維拉帕米對增生性瘢痕成纖維細胞的增殖及膠原合成的影響

薛金偉 何艷霞 劉亞純 李英英 卞琳 焦建寶 張珂

【摘要】目的：此次實驗主要是研究維拉帕米對抑制增生性瘢痕成纖維細胞（HSFB）和膠原的合成有何影響。方法：對來自我院的7 5例增生性瘢痕患者隨機分組，對照組給予常規激素干預，觀察組給予維拉帕米干預。然后選取組織塊法體外培養HSFB：使用MTT比色法檢測維拉帕米對HSFB生長增殖有何影響，使用羥脯氨酸比色法檢測維拉帕米對細胞膠原的影響，比較對照組和觀察組患者的治療效果。結果：維拉帕米組（觀察組）治療后的總有效率為92. 11%，常規激素組（對照組）治療后的總有效率為72. 97%，維拉帕米觀察組總有效率高于常規激素對照組總有效率（P<0.05）;維拉帕米組生長增殖情況為（0.25±0.06） mg/dl，膠原合成為（0.13±0.04） mg/dl，低于常規激素組的（0.43±0.11） mg/dl，和（0. 28±0.07） mg/dl，表明差異具有統計學意義（P<0.05）。結論：維拉帕米治療瘢痕增生效果顯著，可以通過減少I、m型前膠原的基因表達等途徑抑制瘢痕增生。

【關鍵詞】維拉帕米;瘢痕;纖維細胞;膠原;增殖

瘢痕是人類傷口自然愈合的結局，但瘢痕過度增生易導致機體功能障礙影響身體健康[l]。在臨床實踐中，我們發現很多患者手術后身體都會留有或大或小的增生性瘢痕，甚至有的患者常常伴有奇癢，難以忍受，嚴重影響患者日常生活。所以，找到一種有效治療增生性瘢痕的方法越來越受到患者和醫務人員的重視。鈣通道阻滯劑是一種廣泛應用于臨床的心血管疾病藥物[2]。近年來，大家逐漸認識到，鈣通道阻滯劑通過影響細胞內外Ca2+濃度變化，進而治療纖維化疾病，如肺纖維化、增生性瘢痕等，但它的具體作用機制學者們還不太了解[3]。正因為如此，這次試驗恰是研究了維拉帕米對HSFB的增殖和膠原合成的作用機制，為此后臨床上治療增生性瘢痕提供實驗依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2016年5月-2017年12月75例在我院進行增生性瘢痕組織切除術患者的增生性瘢痕組織。75例患者中40例男性，女性35例女性，年齡在19-56歲之間，平均年齡39.3±2.4歲，平均病程13.5±1.6月。納入標準：患者年齡>18周歲;發病至住院期間未接受增生性瘢痕治療。排除標準：對激素和維帕拉米過敏的患者。

1.2 方法

75例患者隨機分組，觀察組38例，對照組37例。對照組在瘢痕內注射4-6ml激素得寶松，觀察組在瘢痕組織內注射維拉帕米4-6ml。注射量以瘢痕表面變白為止，注射在瘢痕內部，面積較大可分點注射。每周1次，4周為一療程，進行2療程，休息4周，然后分析成纖維細胞的增殖及膠原合成的效果。

1.3 觀察指標

選擇組織塊法體外培養HSFB;采用MTT比色法觀察維拉帕米對HSFB生長增殖的影響，采用羥脯氨酸比色法觀察維拉帕米對細胞膠原的影響。顯效：70%以上的瘢痕軟化，瘙癢等癥狀消失，一年隨訪后無復發;有效：30%以上瘢痕變軟變平，痛癢感好轉，隨訪一年無復發。無效：瘢痕變軟變平面積<30%，癥狀無變化。總有效率一（顯效+有效）/總人數Xl00%。

1.4 統計學分析

采用SPSS19.0統計軟件。HSFB生長增殖情況采用t檢驗，瘢痕治療效果比較用X2檢驗，P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 增生性瘢痕治療效果比較

觀察組（維拉帕米組）治療總有效率為92.11%，對照組（常規激素組）為72.97%，觀察組總有效率高于對照組（P<0.05），差異有統計學意義。見表l。

2.2 兩組HSFB生長增殖情況及膠原含量比較

觀察組（維拉帕米組）中增生性瘢痕成纖維細胞（HSFB）生長增殖情況及膠原含量均低于對照組（常規激素組），差異具有統計學意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

