TCT聯合高危型HPV DNA檢測在不能明確意義的鱗狀上皮細胞病變的診斷價值

趙 科，徐亞紅，何振業，肖天慧，王開昕，王中海*

（廣東醫科大學附屬深圳市南山區人民醫院，1.婦產科；2.病理科，廣東 深圳 518052）

宮頸癌是女性常見的惡性腫瘤，其發病率僅次于乳腺 癌居第二位，嚴重威脅女性健康[1]。宮頸癌是由宮頸細胞惡變進展而來。宮頸液基薄層細胞學（Thinprep Cytologic Test，TCT）檢查是目前宮頸病變細胞篩查的主要方法。不能明確意義的鱗狀上皮細胞病變（ASC-US）是TCT結果中比較常見的一種異常細胞。ASCCP對于ASCUS 的處理給出了不同的處理意見，但是對于絕經期女性ASC-US 的處理意見仍尚不明確[2]。高危人乳頭瘤病毒（high risk human paplloma viruses，HR-HPV）感染是宮頸癌發病的主要病因，HR-HPV持續感染會導致宮頸細胞病變進而發展為宮頸癌。因此，早期診斷宮頸病變、清除HR-HPV感染對降低宮頸癌發病率至關重要。近年來，HR-HPV檢測也用于宮頸癌的篩查，但是由于其費用高昂，臨床上并沒有得到普及。另一方面，兩種篩查方法分別在子宮頸癌篩查應用中均會出現誤診、漏診的情況[3]。因此，本研究收集我院行TCT檢測診斷為ASC-US的患者99例為實驗組，對照組為未見腫瘤細胞（NILM）患者101例，所有患者均同時行HR-HPV DNA檢測和經陰道鏡活檢檢查，以病理活檢為金標準，探討TCT聯合HR-HPV DNA檢測的診斷價值，同時分析其在絕經患者宮頸癌篩查中的價值。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析我院在2015 年9月～2016年6月行TCT宮頸癌篩查的患者200例，所有患者均行HR-HPV DNA檢測和經陰道鏡活檢，其中診斷為ASC-US的患者99例，未見腫瘤細胞（NILM）101例。患者年齡為22～73歲，平均年齡（43.4±9.4）歲。所有患者均自愿簽署知情同意書，并經我院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 TCT檢查

應用取樣刷在患者宮頸外口與宮頸管收集脫落的細胞，將其裝入盛有保存液的瓶內。采取英碩力新柏氏膜式液基薄層細胞制片技術，經Thinprep2000系統自動處理制成薄層細胞涂片，用95%的酒精將其固定，進行巴氏染色處理后行光鏡檢查。根據TBS （2014 ）分級系統做出診斷，包括未見腫瘤細胞（NILM）、不能明確意義的鱗狀上皮細胞病變（ASC）、低級別鱗狀上皮內病變（LSIL）、高級別鱗狀上皮內病變（HSIL）和鱗狀細胞癌（SCC）。本研究中選取ASC和NILM病例，其中ASC為陽性，NILM為陰性。

1.2.2 HR HPV-DNA檢測

本實驗中行HPV檢測者取得標本后均通過PCR 技術擴增標本的DNA，再通過反向點雜交（RDB）基因分型檢測是否存在病毒基因及其分型。檢驗結果包括HPV陽性和HPV陰性。

1.2.3 聯合檢測

聯合檢測時，HR-HPV DNA 檢測與TCT 檢查均為陰性則判斷為陰性，其中任一項為陽性即可判斷為陽性。

1.2.4 病理活檢

患者進行陰道鏡下檢查，涂布3%的醋酸后觀察，對醋酸及碘不著色部位進行多點活檢，行宮頸管搔刮組織病理學檢查，在正常轉化區的3，6，9，12時點的部位行多處活檢。檢測結果包括鱗狀細胞癌（SCC）、高級別鱗狀上皮內病變（HSIL）、低級別鱗狀上皮內病變（LSIL）和子宮頸炎癥。檢測結果不低于LSIL均表示陽性。

1.3 統計學方法

采用SPSS 21.0統計學軟件對數據進行統計分析，計量資料以“±s”表示，采用t檢驗，計數資料以百分數（%）表示，采用x2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 TCT及TCT+HR-HPV聯合檢測結果及病理檢查結果分析

