不同生防菌對茄子青枯勞爾氏菌病害的生物防治效果田間試驗研究

李茹 李師默 熊戰之 趙崢 王宏寶

(1.淮安市農科院 223001,2.淮陰師范學院 223300)

青枯病是一種由青枯勞爾氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一種頑固性土傳病害[1]。發病植物維管束遭到破壞,莖葉萎蔫下垂直至全部枯死,是世界上分布最廣、危害最大、造成損失最嚴重的植物病害之一,廣泛分布于熱帶、亞熱帶及溫帶地區[2],在我國青枯病主要發生在長江以南地區。該病以茄科作物受害最為嚴重,另外馬鈴薯、花生、辣椒、煙草、甘薯和姜等作物都有不同程度受害[2,3][l2]。由于迄今尚未找到防治此病的有效藥物和抗病品種,而生物防治一直是解決土傳病害的重要途經,并有利于減少環境污染、生產投入和農藥的過度使用,符合農業可持續發展的要求,已經成為防治該病害的重點發展方向[4,5]。

我國從60年代初就已開始研究青枯病的生物防治。目前,青枯病拮抗菌集中在無致病力青枯病和內生菌的研究。迄今為止,篩選出的生防菌株主要有芽孢桿菌、假單胞菌、菌根真菌及鏈霉菌等少數放線菌[14,15],但絕大多數拮抗菌株的篩選均是針對茄科勞爾氏菌的某一株,因此防治范圍較小,并且存在拮抗能力退化快,定殖能力弱,效果不穩定,使用方法復雜等問題。

國內外對茄子青枯菌生物防治的研究取得不少進展,但目前茄子青枯病生物防治方法大都處于試驗階段,進入實際生產的很少。采用拮抗細菌、無致病力青枯菌菌株、鏈霉菌等方法能在一定程度上對茄子青枯病起到防治作用[2],但是在田間條件下的防治效果卻不太穩定[16]。農業生產上現主要采用化學農藥、農業防治等傳統防治方法防治茄子青枯病,但是其效果都不盡理想,且對生態環境造成嚴重污染,增加農產品有毒化學物質的殘留量;其生物防治具有無污染、不殺傷天敵、病菌不易產生抗藥性、有利于人畜安全及環境保護,符合現代有機農業發展的要求,受到人們廣泛重視[6-8]。如何篩選理想有益的生物防治菌株在田間使用,是生物防治面臨的關鍵問題,特別是生防微生物的環境和生態適應能力是決定生物防治效果的關鍵環節,加強這方面的研究將有效控制青枯病的發生和流行,保證防治效果的持續和穩定。

1 材料與方法

1.1 材料

供試菌株：HY-123、HY-113、HY-7、HY-1、HY-6、HY-601,均來自本實驗室。

茄子品種：萬利3號黑紫長茄。

1.2 方法

1.2.1 培養基 初始培養基(1L)：玉米粉10克;大豆蛋白胨5克;CaCl22H2O 1克;MnSO4H2O 1.39克;K2HPO41克,pH=7.0;放大培養基：麥芽糖 ：0.25%;玉米粉：0.5%;黃豆粉：0.5%;胰蛋白胨：0.5%;CaCl22H2O：0.05%;MnSO4H2O：0.05%;K2HPO4：0.1%pH=7.0 接種量：5%;最適發酵溫度：28℃ ;發酵時間：48小時。

1.2.2 接種及培養 發酵菌液離心5000rpm收集菌體,0.85%無菌生理鹽水懸浮,調整濃度為5.0×109CFU/ml。

1.2.3 田間試驗 田間試驗時間從2017年9月12日—11月7日,檢測的菌劑分為 A、B、C、D、E、F;A為HY-123菌株、B為HY-113菌株、C為HY-7菌株、D為HY-1菌株、E為HY-6菌株、F為HY-601菌株,清水處理為對照。定植時每株澆灌不同處理菌液250ml,6個處理與對照按隨機區組試驗,每處理重復3次;每小區面積為3.2×6.0米,田間管理措施一致。

分別于藥后于33天、39天、47天統計病情,統計時進行采摘,記錄茄子的總產量。

2 結果與分析

2.1 發病情況

從圖1可以看出,除HY-123處理未出現青枯病癥狀外,其余處理均出現不同程度的青枯病癥狀;各處理相比CK處理來看,除HY-123處理外,其余處理發病率均高于CK處理,其中HY-7處理和HY-6處理的發病率明顯高于其他處理,HY-7處理發病率為10.20%,HY-6處理發病率最高,為14.89%,說明除HY-123處理外,其余處理總現階段無明顯防治青枯病的效果。

