H5病毒核酸監(jiān)測(cè)可疑陽(yáng)性病例的流行病學(xué)調(diào)查報(bào)告

張建超，彭祿庭，任 杰，韓奇鵬

（1.瀏陽(yáng)市畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局，湖南 瀏陽(yáng) 410300；2.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)沙 410128）

2017年7月21日，瀏陽(yáng)市蕉溪?jiǎng)游锓酪邫z疫站在日常監(jiān)管中，發(fā)現(xiàn)該鄉(xiāng)某村某組某場(chǎng)飼養(yǎng)的家禽出現(xiàn)急性發(fā)病死亡的情況。接到報(bào)告后，中心立即組織開展流行病學(xué)調(diào)查，并按要求做好應(yīng)急處置。

1 調(diào)查方法

1.1 詢問(wèn)調(diào)查

對(duì)某場(chǎng)畜主于獻(xiàn)明進(jìn)行多次詢問(wèn)，詳細(xì)了解了該場(chǎng)免疫、檢疫、消毒、禽只調(diào)進(jìn)調(diào)出、飼料及飲用水來(lái)源、場(chǎng)內(nèi)人員及車輛出入等情況。詢問(wèn)為某場(chǎng)提供雞苗和飼料的經(jīng)營(yíng)戶，了解飼料來(lái)源、雞苗來(lái)源及檢疫情況、飼料及雞苗運(yùn)輸方式等情況。對(duì)周邊11戶養(yǎng)禽戶進(jìn)行走訪調(diào)查，了解飼養(yǎng)禽免疫及發(fā)病等情況。

1.2 現(xiàn)場(chǎng)觀察

對(duì)某場(chǎng)及周邊11戶養(yǎng)禽戶養(yǎng)殖的禽只進(jìn)行臨床觀察，檢查養(yǎng)殖戶防疫條件和防控措施落實(shí)情況。

1.3 實(shí)驗(yàn)室檢查

中心實(shí)驗(yàn)室采用血凝和血凝抑制試驗(yàn)對(duì)樣品開展血清學(xué)抗體檢測(cè)，采用PCR-熒光探針?lè)ǎ▽?shí)時(shí)熒光定量RT-PCR）開展病原學(xué)檢測(cè)[1-2]。同時(shí)，采集該場(chǎng)發(fā)病欄舍的雞組織樣5份，送長(zhǎng)沙市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)。

2 調(diào)查內(nèi)容

2.1 流行情況

2.1.1 養(yǎng)殖場(chǎng)基本情況

某養(yǎng)殖場(chǎng)建于2008年，該場(chǎng)有雞舍四棟，呈四合院排列，主要飼養(yǎng)土雞、蛋雞、水鴨、珍珠雞、貴妃雞等家禽，存籠家禽約32 100羽。

該場(chǎng)飼養(yǎng)的家禽均從外地購(gòu)入：第1批2 500羽，品種為綠殼蛋雞苗，2017年5月從廣東購(gòu)進(jìn)，經(jīng)汽車客運(yùn)至養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)，至6月20日，已出籠約1 500羽，現(xiàn)存籠約1 000羽；第2批3 500羽，品種為綠殼蛋雞苗，2017年5月26日從南京天一公司購(gòu)進(jìn)；第3批5 100羽，品種為黃土二雞苗，2017年6月27日從新化創(chuàng)海公司購(gòu)進(jìn)，由公司直接汽車配送到養(yǎng)殖場(chǎng)；第4批5 000羽，品種為黑雞苗，2017年7月3日從新化創(chuàng)海公司購(gòu)進(jìn)，由公司直接汽車配送到養(yǎng)殖場(chǎng)；第5批2 500羽，品種為珍珠雞苗，2017年7月7日購(gòu)進(jìn)；第6批3 000羽，品種為貴妃雞苗，2017年7月9日購(gòu)進(jìn)；第7批4 000羽，品種為土黃雞苗，2017年7月11日購(gòu)進(jìn)，第5～7批雞苗均從廣東市場(chǎng)購(gòu)進(jìn)，經(jīng)客運(yùn)至養(yǎng)雞場(chǎng)；第8批3 500羽，品種為綠殼蛋雞苗，從2017年7月13日從山東濟(jì)寧購(gòu)進(jìn)，經(jīng)火車貨運(yùn)至長(zhǎng)沙，再由家用貨車轉(zhuǎn)運(yùn)至養(yǎng)殖場(chǎng)；另有水鴨苗約4 500羽，7月4日從江西豐城購(gòu)進(jìn)。

