中占有重要的環節與地位[1-2]。另外，血小板(platelet,PLT)在炎癥與凝血之間存在的復雜過程也可作為血小板活化的標志，而溶酶體膜蛋白分子可作為一類用于活化血小板的膜糖蛋白[3]。CD63又被稱為溶酶體相關膜蛋白3(LAMP3)，屬于四次跨膜蛋白超家族成員，存在于許多類型細胞的表面，可能與諸多疾病的發生發展具有一定的相關性。本文針對嚴重膿毒癥患兒的溶酶體膜蛋白分子水平進行相關研究，結果報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取河北省兒童醫院2015年3月至2016年3月收治的小兒膿毒癥患兒90例，均接受了血液、尿液、痰液等標本檢測，并進行了胸部X線、超聲及CT檢查來判斷感染的部位。按照2008年國際嚴重膿毒癥、膿毒癥休克治療指南[4]診斷。排除了合并腫瘤性疾病、先天性疾病、接受器官移植或長時間服用免疫功能類藥物者。按照患兒病情嚴重程度分為一般膿毒癥組(符合膿毒癥診斷標準，但仍未達到嚴重膿毒癥標準)及嚴重膿毒癥組(膿毒癥合并臟器功能不全及組織低灌注壓)，每組各45例，一般膿毒癥組中男25例，女20例，年齡在5個月至2歲之間，平均年齡為(1.25±0.02)歲；嚴重膿毒癥組中男24例，女21例，年齡在4個月至3歲之間，平均年齡為(1.27±0.04)歲；另選擇健康體檢兒童40例作為對照組，其中男24例，女21例，年齡在4個月至3歲之間，平均年齡為(1.29±0.04)歲。三組的一般資料均無明顯差異(均P>0.05)，具有可比性。全部患兒家屬均簽署了知情權同意書，本研究通過醫院倫理委員會核對批準。

1.2方法

患兒入院后2h內，在未接受抗生素治療前第1天、接受抗感染治療后的第7天，采用流式細胞術對其外周血溶酶體膜蛋白分子水平進行檢測。將收集到的3mL空腹靜脈血放置在3.8%的枸櫞酸鈉試管中，采用流式細胞儀對溶酶體膜蛋白分子水平進行檢測[5]，采用全自動血球分析儀對血小板的參數進行測量。

1.3統計學方法

采用SPSS 19.0統計學軟件對數據進行分析，計量資料采用均數±標準差(χ±S)表示，均值比較采用t檢驗，組間比較采用方差分析，P<0.05為差異均有統計學意義。

2結果

2.1三組兒童入院后外周血CD63及血小板水平情況

三組的外周血CD63水平和PLT水平比較，差異均具有統計學意義(均P<0.05)；一般膿毒癥組、嚴重膿毒癥組分別與對照組比較，外周血CD63水平均較高(t值分別為4.346、3.902，均P<0.05)，PLT水平均較低(t值分別為5.123、4.773，均P<0.05)；嚴重膿毒癥組與一般膿毒癥組比較，外周血CD63水平較高(t=5.464，P<0.05)，PLT水平較低(t=6.021，P<0.05)，差異均具有統計學意義，見表1。

表1三組外周血CD63和PLT水平的比較結果(χ±S)

Table 1 Comparison of CD63 and PLT levels of peripheral blood among three groups(χ±S)

組別例數(n)CD63(%)PLT(×109/L)對照組401．62±0．36212．36±42．56一般膿毒癥組455．78±0．45110．25±35．24嚴重膿毒癥組4511．52±1．7680．57±34．78F7．0215．362P<0．05<0．05

2.2嚴重膿毒癥組患兒治療前后外周血CD63及血小板水平對比

嚴重膿毒癥組在入院治療前、入院后第1天、入院后第7天的CD63和血小板水平比較差異均具有統計學意義(均P<0.05)，見表2。

嚴重膿毒癥組患兒在入院后第1天與入院治療前和入院后第7天相比CD63水平均較高(t=3.457，P=0.022；t=4.126，P=0.022，PLT水平均較低(t=4.012，P=0.018；t=5.945，P=0.139)；嚴重膿毒癥組患兒在入院后第7天與入院治療前相比CD63水平較低(t=3.982，P=0.019)，PLT水平較高(t=4.452，P=0.015)，見表2。

