血清Aβ1-42、UA水平和血清炎癥因子與帕金森病發病的相關性研究

吳文波，王 超，牛德旺，胡超勝

(安陽地區醫院 神經內科，河南 安陽455000)

帕金森病(PD)是老年人群中常見的神經系統退變性疾病，常合并認知功能障礙[1,2]。有研究報道[3]，漢族PD患者約有29.10%伴輕度認知損害，若錯過干預治療的最佳時期，約有80%的患者將進展成為帕金森病癡呆(PDD)。近年來，有學者對PD蛋白質標志物的研究發現，PD患者血清中β淀粉樣蛋白(Aβ)1-42水平下降對PD早期診斷具有重要意義。本研究通過檢測Aβ1-42、尿酸(UA)等生化指標并結合認知功能的檢查，探討Aβ1-42、UA水平和血清炎癥因子(IL-6、TNF-α)與帕金森病(PD)患者發病的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2014年6月至2017年9月在我院診斷為帕金森病的120例患者作為PD組，其中男性74例，女性46例，年齡55-88歲，平均年齡(65.47±15.11)歲。納入標準:符合帕金森病的診斷標準，排除其他中樞神經系統疾病導致的癡呆患者，不伴有心、肝、腎等臟器功能嚴重障礙,患者或家屬對本研究知情并簽署知情同意書，一般資料和病理資料完整。按照Hoehn-Yahr(H-Y)分期標準將PD組患者進一步分為輕度PD組(n=52，H-Y 分期1-2.5)和中、重度PD組(n=68，H-Y 分期≥3 期)。另選取同期健康體檢者120例為對照組，其中男性71例，女性49例，年齡54-85歲，平均年齡(62.75±11.15)歲。納入標準:自愿參與本次研究,并簽署知情同意書；排除標準：排除PD之外其他如由心、肺、腎、肝、內分泌、血液系統等導致的認知功能障礙，嚴重焦慮、抑郁和精神分裂癥等心理疾病，失語、譫妄、意識障礙等影響認知功能評估的疾病。兩組年齡、性別等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

清晨空腹采集5 ml外周靜脈血作為樣本，3 000 轉/min離心 10 min，提取上清，于-80 ℃保存，檢測前統一解凍，4 ℃過夜，次日按人血清 Aβ1-42 ELISA 檢測試劑盒(貨號 CSB-E10684h，武漢華美公司)說明檢測Aβ1-42水平。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法檢測IL-6、TNF-α水平，所需的ELISA試劑盒購自蘇州露水生物科技有限公司。操作步驟嚴格按照試劑盒操作說明進行。

1.3統計學方法

2 結果

2.1兩組血清Aβ1-42、UA及血清炎癥因子水平比較

與對照組相比，PD組患者血清中Aβ1-42、UA水平明顯降低，差異有統計學意義(P<0.05)；血清炎癥因子IL-6 、TNF-α水平明顯升高，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組血清Aβ1-42、UA及血清炎癥因子水平比較

2.2中、重度帕金森病患者與輕度帕金森病患者血清Aβ1-42、UA及血清炎癥因子水平比較

與輕度帕金森病患者相比，中、重度帕金森病患者血清中IL-6 及TNF-α水平明顯升高，差異有統計學意義(P<0.05)，但血清Aβ1-42及UA水平差異均無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表1 中、重度組與輕度組患者血清Aβ1-42、UA及IL-1β 、IL-6 及TNF-α水平比較

2.3帕金森病患者血清Aβ1-42、UA、IL-1β、IL-6及TNF-α水平與帕金森病綜合評分量表(UPDRS)評分相關性分析

各項指標與UPDRS評分相關性分析結果顯示：UA的水平與UPDRS評分之間呈負相關(r=-0.674，P=0.021)，IL-6與UPDRS評分之間呈正相關(r=0.402，P=0.027)，其余指標與UPDRS評分之間無顯著相關性。

表2PD患者血清Aβ1-42、UA、IL-1β、IL-6及TNF-α水平與UPDRS、評分相關性分析

指標相關系數P值UPDRS評分與Aβ1?42相關性-0．2310．152UPDRS評分與UA相關性-0．6740．021UPDRS評分與IL?1β相關性0．2340．364UPDRS評分與IL?6相關性0．4020．027UPDRS評分與TNF?α相關性0．1190．761

3 討論

認知功能障礙是PD臨床上表現出的非運動癥狀之一。PD的病理生理機制復雜，一般認為是多巴胺能(DA)神經元變性丟失，紋狀體DA耗竭，位于基底核和額葉間的皮質-皮質下DA環路明顯受損[4，5]。病理改變主要表現為小膠質細胞激活所致的一系列神經免疫炎癥和氧化應激反應[6]。腦內和外周血中的Aβ通過血腦屏障上Aβ內向和外向轉運，使Aβ的生成和降解維持動態平衡。在此過程中低密度脂蛋白受體相關蛋白I和高級糖基化終產物受體(RAGE)起著關鍵作用。人類淀粉樣前體蛋白(APP)在γ-分泌酶的作用下可被分解生成為Aβ1-40和Aβ1-42兩種形式。APP編碼基因突變或其他原因均可導致γ-分泌酶活性增加。細胞Aβ1-42含量少但更易聚集，且神經毒性更強。齊佩瑾等[7]發現約有50%的PD患者血清中出現Aβ堆積現象，與老年斑的形成有密切關系，同時存在tau蛋白的神經纏結等病理改變[8]。體外細胞培養顯示[9]一定濃度的Aβ1-42可誘導一氧化氮(NO)的釋放，是炎癥級聯反應和氧化應激的誘導因素，最終損傷蛋白質及膜性結構，導致神經節壞死或凋亡。