2.1.2 發(fā)病死亡情況

該場(chǎng)只有綠殼蛋雞欄舍出現(xiàn)發(fā)病死亡情況，存籠約4 000羽，約在2017年7月17日出現(xiàn)發(fā)病病例，7月19日開始陸續(xù)出現(xiàn)死亡，截至7月22日，共死亡600余羽，至7月23日對(duì)該場(chǎng)養(yǎng)殖的所有禽只撲殺無(wú)害化處理時(shí)，除綠殼蛋雞欄舍外，其他欄舍養(yǎng)殖的28 000余羽禽只和周邊養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的家禽均未發(fā)現(xiàn)發(fā)病死亡情況。

2.1.3 免疫和檢疫情況

該養(yǎng)殖場(chǎng)于7月8日（洪澇災(zāi)害后）對(duì)綠殼蛋雞欄舍約4 500羽綠殼蛋雞（第1～2批雞苗）進(jìn)行了H5亞型二價(jià)禽流感滅活疫苗免疫注射，疫苗生產(chǎn)廠家為肇慶大華農(nóng)；生產(chǎn)批號(hào)為01718022，免疫劑量為0.3 mL·羽-1，免疫方式為翅膀內(nèi)側(cè)皮下注射。其他家禽未進(jìn)行禽流感免疫，其中第4～8批雞苗及水鴨，共計(jì)家禽約22 500羽，未達(dá)到禽流感免疫時(shí)間；第3批雞苗約5 100羽雖達(dá)到了禽流感免疫時(shí)間，但該場(chǎng)免疫程序中將禽流感免疫時(shí)間排在新城疫、球蟲病、法氏囊等病種的免疫之后，且準(zhǔn)備對(duì)該批雞開展禽流感免疫時(shí)，該場(chǎng)雞出現(xiàn)發(fā)病死亡病例，故第3批雞至撲殺時(shí)未進(jìn)行免疫。

場(chǎng)主沒(méi)能提供《動(dòng)物檢疫合格證明》。販運(yùn)戶的雞苗有動(dòng)物檢疫合格證明，但都沒(méi)有保存。

2.1.4 防控措施

為徹底撲滅該起可疑疫情，防止疫情擴(kuò)散蔓延，瀏陽(yáng)市重大動(dòng)物疫病防治指揮部辦公室組織相關(guān)單位對(duì)該起可疑疫情開展了預(yù)防性撲殺無(wú)害化處理。

及時(shí)開展采樣檢測(cè)。7月21日，工作人員到該場(chǎng)采集發(fā)病雞欄舍禽只咽-泄殖腔拭子樣10份送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，經(jīng)檢測(cè)，其中4份檢測(cè)結(jié)果為H5型AI病毒核酸可疑陽(yáng)性，H5型禽流感HA-HI抗體水平檢測(cè)，抗體合格份數(shù)為7份[3]。7月22日本中心工作人員再次采集該場(chǎng)發(fā)病雞欄舍之外的禽只咽-泄殖腔拭子樣30份、血清樣12份送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，15份混樣（同欄2份一起檢測(cè)）中有2份拭子樣為H5型AI病毒核酸可疑陽(yáng)性，12份血清樣通過(guò)H5型禽流感HA-HI抗體水平檢測(cè)，抗體合格份數(shù)為3份。同日，采集該場(chǎng)發(fā)病雞欄舍的雞組織樣5份，送長(zhǎng)沙市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，經(jīng)檢測(cè)，5份樣品中有3份為H5型AI病毒核酸可疑陽(yáng)性。

進(jìn)行預(yù)防性撲殺和無(wú)害化處理。瀏陽(yáng)市重大動(dòng)物疫病防治指揮部辦公室組織相關(guān)單位成立了現(xiàn)場(chǎng)處置工作小組，對(duì)監(jiān)測(cè)陽(yáng)性存籠的32 100羽家禽進(jìn)行預(yù)防性撲殺和無(wú)害化處理，對(duì)墊料、被污染的飼料實(shí)施無(wú)害化理；督促該場(chǎng)按消毒技術(shù)規(guī)程，對(duì)欄舍、場(chǎng)地、被污染的用具、車輛、相關(guān)設(shè)施及內(nèi)外環(huán)境進(jìn)行嚴(yán)格徹底消毒[4]。

