陳啟才 韋茁萍 廖晉楠 黃云柳 韋旅研 陳景飛
(1.廣西河池民族農業學校,廣西河池 546300;2.宜州市廖哥山食用菌合作社 546300)
河池是全國矚目的蠶桑生產大市,種桑養蠶的農業廢棄桑枝年產達70萬噸以上。2016年宜州區廖哥山食用菌合作社檢測桑枝粉時發現含硒在0.05mg/kg左右,2017年廣西富硒農產品協會對宜州區多家合作社種植的桑枝秀珍菇進行測定,硒含量在0.178mg/kg左右,按廣西富硒協會標準,宜州產桑枝秀珍菇硒含量在0.15~2.0mg/kg范圍內,即符合富硒食用菌標準,目前已有三家合作社獲得富硒秀珍菇證書。因此,河池市可利用桑枝種植出大量的天然富硒秀珍菇,富硒桑枝秀珍菇已成為河池市亟待開發的高端食用菌產品。
秀珍菇生產時是通過人為制造溫差剌激出菇,可多潮次生產。受栽培技術、基質配方和潮次的影響,秀珍菇子實體中硒含量變化較大,而產品中硒含量又是判斷富硒食用菌重要標準。宜州區產桑枝秀珍菇硒含量僅高于富硒食用菌下限標準的0.028mg/kg左右,硒含量屬中下偏低。因此,為獲得穩定的優質富硒秀珍菇產品,有必要對桑枝秀珍菇富硒特性和配方進行研究探討,本試驗以當地普遍采用的桑枝配方比例為對照,研究各潮次桑枝秀珍菇硒含量的變化規律;探討必要時添加硒肥后,硒肥濃度對桑枝秀珍菇菌絲和產量的有何影響,并以此為依據制定出最佳的種植方案。
①供試菌種:臺秀57號,產于福建省羅源縣,高溫型出菇溫度:25~35℃。
②栽培原料:取新鮮、無霉變桑枝粉,粉碎粒徑3~5毫米,來源于河池市宜州區同德鄉,硒含量:0.05mg/kg。收購新鮮桑枝、雜木粉碎后,堆置淋水發酵20天,中途翻堆2次,待基質變暗褐色后用于菌包制作。
③硒肥:由桂林桂珠生物科技有限公司、廣西農業科學院農業資源與環境研究所、北京中農新科生物科技有限公司聯合研發生產的螯合態硒肥“聚福硒”,硒元素濃度:0.2%。
1.2.1 試驗配方 ①平板PDA培養基+硒肥配方。馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂20g,水1000mL,硒肥濃度依次設 0、1、3、5、7、10、15、20、25、30(單位:毫微克/mL,共10個水平三個重復處理。
②栽培種培養基配方:對照配方為桑枝屑47%,雜木屑38%,麩皮12%,石灰2%,輕質碳酸鈣l%,硒肥配方按用量設置1個對照和5個硒添加水平,見表1。