患者行外科手術后身體留有瘢痕。瘢痕是人類身體自然愈合的特征，但是受各種因素的影響，在傷口愈合過程中易出現瘢痕過度增生，影響患者的身體健康。臨床常表現為增生性瘢痕和瘢痕疙瘩[4-5]。增生性瘢痕通常出現在創傷后4周，主要特征為高于皮膚表面但僅局限在受傷范圍內。而瘢痕疙瘩通常出現在創傷3個月后，主要特征為超過原來損傷界限。創傷性瘢痕形成的主要因素就是成纖維細胞過度的增殖導致細胞外基質的膠原蛋白過度沉積[6]。所以，及時、有效的抑制成纖維細胞的合成，促進膠原的降解顯得很重要。

維拉帕米是一種Caz+拮抗劑，己被臨床工作者廣泛應用于治療心律失常、高血壓、心臟病等的治療。現代臨床研究表明，維拉帕米在影響鈣離子的流動性方面有重要的作用，可以抑制成纖維細胞的合成，促進膠原降解[7]。有研究顯示針對30例行手術治療后形成的瘢痕的患者使用維拉帕米后可以使瘢痕變軟、變平，顏色變淺，在治療過程中無不良反應[8]。但上述報道選取人數較少。這次研究選擇了我院75例增生性瘢痕的患者，給予不同的干預，結果顯示，維拉帕米組總有效率為92.11%，常規激素組為72.97%，同時觀察組的成纖維細胞生長增殖情況及膠原含量均低于對照組（P<0.05），而兩組患者無明顯不良反應。這說明，維拉帕米可以有效抑制成纖維細胞的增殖，加快膠原的降解速率，導致瘢痕形成減少。

本研究尚存在一些不足，首先選取的患者都是年滿18周歲，對于另一年齡段<18周歲的兒童安全性和療效如何尚不清楚。其次選取的人群中多為中青年患者，該類人群心血管疾病較少，老年人群對維拉帕米的耐受性如何仍需了解。因此在以后的研究中應該著重研究。

參考文獻

[1]曲春安，李敏，李東岳等，維拉帕米與曲安奈德注射治療瘢痕疙瘩的療效比較[J].中國美容整形外科雜志，2018， 29 （06）： 366-368.

[2]紀英，尼卡地平聯合維拉帕米對瘢痕組織的抑制效果研究[J].中國藥業，2014 （19）：14-15.

[3]許寧，薛學義，郭樹平等，鈣通道阻滯劑維拉帕米對轉化生長因子-βl誘導尿道瘢痕成纖維細胞a-平滑肌肌動蛋白和細胞外基質的作用[J].中華實驗外科雜志，2013， 30（09）：1924- 1926.

[4]曾銘強，陳俊杰，黃亮等，鈣通道阻滯劑對尿道瘢痕成纖維細胞的作用[J].中南大學學報（醫學版）， 2016， （12）： 1317-1322.

[5]曾銘強，陳俊杰，黃亮等，鈣通道阻滯劑對尿道瘢痕成纖維細胞的作用[J].中南大學學報（醫學版），2016，41（12）：1317-1322.

[6]薛睿智，廖錦堂，田婷等，前瞻性臨床試驗評估維拉帕米對前尿道狹窄術后尿道瘢痕增生及拔管后尿道再狹窄趨勢的抑制作用[J].中南大學學報（醫學版），2018，43（08）：843-851.

[7]Ahuja， R. B.， Chatterjee，P.. Comparative efficacyof intralesional verapamilhydrochloride and triamcinoloneacetonide in hypertrophic scarsand keloids [J]. Burns： IncludingThermal

Injury， 2014， 40 （04）： 583—588.

[8] Torshizi， A. D.， Zarandi，M.H.F.. Torshizi， G.D. etal.A hybrid fuzzy-ontologybased intelligent system todetermine level of severity andtreatment recommendation forbenign prostatic hyperplasia [J].Computer Methods and Programsin Biomedicine： An InternationalJournalDevotedtotheDevelopment， Implementation andExchange of Computing Methodologyand Software Systems inBiomedical Research and MedicalPractice，2014，113（1）： 301-313.