開展補(bǔ)免接種。組織蕉溪?jiǎng)游锓酪邫z疫站工作人員對(duì)該場(chǎng)周邊11戶養(yǎng)禽戶存籠家禽192羽進(jìn)行禽流感緊急免疫接種工作；對(duì)常豐村周邊的46戶散養(yǎng)戶存籠的784羽家禽、3戶規(guī)模戶存籠的10 600羽家禽進(jìn)行了禽流感緊急免疫接種工作。同時(shí)發(fā)放了消毒物資，督促養(yǎng)禽場(chǎng)（戶）嚴(yán)格落實(shí)消毒制度，開展消毒、補(bǔ)免、加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合防控措施。

加強(qiáng)對(duì)發(fā)病場(chǎng)的監(jiān)管。按要求對(duì)發(fā)病養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行監(jiān)控，切實(shí)保證2個(gè)月內(nèi)不運(yùn)出雞糞、養(yǎng)禽用具等場(chǎng)內(nèi)物品與設(shè)施，任何人（消毒人員除外）不得出入該場(chǎng)；對(duì)場(chǎng)內(nèi)糞污、飼料、工具等進(jìn)行全面消毒處理，同時(shí)每周組織人員對(duì)該場(chǎng)進(jìn)行消毒滅原工作，并做好消毒記錄。

加大疫病監(jiān)測(cè)力度。組織、指導(dǎo)瀏陽(yáng)市規(guī)模養(yǎng)禽戶開展禽流感免疫、消毒滅原等工作，提高養(yǎng)殖場(chǎng)動(dòng)物疫病防控能力。加大監(jiān)測(cè)頻率，擴(kuò)大監(jiān)測(cè)范圍，重點(diǎn)加強(qiáng)對(duì)禽類交易市場(chǎng)、規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的監(jiān)測(cè)力度，全面掌握瀏陽(yáng)市禽類發(fā)病情況，及時(shí)處置可疑情況。

2.2 疫情來(lái)源分析

2.2.1 疫情來(lái)源

該場(chǎng)動(dòng)物防疫達(dá)不到要求，家禽存欄密度大，防控措施不到位，且沒(méi)有辦理《動(dòng)物防疫條件合格證》。

該場(chǎng)所用飼料由長(zhǎng)沙正大有限公司提供，由貨運(yùn)車運(yùn)到雞場(chǎng)倉(cāng)庫(kù)內(nèi)，經(jīng)人工搬運(yùn)至雞舍內(nèi)飼喂；養(yǎng)殖場(chǎng)飲水來(lái)自深水井，無(wú)污染水源；該場(chǎng)銷售模式為不定期散賣，故經(jīng)常有客戶進(jìn)入該場(chǎng)購(gòu)買家禽，人員流動(dòng)頻繁。

該場(chǎng)發(fā)病的雞為最先購(gòu)買進(jìn)場(chǎng)的雞，而且免疫了疫苗，而后面購(gòu)進(jìn)的禽均沒(méi)有發(fā)病，因此，由調(diào)入禽苗及運(yùn)輸疫苗的車輛、飼料及運(yùn)輸飼料的車輛帶病入場(chǎng)的情況基本可以排除。

該場(chǎng)防疫設(shè)施簡(jiǎn)陋，沒(méi)有防鳥設(shè)施，鳥類可進(jìn)入該場(chǎng)，加之養(yǎng)殖場(chǎng)防控措施不到位，由鳥類將疫病傳入發(fā)病的可能性較大。此外，因該場(chǎng)銷售模式為不定期散賣，經(jīng)常有客戶進(jìn)入該場(chǎng)購(gòu)買家禽，人員流動(dòng)較大，由販運(yùn)戶及販運(yùn)車輛帶病入場(chǎng)的可能性較大。

