福建規(guī)模化豬場O/A型豬口蹄疫病毒免疫抗體的檢測與分析

黃思瓊 ，肖志豪 ，上官林梅 ，林日丹 ,，戴愛玲 ,★

（1.福建省生豬疫病防控工程技術(shù)研究中心 364012；2.龍巖學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 364012）

豬口蹄疫是一種急性、熱性和高度接觸性的傳染病，發(fā)病率很高，流行面大，傳播速度快，對仔豬可引起大批死亡。近年來豬口蹄疫病的頻發(fā)給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴重的經(jīng)濟損失，我國實行強制免疫的防控手段，免疫效果的好壞直接影響豬口蹄疫的防控效果，因此對口蹄疫免疫效果的監(jiān)測，是口蹄疫有效防控和風(fēng)險預(yù)警的重要手段。本研究采用ELISA方法，對2014年～2017年福建省規(guī)模化豬場5493份血清樣品進行FMDV-O/A型免疫抗體的檢測與分析，了解該地區(qū)豬群口蹄疫的免疫狀況，評估免疫效果，為規(guī)模化豬場豬口蹄疫疫病的有效防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 血清來源

血清樣品采集于2014年～2017年福建省部分規(guī)模化豬場，共計采集血清5493份，其中母豬2249份、后備豬1408份、公豬255 份、保育豬（40～80 日齡）653 份、育肥豬（80 日齡以后）841份。送檢豬場均有免疫含O型/A型口蹄疫病毒的滅活疫苗。

1.2 豬口蹄病毒疫抗體檢測試劑盒

O型/A型豬口蹄疫病毒抗體檢測試劑盒（韓國金諾），購自于北京金諾百特科技有限公司。

1.3 主要器材

Thermo多功能酶標(biāo)儀、Thermo洗板機、多通道移液槍（20～200μL）等。

1.4 方法

判定標(biāo)準(zhǔn)：

S/N值=血清樣品值/陰性對照平均值

S/N值≤0.60判為陽性；S/N值＞0.60判為陰性。

在免疫狀態(tài)下，抗體陽性率＞95%，S/N平均值≤0.2，表示整體免疫效果好；抗體陽性率80%～90%，表示整體免疫效果一般；抗體陽性率＜70%，表示免疫效果差，應(yīng)立即補免疫苗。

2 結(jié)果

2.1 O型口蹄疫病毒抗體檢測結(jié)果

2014年～2017年福建省部分規(guī)模化豬場血清樣品5493份，采用ELISA法檢測O型豬口蹄疫病毒的免疫抗體水平。從表1可知，群體抗體陽性率為81.7%，其中母、公豬的抗體陽性率較高，分別為93.6%、92.9%，后備豬的陽性率為87.6%，保育豬、育肥豬的陽性率較低，為48.1%和66.1%。整體上母、公豬抗體陽性率高于保育、育肥豬。

表1 2014年～2017年規(guī)模化豬場O型口蹄疫病毒抗體檢測結(jié)果

不同季度O型豬口蹄疫抗體統(tǒng)計結(jié)果見表2，從表2可知，在一年四個季度中，母豬的抗體陽性率均在90%以上，公豬的陽性率在86%以上，保育豬和育肥豬冬春季節(jié)的陽性率高于夏和秋，后備豬在秋冬的陽性率90.4%、83.3%高于春夏的陽性率78.2%、69.3%。

表2 不同季度O型豬口蹄病毒疫抗體陽性率（%）

2.2 A型口蹄疫病毒抗體檢測結(jié)果

從表3可知，2014年～2017年22個免疫豬場966份血清樣品A型口蹄疫病毒抗體總陽性率62.4%，其中母、公豬的抗體陽性率77.5%，商品豬抗體陽性率44.3%，2014年～2017年A型口蹄疫病毒抗體陽性率逐年上升，特別是2017年母豬和商品豬抗體陽性率高于其他年度。

