抗骨增生片的制備工藝研究

劉秀梅，賀含珍，郭倩倩，葛春麗，陳 楠

（1.鄭州人民醫院 藥學部，河南 鄭州 450003；2.河南農業職業學院，河南 鄭州 450000）

抗骨增生片是七種中藥組成的成方制劑，主要包括熟地黃、骨碎補、鹿銜草、肉蓯蓉、雞血藤、淫羊藿、萊菔子，它是通過煎煮法制備而得，該制劑收載于《衛生部藥品標準》中[1]。抗骨增生片的功效包括補腎、活血、止痛等。主要用于治療肥大性脊椎炎，跟骨刺，頸椎病，增生性關節炎等，是臨床上比較常用的中成藥之一[2-5]。本文在原部頒標準的基礎上，對抗骨增生片的制備工藝進行了一系列的研究，篩選并優化了制備工藝。現將制備工藝優化的結果報道如下。

1 儀器與材料

LC-10ATVP 型高效液相色譜儀，KQ3200型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），SPD-10AVP紫外檢測器，AB265-S型分析天平（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司），7725i手動進樣器，AT330柱溫箱（日本島津），N2000色譜數據工作站（浙江大學智達信息工程有限公司），LP502型電子天平（常熟市百靈天平儀器有限公司），WFH-203型三用紫外分析儀（上海精科實業有限公司）。

乙腈（色譜純）（美國Fisher公司生產），重蒸餾水（自制），淫羊藿苷對照品（由中國藥品生物制品檢定所提供，批號：110737-200312）處方藥材（均購于河南省鄭州市張仲景大藥房），其它試劑均為分析純。

2 工藝條件的篩選

2.1 藥材的來源、鑒定以及前處理

抗骨增生片處方中的七味藥材，均收載于《中國藥典》2015年版一部。根據藥典規定，挑出各藥材的雜質及非藥用部位，篩出灰塵。各藥材經檢驗合格后入藥。

2.2 藥材炮制

抗骨增生片處方中的骨碎補、萊菔子兩種藥材分別用燙法、炒法炮制，方法如下：

2.2.1 骨碎補的炮制：除去骨碎補原藥材的非藥用部分及雜質，洗凈，潤透，切片，然后干燥。將潔凈河砂用武火炒熱，河砂滑利容易翻動之后，將骨碎補凈藥材加入鍋中，不斷的翻動藥材，當藥材鼓起，呈紅棕色，并且絨毛呈焦黃色時，取出藥材，篩去砂子，放涼，去除絨毛。

2.2.2 萊菔子的炮制：將萊菔子原藥材的雜質除去，洗凈藥材，然后將藥材干燥。取凈萊菔子，將萊菔子用文火炒至微鼓起且有爆裂聲和香氣時取出，放涼。

2.3 粉碎部分的考察

取處方中1/2量的雞血藤藥材粉碎成細粉直接入藥，這樣既能保存藥物的療效，又能讓雞血藤粉成為稀釋劑，還能促進片劑崩解，同時也利于研究中將濃縮后的稠膏進行干燥。按20倍的處方量稱取雞血藤，取雞血藤藥材分3批各1.36 kg，分別置于粉碎機中粉碎。將粉碎后的雞血藤藥材過100目篩，考察雞血藤藥材的出粉率，見表1。

2.4 加水量的考察

水煎煮工藝的優化試驗：在原工藝中，熟地黃等六味藥材與剩余的雞血藤藥材加水進行煎煮入藥，只有水煎次數（煎煮兩次）和時間（第一次3小時，第二次2小時），但沒有加水量的描述，本研究以出膏率和淫羊藿苷為指標，考察煎煮工藝中加水倍數，現將考察條件及結果描述如下：

2.4.1 以出膏率為指標的考察試驗：將七種藥材按10倍量處方的比例進行稱量，即每份藥材含熟地黃2.4 kg、鹿銜草1.36 kg、雞血藤0.68 kg、骨碎補1.36 kg、淫羊藿1.36 kg、萊菔子0.86 kg、肉蓯蓉1.36 kg。將稱量的藥材分為三組，第一組加8倍量的水，煎煮3小時，第二組加6倍量的水，煎煮3小時，第三組加4倍量的水，煎煮3小時，分別過濾之后各組再加水煎煮2小時，分別濾過，將兩次濾液合并，再進行濃縮，干燥，得到干浸膏，結果見表2 。