本研究結果顯示，PD組血清Aβ1-42水平明顯低于對照組，差異有統計學意義，充分說明Aβ1-42參與PD認知功能障礙的發生發展過程，且其水平的降低提示PD神經炎癥級聯反應和氧化應激反應的可能性。本研究發現PD組患者血清中Aβ1-42水平下降，主要原因可能與血腦屏障滲透性增加，緊密連接蛋白損傷，上調RAGE，使得血腦屏障上的Aβ1-42向內轉運大大多于向外轉運，血清中Aβ1-42水平降低有關[10]。氧化應激和線粒體功能障礙是PD認知功能障礙的主要原因。UA作為天然抗氧化劑和自由基清除因子，對PD線粒體損傷和氧化應激具有保護作用。病理狀態下，UA缺乏，剩余大量自由基和金屬離子損害生物膜，破壞線粒體，造成神經元代謝障礙，最終損傷認知功能。本研究結果顯示，PD患者血清中UA水平降低，且與UPDRS評分呈負相關，證實UA對PD有保護作用。

近年來大量研究報道[11，12]PD患者血清、腦脊液、腦內紋狀體內炎癥因子水平升高，主要以包括TNF-α、IL-6在內的致炎性細胞因子水平升高為主，與以上兩種致炎性細胞因子廣泛分布于外周循環中且容易檢測到有關。TNF-α、IL-6可通過誘導和促進炎癥和細胞毒性等反應，激活多種細胞凋亡途徑，加快細胞損傷和凋亡。本研究結果顯示，PD患者血清中TNF-α、IL-6水平不僅升高，且中、晚期帕金森患者與早期帕金森患者相比，IL-6 及TNF-α水平明顯高于早期患者。

相關研究也報道[13]腦損傷程度與PD病情相關。但細胞因子水平與病情無關。劉夫軍等[14]發現腦內細胞因子的含量與該部位活化的膠質細胞的密度成正比，且活化的小膠質細胞與變性的DA相毗鄰。說明小膠質細胞活化并與細胞因子協同作用是導致線粒體功能障礙和神經元變性的主要原因。本研究結果顯示，IL-6 、TNF-α水平與UPDRS評分之間呈正相關(r=4．811，P<0．05)，說明TNF-α、IL-6是PD的損傷因素。

[1]Jones A J,Kuijer R G,Livingston L,et al.Caregiver burden is increased in Parkinson’s disease with mild cognitive impairment (PD-MCI)[J].Translational Neurodegeneration,2017,6(1):17.

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[3]羅 琴,夏 歡,楊新玲,等.中國漢族帕金森病患者外周血淋巴細胞基因表達譜的研究[J].中華實驗外科雜志,2015,32(7):1720.

[4]劉渤娜，尤振宇，劉學飛.腹腔熱灌注聯合靜脈化療治療進展期胃腸道惡性腫瘤并腹水臨床研究[J].現代儀器與醫療,2015,21(3):35.

[5]張 佳,康文巖,劉 軍.帕金森病患者唾液α-突觸核蛋白與紋狀體多巴胺攝取功能的相關性研究[J].臨床內科雜志,2017,34(1):45.

[6]莊文欣,劉宗昱,王雪凈,等.血管活性腸肽對帕金森病大鼠黑質膠質細胞活化及相關炎性因子釋放的影響[J].解剖學報,2016,47(2):178.

[7]齊佩瑾.與阿爾茨海默癥相關的γ-分泌酶復合物的表達與純化研究[D].上海交通大學,2015,47(2):178.

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[9]羅振釗,劉 璐,馬 健,等.Annexin-A1模擬肽Ac2-26抑制小膠質細胞釋放炎性介質的作用研究[J].中華老年醫學雜志,2016,35(12):1320.

[10]梁若冰,雷 晶,張小寧.帕金森病患者合并認知功能障礙與血清Aβ1-42、胱抑素C、尿酸水平的關系[J].神經損傷與功能重建,2016,11(2):131.

[11]魏 濤,張 麗.血清炎癥因子與帕金森病精神癥狀的相關性[J].徐州醫學院學報,2015,10(11):773.

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[13]沈 萍.顱腦損傷急性期C-反應蛋白與腦損傷程度、病情發展和預后的關系[J].中國繼續醫學教育,2015,11(27):48.

[14]劉夫軍,袁向山,劉 靜,等.小膠質細胞在VPA孤獨癥模型大鼠腦增齡過程中的變化[J].神經解剖學雜志,2015,31(3):275.