圖1 藥后33天不同處理后茄子青枯病的發病率比較

從圖2可以看出,相比一周前的統計比較,HY-123處理出現青枯病癥狀,各處理相比CK處理,仍除HY-123處理外,其余處理發病率均高于CK處理,其中除CK、HY-113和HY-6處理發病率保持不變外,其余處理的發病率都有所增長,HY-7和HY-6處理的發病率仍明顯高于其他處理,HY-6處理發病率仍為最高,為14.89%,說明HY-123處理有一定的防治茄子青枯病,但其他處理現階段仍無明顯防治效果。

圖2 藥后39天不同處理后茄子青枯病的發病率比較

HY-123處理發病率最低,為6.17%,CK處理發病率最高,發病率高達46.88%,相比一周前的統計比較,CK處理青枯病的發病率十分迅速的增長,其余各處理相比上一周的統計比較,除HY-7處理外,其余處理發病率僅有略微增長,說明六種處理均有一定防治茄子青枯病的效果,在作物成熟后期防治效果較為明顯,且HY-123處理防治效果最好。

2.2 產量統計

從圖3可以看出,HY-123處理產量最高,為392.20g,HY-601處理的產量最低,為156.73g,各處理相比CK處理,除F6處理外,其余處理平均產量均高于CK處理,其中除HY-113和CK處理的平均產量基本相同,HY-123和HY-6處理的平均產量明顯高于其他處理。說明除HY-601處理無明顯提高產量的效果,其余處理現階段有一定提高產量的效果。

圖3 藥后33天不同處理后茄子平均產量的比較

從圖3可以看出,相比一周前的統計比較,CK處理和HY-1+HY-6+095001處理的處理增長最為顯著。各處理相比CK處理,CK處理的平均產量有明顯增加,除HY-1+HY-6+095001處理外,其余處理平均產量均低于CK處理,其中F6處理的平均產量仍為最低。說明HY-1+HY-6+095001處理有明顯增加處理的效果。

圖4 藥后39天不同處理后茄子平均產量的比較

從圖4可以看出,HY-1處理產量最高,為623.40g,HY-601處理的產量仍為最低,為273.40g,各處理相比CK處理,除HY-1處理外,其余處理平均產量均略低于CK處理,其中除HY-113和HY-601處理的平均產量明顯低于CK處理外,其余處理的平均產量與CK處理基本相同,說明除HY-113和HY-601處理無明顯提高產量的效果,其余處理現階段有一定提高產量的效果。

圖5 藥后47天不同處理后茄子平均產量的比較

從圖5可以看出,HY-1處理產量最高,為925.60g,CK處理的產量為最低,為673.60g,各處理相比CK處理,各處理平均產量均有所高于CK處理,其中相比上一周的統計數據比較,CK處理的增長量有明顯降低,說明六種處理對有提高茄子產量均有一定的效果,其中HY-1處理提高最為顯著。

3 討論

本研究表明,使用A(HY-123)處理可明顯抑制茄子青枯病的發病率,且有較高的茄子產量,D(HY-1)處理雖抑制茄子青枯病的發病率無HY-123處理的抑制性顯著,但可以較高的提高茄子的產量。另從實驗整體來看,青枯病在作物生長前期并無明顯癥狀,但在作物生長后期突然爆發,導致作物大量死亡,使作物的經濟效益大大降低,從而防治青枯病在農業生產上必不可少。

青枯病的發生與土壤環境關系密切,青枯病的發生是土壤有害生物和環境條件共同作用的結果,土壤微生物組成及非生物因素如土壤的理化特性和營養狀況等都會對病害的發生和為害程度產生影響[9,10]。因此我們在田間噴施生防菌防治植物病害時,還需要進一步研究生防菌與土壤環境中其他微生物種群的消長規律,促進有益微生物的生長,從而保證生防菌能更好地發揮生防作用,改善了土壤微生物的營養條件,提高了土壤微生物多樣性,從生態水平上抑制了茄子青枯病的發生[11,12]。加強生物防治,進而實現土壤穩定、適度的生態肥力,抑制土傳病害的發生,實現農業的可持續發展,而實現高效、簡便、經濟地防治植物青枯病的目的[13]。