在篩查的200例患者中，病理檢查陽性病例100例，陰性100例。其中，病理檢查陽性的患者中，71例TCT陽性，29例TCT陰性，TCT聯合HR-HPV檢測有89例陽性，11例陰性；病理檢查陰性的患者中，28例TCT陽性，72例TCT陰性，13例TCT聯合HR-HPV檢測陽性，87例TCT聯合HRHPV篩查陰性（表1）。

2.2 TCT及TCT+HR-HPV聯合檢測方法的診斷學價值評估

TCT 檢測靈敏度為71.0%，特異度為72.0%，準確率為71.5%，陽性預測值為71.7%，陰性預測值為71.3%；TCT+HR-HPV聯合檢測靈敏度為89.0%，特異度為87.0%，準確率為88.0%，陽性預測值為87.3%，陰性預測值為88.8%；聯合檢測的靈敏度、特異度、準確率、陽性預測值和陰性預測值均高于單項檢測，差異均具有顯著（P值均＜0.05）（表2）。

2.3 TCT及TCT+HR-HPV在未絕經組與絕經組的診斷學價值評估

絕經組76人：TCT檢測陽性率為56.6%（43/76），陰性率為43.4%（33/76）；TCT+HR-HPV聯合檢測陽性率為61.8%（47/76），陰性率為38.2%（29/76）。未絕經組124人：TCT檢測陽性率為45.2%（56/124），陰性率為54.8%（68/124）；TCT+HR-HPV聯合檢測陽性率為44.4%（55/124），陰性率為55.6%（69/124）。TCT+HR-HPV聯合檢測具有更高的陽性率（P＜0.05）（表3）。

表1 TCT、TCT+HR-HPV及病理檢查結果分析

表2 TCT及TCT+HR-HPV篩查方法的診斷學價值評估

表3 TCT及TCT+HR-HPV在未絕經組與絕經組的診斷學價值評估

3 討 論

宮頸癌是女性生殖道常見的惡性腫瘤。據相關文獻報道顯示[4]，宮頸癌發病率成上升趨勢。臨床宮頸癌患者在患病前宮頸上皮細胞會發生一系列病變，需較長時間進展為宮頸癌，這期間可通過一定的檢查進行篩查并進行干預可有效降低宮頸癌的發病率與致死率[5]。目前，TCT 是目前國際上廣泛應用于宮頸癌細胞學檢查的一種技術，能顯著提升宮頸病變的檢出率。ASCUS是TCT結果中不能明確界定其臨床意義的一種異常病變細胞，其臨床上常常為重度炎癥所致，但不能排除一部分惡性腫瘤患者[6]。HR-HPV 感染是導致宮頸癌發生的主要原因。臨床研究顯示，HR-HPV感染具有長期隱性特征，多數婦女在感染9～15 個月后，可通過自身免疫系統清除病毒，但持續HR-HPV感染可導致宮頸細胞發生病變進而發展為宮頸癌[7]。因此，TCT聯合HRHPV 檢測對于宮頸癌前病變篩查具有重要意義。

在龍華泉[8]等對比分析了687例患者TCT及HR-HPV DNA檢測在宮頸癌篩查中的診斷價值，結果顯示TCT聯合HR-HPV檢測比HPV、TCT單一指標更有利于宮頸癌的早期篩查。在本研究中，我們回顧性分析了200例宮頸癌篩查患者TCT、HR-HPV DNA及TCT聯合HR-HPV DNA的診斷結果，發現TCT檢測靈敏度為71%，特異度為72%，準確率為71.5%，陽性預測值為71.7%，陰性預測值為71.3%；TCT聯合HR-HPV檢測靈敏度為89%，特異度為87%，準確率為88%，陽性預測值為87.3%，陰性預測值為88.8%；聯合檢測的靈敏度、特異度、準確率、陽性預測值和陰性預測值均顯著高于單項檢測，提示TCT聯合HR-HPV檢測應作為宮頸癌篩查的首選方法。

統計資料顯示，宮頸癌的高發年齡在45～60歲，提示絕經后女性仍有患宮頸癌的風險。絕經后婦女是一類特殊的女性群體，對于絕經后女性的宮頸癌篩查還應該引起高度重視。Smith等[9]研究發現，絕經后婦女仍存在HR-HPV持續感染的可能。本研究證實，絕經后女性HR-HPV聯合檢測具有更高的陽性率。

綜上所述，在宮頸癌篩查中，采用TCT聯合HR-HPV檢查，可顯著提高臨床宮頸病變的準確率；對于絕經后女性，TCT聯合HR-HPV檢測應作為宮頸癌、癌前病變篩查的首選方法。

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