表1 栽培種原料配言表
1.2.2 平板菌絲生長試驗觀察 每平板置入30毫升培養基,高壓滅菌冷卻后取直徑為5mm的秀珍菇菌絲塊,置于平板培養基中部,在24~25℃恒溫箱中倒置培養。接種后第三天,觀察菌落長勢、密度和色澤,菌絲長勢用“+”表示,“+”長勢最弱,“+++”表示長勢最強。第七天測量菌落外緣直徑,計算出菌絲日平均生長量和生長抑制率研究硒對秀珍菇菌絲生長的影響。
1.2.3 栽培種配方試驗設計 試驗地點在宜州區廖哥山食用菌合作社。按表1共6個配方進行單因素試驗設計,共設置6個處理,每處理100包,3次重復共1800包,統一放2號大棚第7出菇庫中第4,5排,以保證試驗環境的一致性。
1.2.4 栽培與管理 栽培種生產時,將稱量好的原材料人工預混好,各處理添加劑溶于20kg水中,再分三次加入料中攪拌,拌勻后用黑寶牌雙沖壓裝包機制袋。為避免各處理之間交叉污染,制袋時從對照開始按濃度由低到高順序生產,生產完每一處理菌包后將裝包機清洗干凈,再開始下一處理菌包生產。試驗栽培袋采用規格為17cm×33cm×0.005cm聚乙烯塑料袋裝料,每袋裝料量為干料0.5kg,嚴格控制含水量65%。常壓高溫滅菌10小時,栽培滅菌接種后統一置大棚內避光培養菌絲。
接種兩天后觀察菌絲萌發吃料情況,待菌絲吃料走滿開口處0.5cm后,每配方隨機抽樣12袋統一畫線做標記,觀測菌絲長勢(用+表示,分三個等級)、生長速度(單位cm.d-1)。
1.2.5 秀珍菇測產及硒、重金屬含量分析 桑枝秀珍菇采用人工制冷條件下,可采菇6~7個潮次。本試驗統計前3潮菇產量和硒含量栓測,轉潮期統一設定為15天,轉潮期間每天噴水兩次。菇體成熟后葉片展開4~5cm品相最佳時采收,產量統計包括步菇蕾、商品等級菇和殘次菇,采收時連同菌腳收取后稱鮮重,對產量結果進行差異顯著性檢驗。
取前三潮產量依據GB5009,93-2017標準,檢測產品中硒及重金屬鎘、鉛含量。
試驗數據表明,PDA平板培養基中硒的濃度在1~7μg/mL范圍內和對照相比無太大影響,菌絲生長速度快,菌絲粗壯濃白,長勢旺盛。當PDA培養基中硒濃度增至10μg/mL以上時,硒對秀珍菇菌絲生長的抑制作用開始顯現,隨著硒濃度的增加,菌絲生長抑制率逐步提高,首先從菌落中部開始,菌絲顏色變淡黃、稀疏、倒伏;濃度增至25μg/mL時,菌絲先是在原培養基上及周邊萌發生長,但難以定植,菌絲生長緩慢抑制率提高;當濃度增至50μg/mL時,菌絲則難定植生長并死亡(見表2)。

表2 PDA平板培養基秀珍菇菌絲生產長記載表

表3 栽培種菌絲生長抑制率及鮮菇產量表
秀珍菇菌絲在PDA培養基上對硒濃度的表現極為敏感,但在栽培種菌包上的生長上耐受力較強,試驗表明硒濃度在c1~c5相對較大的濃度變化范圍內,對秀珍菇菌絲的生長并無影響,菌絲生長速率上差異不顯著。鮮菇產量生物統計結果表明,除c1與其他處理差異顯著(見表3),但無明顯規律可循,視為試驗誤差所致(見表4)。

表4 不同配方培養鮮菇產量
從檢驗結果看,使用硒添加劑后,桑枝秀珍菇中硒含量均比對照組明顯增加,并且隨著采收潮次的增加,菇體中硒含量不降反增,第三潮與第一潮硒含量以對照增幅最大(3倍),其他各處理增由點到面1.5~2倍左右(見表5)。

表5 各處理前三潮菇體硒含量檢測表(mg/kg)
3.1 平板PDA培養中硒對秀珍菇菌絲生長影響明顯,影響的濃度范圍極窄,當培養基中硒濃度10μg/mL時,開始影響秀珍菇菌絲生長,當濃度達30μg/mL以上時,難以萌發定植,并出現秀珍菇菌絲死亡現象。
3.2 在栽培種加硒添加劑時,對秀珍菇菌絲的影響不明顯,對比試驗表明秀珍菇產品中硒含量隨硒濃度的增加而顯著增加,但對秀珍菇菌絲的生長速度和產量無影響,統計檢驗差異不顯著。
3.3 在栽培基質含硒0.05 mg/kg條件下,可以生產天然的富硒桑枝秀珍菇,但檢測結果表明,桑枝秀珍菇中硒濃度較低,處于標準的下限值左右。
3.4 隨著秀珍菇的潮次增加,秀珍菇中硒含量反而有所增加。在栽培種中添加硒元素是獲得穩定的富硒秀珍菇有效手段,硒添加的濃度范圍應在處理c1~c2范圍內,過高過低都易產生硒含量不合格產品。
3.5 桑枝富硒秀珍菇硒工廠化生產時,添加劑的使用應嚴格準確控制用量,先用水溶解添加劑并多次少量加入拌勻,否則會因局部添加劑濃度過高極易造成秀珍菇硒含量嚴重超標。