表2嚴重膿毒癥組患兒治療前后外周血CD63及PLT水平比較結果(χ±S)

Table 2Comparison of CD63 and PLT levels of peripheral blood in patients with severe sepsis before and after treatment(χ±S)

治療時間例數(n)CD63(%)PLT(×109/L)入院治療前4510．98±1．6780．55±40．67入院后第1天4514．23±1．5074．23±24．11入院后第7天452．89±0．53197．23±46．25F7．7835．214P<0．05<0．05

3討論

3.1兒童膿毒癥的發病原因

膿毒癥作為一種能夠引起多臟器功能障礙綜合征的常見病，是重癥監護室(intensive care unit，ICU)內導致患者死亡的最常見原因。據近年來的研究報道指出，能夠引起膿毒癥的細胞及其分析機制可總結為，患者在抵制炎癥并有效維持自穩方面的天然生理機制尚不清楚，因此，目前尚無有效的治療方法[6]。有研究報道指出，膿毒癥時可產生較為嚴重的炎性反應及凝血方面的障礙，均可導致多器官功能衰竭的發生與發展。另外，作為疾病發生發展的生理基礎，發生活化的血小板正巧能夠作為連接炎性反應及凝血反應之間的有效橋梁，有效地促進了疾病的進展[7]。有臨床資料顯示，嚴重的膿毒癥及發生了膿毒性休克的患者，其體內存在著異常改變的血液流變及血小板功能，且血小板數與膿毒癥的嚴重程度可呈負相關關系，而膿毒癥患者正是因為遭受著不同程度的缺氧、酸中毒、內毒素及休克等因素的影響，使得血管內皮受損、血小板過度聚集及全身感染等一系列情況[8-9]。結合以往研究發現，血小板在膿毒癥的發生發展中可能起著重要的作用，一方面能夠對自身功能進行有效的調節，同時還可能對周圍的血細胞功能進行有效的調節，血小板的重要功能與作用是參與著血栓形成的發生與發展，而其功能的發揮與其表面的CD63具有密切的相關性[10]。

3.2兒童嚴重膿毒癥溶酶體膜蛋白分子水平變化及其臨床意義

CD63作為溶酶體顆粒膜蛋白的一種，在靜止的血小板表面不會具有較高的表達水平，但在血小板發生活化后，CD63分子則能夠迅速的表達，并對血小板及中性粒細胞的黏附與連接過程產生有效的促進誘導作用，同時還與血小板的聚集及血栓形成具有密切的相關性[11]。因此，對CD63水平進行檢測可作為判斷膿毒癥發生發展及治療的一項重要指標。本研究結果顯示，一般膿毒癥與嚴重膿毒癥與對照組相比外周血CD63水平較高，PLT水平較低，嚴重膿毒癥組與一般膿毒癥組相比外周血CD63水平較高，PLT水平較低，差異均具有統計學意義(均P<0.05)。結果提示，膿毒癥患兒的血小板激活程度與疾病的嚴重程度存在一定的關系，通常可體現為病情越嚴重，血小板激活程度越高，臟器功能損傷就越嚴重[12]。而經過規范的治療后，嚴重膿毒癥組患兒入院后第1天與入院治療前相比CD63水平較高，PLT水平較低，入院后第7天與入院時治療前、入院后第1天相比CD63較低，PLT較高，差異均具有統計學意義(均P<0.05)。結果提示，在經過治療后，膿毒癥患兒的感染得到了有效的控制，而對CD63的監測不僅能夠有效地反應出疾病的嚴重程度，同時可用于觀察判斷療效，為臨床用藥給予有效的指導，具有重要意義。

綜上所述，溶酶體膜蛋白分子在兒童嚴重膿毒癥中具有較高的水平，促進了血小板參數水平的降低，可能加重了膿毒癥的病情。由于本次研究樣本量有限，且未能長期隨訪，因此期望通過進一步深入研究以獲得更加精確的結論。

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