2.2.2 疫情分布及現(xiàn)狀

該場(chǎng)周邊養(yǎng)禽戶均沒(méi)有發(fā)現(xiàn)死亡病例，疫情僅發(fā)生在港湘養(yǎng)殖場(chǎng)。從2017年7月23日開始對(duì)該場(chǎng)存籠禽只全部進(jìn)行撲殺無(wú)害化處理，蕉溪鄉(xiāng)和瀏陽(yáng)市其他鄉(xiāng)鎮(zhèn)均沒(méi)有發(fā)生禽類發(fā)病死亡報(bào)告病例。因此，疫情沒(méi)有擴(kuò)散、蔓延，疫情得到有效控制。

2.3 傳播途徑和方式

病毒可能是通過(guò)野鳥及其分泌物和排泄物污染的飼料及用具、水或是販運(yùn)戶及車輛帶入欄舍內(nèi)，經(jīng)呼吸道、消化道感染，也可能是通過(guò)氣源性媒介傳播。

2.4 流行病學(xué)分析

該場(chǎng)發(fā)病雞欄舍約于2017年7月17日出現(xiàn)發(fā)病病例，7月19日開始陸續(xù)出現(xiàn)雞只死亡，死亡約40余羽，7月20日死亡80余羽，7月21日死亡近200羽，疫情發(fā)展迅速，死亡數(shù)成倍增加。截至7月22日，發(fā)病欄舍存籠的約4 000羽綠殼蛋雞共死亡600余羽，死亡率15%。至7月23日對(duì)該場(chǎng)養(yǎng)殖的所有禽只撲殺無(wú)害化處理時(shí)，除綠殼蛋雞欄舍外，其他欄舍養(yǎng)殖的28 000余羽禽只均未發(fā)現(xiàn)發(fā)病死亡情況，因此，疫情沒(méi)有擴(kuò)散、蔓延。

根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查和現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)數(shù)據(jù)匯總分析可知：該場(chǎng)位于人口居住密集區(qū)域、靠近106國(guó)道和長(zhǎng)洪高速蕉溪段、家禽養(yǎng)殖量大且養(yǎng)殖密度高、養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)出家禽頻繁且無(wú)固定來(lái)源與去處。養(yǎng)禽場(chǎng)選址不當(dāng)、雞苗來(lái)源把控不嚴(yán)。養(yǎng)殖場(chǎng)主疫病防控意識(shí)淡薄、防控措施不到位是導(dǎo)致發(fā)生此起疫情的重要原因之一。同時(shí)，該場(chǎng)存在禽流感疫苗免疫不及時(shí)、免疫不到位的情況。檢測(cè)結(jié)果顯示，該場(chǎng)樣品H5型禽流感抗體水平整體合格率僅有25%，此外，免疫密度不高、抗體水平過(guò)低，保護(hù)率不高也是導(dǎo)致此次疫情發(fā)生的原因之一。

3 處理措施

3.1 立案查處

對(duì)港湘養(yǎng)殖場(chǎng)未辦理《動(dòng)物防疫條件合格證》和未經(jīng)檢疫的違法行為分別進(jìn)行立案查處。

3.2 開展專項(xiàng)整治行動(dòng)

組織對(duì)蕉溪、洞陽(yáng)、永安、北盛、淳口、沙市、龍伏、社港等7個(gè)北區(qū)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的禽類規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)、販運(yùn)經(jīng)營(yíng)戶、禽類經(jīng)營(yíng)場(chǎng)所開展專項(xiàng)整治，重點(diǎn)查處不履行家禽免疫義務(wù)的養(yǎng)殖場(chǎng)和養(yǎng)殖場(chǎng)、孵化場(chǎng)、販運(yùn)戶未經(jīng)檢疫的動(dòng)物并嚴(yán)厲打擊經(jīng)營(yíng)染疫或者疑似染疫動(dòng)物、隨意丟棄家禽動(dòng)物尸體等違法行為。通過(guò)專項(xiàng)整治行動(dòng)，進(jìn)一步增加禽類養(yǎng)殖、經(jīng)營(yíng)單位的防疫意識(shí)。

4 小 結(jié)

本文就家禽養(yǎng)殖場(chǎng)家禽出現(xiàn)急性發(fā)病死亡情況進(jìn)行調(diào)查，并對(duì)其調(diào)查方法、流行情況和處理措施等方面進(jìn)行概述，從而為今后養(yǎng)殖場(chǎng)的疾病處理提供參考。