2.4.2 以淫羊藿苷含量為指標的考察試驗：根據表2中加水量、提取時間和提取次數進行試驗并得干浸膏。以淫羊藿苷為指標，考察加水倍數。

設定加水倍數為每次按藥材量的8倍、6倍、4倍進行考察，以淫羊藿苷含量為指標，進行測定。

①色譜條件與系統實用性

測定波長的選擇在190～400 nm波長范圍用紫外分光光度法對淫羊藿苷對照品溶液進行掃描，發現在波長215 nm、270 nm處有最大吸收，查閱藥典及相關文獻多選擇270 nm為測定波長。

流動相的選擇 參考藥典中淫羊藿含量測定項下的流動相及相關文獻[6-8]，經過反復試驗，確定乙腈－0.1%磷酸溶液（27：73）為流動相；流速為1 mL﹒min-1。

試驗溫度 柱溫：30 ℃。

色譜柱的選擇 選十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；Shim-pack VP-ODS柱（4.6×250 mm，5 μm）為色譜柱。

經過測定 按淫羊藿苷峰計算，理論塔板數應不低于2000。

保留時間 取一定量的供試品、對照品及陰性樣品溶液進行測定，試驗結果表明，以270 nm波長為測定波長，選用上述的流動相時，供試品溶液和對照品溶液在相同的保留時間處有吸收峰（保留時間在21分鐘左右），與其它組分能達到基線分離R＞1.5。

②對照品溶液的制備 精密稱取適量淫羊藿苷對照品，加甲醇制成每1 ml含0.026 mg的溶液，即得對照品溶液。

③供試品溶液的制備 精密稱定表2中的一定量干膏，將干膏置于具塞錐形瓶中，精密加入25 ml稀乙醇，稱定重量。超聲處理（功率250 W，頻率25 k Hz）1小時，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得各供試品溶液。

④ 含量測定 分別精密吸取對照品溶液和各供試品溶液各10 μl，注入高效液相色譜儀測定，結果見表3。

2.5 濃縮與干燥工藝

2.5.1 濃縮與干燥：按20倍的處方比例稱取各藥材三份，每份藥材含熟地黃4.8 kg、鹿銜草2.72 kg、雞血藤1.36 kg、骨碎補2.72 kg、肉蓯蓉2.72 kg、淫羊藿2.72 kg、萊菔子1.72 kg，加6倍量的水，煎煮兩次，第一次3小時，第二次2小時，濾過，合并二次濾液，減壓濃縮至相對密度為1.22～1.24（60℃）的稠膏，干燥，制得干膏。

2.5.2 出膏率的測定：按上述試驗操作所得干膏進行粉碎，稱定重量，得到出膏率，測定結果見表4。

3 結果

表1 出粉率的考察

由表1結果可見，3批雞血藤藥材出粉率分別為97.79%、 98.53%、96.32%，出粉率較好，符合工藝要求。

表2 熟地黃等7味水煎煮出膏率

*藥材總量：9.38 kg

表3 加水倍數的不同對淫羊藿苷提取的影響

由表2結果可見，熟地黃等7味藥材提取時間分別為第一次3小時、第二次2小時，提取2次，加水量為8倍、6倍、4倍水時，得出的出膏率分別為24.43%、23.54%、20.02%。表3試驗結果可見，8倍量、6 倍量、4倍量水研究所得的淫羊藿苷的含量分別為0.254%、0.239%、0.179%。

表4 出膏率試驗

根據表4可見，三批藥材得到的干膏重分別為4.47 kg、4.24 kg、4.50 kg，出膏率分別為23.83%、22.60%、23.99%。以上研究表明8倍量和6 倍量水煎煮提取得到的淫羊藿苷含量和出膏率都比較接近，為了節省原料，選用每次加水6倍量煎煮，即可使淫羊藿藥材中淫羊藿苷的含量達到最高的目的。

4 結論

本研究在原部頒標準的制備工藝基礎上，對抗骨增生片的制備工藝進行了優化研究，優化出的制備工藝條件合理、可行。研究得出抗骨增生片的最佳制備工藝為：首先將雞血藤1/2處方量的藥材粉碎成細粉，再將剩余的雞血藤藥材與剩余的熟地黃等六味藥材加6倍量的水，總共煎煮兩次，第一次3小時，第二次2小時，將煎出的藥液濾過，將兩次的濾液合并，減壓濃縮到相對密度為1.22～1.24（60 ℃）的稠膏，再將上述雞血藤粉末加入并混合，干燥，粉碎，加入適量的輔料，將粉末及輔料混勻，進行制粒和干燥，壓制成1000片，包糖衣，即得抗骨增生片成品。