表3 2014年～2017規(guī)模化豬場A型口蹄疫病毒抗體檢測結(jié)果

3 結(jié)果與分析

3.1 O型口蹄疫病毒抗體結(jié)果分析

2014年～2017年檢測福建省部分規(guī)模化豬場119個5493份血清O型口蹄疫病毒抗體，結(jié)果表明規(guī)模場群體抗體陽性率81.7%，其中母、公豬的O型口蹄疫病毒抗體陽性率較高，分別為93.6%、92.9%，后備豬的陽性率為87.6%，保育豬、育肥豬的陽性率較低，為48.1%和66.1%，抗體陽性率母豬＞公豬＞后備豬＞育肥豬＞保育豬，其中母豬、公豬、后備豬抗體陽性率高于國家強制免疫標(biāo)準(zhǔn)陽性率70%以上，保育、育肥豬未達到國家強制免疫標(biāo)準(zhǔn)，有一定感染風(fēng)險。母豬、公豬一年四季處于較高的抗體水平，保育、育肥豬冬春季節(jié)抗體陽性率略高于夏秋兩季，育肥豬冬季抗體陽性率75.7%，達到國家強制免疫標(biāo)準(zhǔn)陽性率70%以上，與口蹄疫在冬春季節(jié)流行，養(yǎng)殖場在秋末及冬季比較重視口蹄疫疫苗免疫有一定關(guān)系。近年全國各個地區(qū)采用ELISA法監(jiān)測規(guī)模化豬場O型口蹄疫病毒抗體，如，2017年，孫哲等[1]對四川、湖南、河南等送檢豬群樣品檢測O型口蹄疫病毒抗體，總陽性率82.2%，種豬86.3%，免疫前商品豬66.1%，免疫后商品豬84.4%；2016年，遼寧北票市抗體陽性率78.9%[2]，安徽望江縣規(guī)模場抗體陽性率88.15%[3]；2015年，黃飛[4]等人檢測廣東省的6家規(guī)模豬場，經(jīng)產(chǎn)母豬、公豬、后備母豬、育肥豬、保育豬的抗體陽性率分別為93.9%、100%、90.9%、86.3%、74.28%，河南省的規(guī)模豬場O型口蹄疫免疫抗體合格率85.53%[5]；2014年，鄂西北地區(qū)部分豬場抗體陽性率為77.5%[6]，無錫市商品豬的O型口蹄疫免疫抗體陽性率在70%以上[7]，天津地區(qū)O型口蹄疫免疫抗體陽性84.97%[8]。雖然近年全國各個地區(qū)檢測結(jié)果基本大于國家強制免疫標(biāo)準(zhǔn)，但各地區(qū)抗體陽性率有一定差異，不同豬群的抗體消長趨勢基本相似，母、公豬抗體陽性率較高，保育豬、育肥豬的抗體陽性率普遍偏低，這些地區(qū)報道與我們的檢測結(jié)果一致，抗體變化規(guī)律與滅活疫苗的免疫特點有關(guān)，滅活疫苗必須經(jīng)過多次免疫才能產(chǎn)生較高的抗體水平。

3.2 A型口蹄疫病毒抗體結(jié)果分析

2014年～2017年福建省部分規(guī)模化豬場966份血清A型口蹄疫病毒抗體檢測結(jié)果表明，2017年母、公豬和商品肉豬的抗體陽性率高于2014年和2015年，特別是商品豬2016年和2017年明顯高于2014年和2015年，這與規(guī)模養(yǎng)殖場更重視免疫含A型口蹄疫病毒的滅活疫苗有一定關(guān)系。2017年以前，國家農(nóng)業(yè)部尚未批準(zhǔn)生產(chǎn)A型口蹄疫疫苗，也未規(guī)定牛羊的口蹄疫疫苗可以用于豬群免疫，但2013年報道豬群出現(xiàn)A型口蹄疫疫情后，A型口蹄疫通報案例逐漸增多，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所國家口蹄疫參考實驗室研究員鄭海學(xué)從我國口蹄疫臨床樣品統(tǒng)計分析，也認為口蹄疫病毒具有逐漸從牛羊傳到豬體上的趨勢。因此，越來越多養(yǎng)殖場用含A型的牛羊口蹄疫價苗免疫豬群，2016年和2017年的A型口蹄疫血清學(xué)調(diào)查證實了這種普遍性，結(jié)果也表明了使用含A型牛羊三價口蹄疫疫苗的免疫效果一般。2015年，陳曦等[9]報道了安徽省12個生豬監(jiān)測點種豬、商品豬A型口蹄疫分別為61.9%、19.8%，部分使用了含A型三價口蹄疫滅活疫苗的豬場抗體陽性率為53.08%，未免疫豬場抗體陽性率18.08%，也證實使用含A牛羊三價口蹄疫疫苗的免疫效果不明顯。2010年～2017年國家農(nóng)業(yè)部通報4例豬口蹄疫A疫情。因此，防控現(xiàn)狀和疫情偶發(fā)應(yīng)該引起養(yǎng)殖場和防疫部門的重視。

總之，選擇質(zhì)量較好的口蹄疫疫滅活疫苗、定期免疫監(jiān)測、制定合理的免疫程序，加強疫苗管理與免疫方法的指導(dǎo)、控制好免疫抑制病，對豬口蹄疫的有效防控具有重要的意義。