姬萬民
(瑞普(天津)生物科技股份有限公司 300308)
2018年2月,河北省正定縣某規模化雞場地面平養方式飼養的8500只肉雞30日齡出現死亡情況,患病肉雞開始表現為零星死亡,隨后死亡增加,日死亡率達2%,病雞表現精神沉郁,食欲不振,雞冠蒼白,排黃綠色或暗黑色稀便為主要癥狀。采用雙黃連口服液和環丙沙星、泰樂菌素和復方新諾明等藥物進行治療,治療效果不佳。該畜主將患雞帶到本處就診,病料無菌采集后送公司診斷實驗室進行檢測。根據該雞群的發病情況、臨床癥狀、病理解剖變化并結合PCR分子生物學診斷,診斷確定為FAdV-Ⅰ與壞死性腸炎混合感染,現報告如下:
雞群突然發生疾病,臨床表現為精神沉郁,縮頭,采食飼料減少,喝水量增多,羽毛雜亂無光澤,雞冠及肉錘呈現發白情況,臥地,不愿走動,排黃綠色或暗黑色,灰色糞便,一些糞便混合血液或未消化的飼料。病程較長會產生神經癥狀,顫抖,站立不穩,癱瘓,觸診檢查時表現出尖叫現象。
患病蛋雞心包積液嚴重,心包中可見到大量的淡黃色的清亮液體,肝臟腫大,出血,質地脆弱易破裂,表面凹凸不平,壞死灶和出血交替出現,呈現黃黑相間(見圖1左)。腎臟腫大、蒼白,有尿酸鹽沉積(見圖1右),小腸擴張,大小不均增大至正常的2~3倍。腸腔切開,腸表面變黃,腸腔內充滿氣體和血液,腸黏膜充血壞死,黏膜附著黃色或綠色假膜。部分腸黏膜增生,腸壁增厚充血,漿液表面有大量針尖大小出血點和灰白色小米粒大小壞死點,腸道中充滿了黑色和紅色的內容。

圖1 病雞的眼觀病變
無菌采集病死雞的肝臟和心包積液,分別進行組織總DNA和總RNA的提取。以其為模板,分別進行FAdV-Ⅰ的常規PCR和RT-PCR擴增,本次試驗病料樣品與心包積液PCR擴增產物與預期擴增產物片段大小相符,試驗擴增產物的條帶處于508bp,基因測序結果與GenBank中的序列比對,通過DNAStar軟件進行同源性分析,結果顯示,分離株與I群禽腺病毒序列同源性為96.5%,表明被檢病料樣品中含有I群禽腺病毒。
細菌藥物敏感性試驗采用常規試紙法進行。結果表明,該菌對新霉素和氟苯尼考具有高度敏感性,對桿菌肽藥物中度敏感,對羅紅霉素、氧氟沙星和復方新諾明表現出耐藥性。

圖3 PCR擴增結果
M:DL1 000 DNA Marker;1:組織樣品;2:心包積液;3:陽性對照;4:陰性對照
發病雞立即隔離,按照無害化的要求對病死雞迅速處理、焚燒及深埋,環境使用生石灰消毒。
緊急注射Ⅰ群禽腺病毒卵黃抗體,同時根據抗生素敏感性試驗結果,對發病雞全群上午使用氟苯尼考(立本康)飲水(劑量為每1L水中加75mg),并在飼料中添加電解多維和維生素K3,連用 3~5d。
做好雞舍及周邊環境的生物安全,及時清理屋內的家禽糞水,對養殖設備(如水箱、食槽等)進行清洗消毒,同時做好雞群的消毒。
經采取上述措施后,至第3d病雞精神轉好,采食量增加,死亡明顯減少,至第5d死亡基本停止,1周后痊愈。
I群禽腺病毒主要引起雞包涵體肝炎、心包積水綜合征的特異性病原體,其主要病變特征為心包中有淡黃色水樣或膠脈樣的積液,心臟松弛、柔軟。肝臟呈現淡褐色和黃色,質地變脆,出現充血、腫脹,伴有局灶性壞死點和出血點。根據雞群的臨床癥狀及分子生物學診斷結果,確診該雞群為FAdV-Ⅰ與壞死性腸炎混合感染。
I群禽腺病毒一種條件致病性病毒,廣泛存在于家禽的呼吸道和消化道,其發病往往伴隨著其他不良因素,如通風不良、飼料霉菌毒素超標;或者其他疾病如IBD、CIAV、H9N2、NDV的發生。因此,在飼養過程中要注重家禽飼養管理,提高機體免疫功能,同時加強禽舍中的環境衛生,加強通風,合理消毒,并做好IBD、CIAV等疾病的免疫工作,減少心包積液綜合征。在治療過程中,使用卵黃抗體,并結合保肝護腎的藥物進行治療,減少家禽的死亡,降低養殖經濟損失。