老年急性淋巴細胞白血病大劑量甲氨蝶呤治療患者β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排及其臨床意義

梁月雄 崔翠萍 林 璐 黃鵬程 林 薇 李 冰

廣東省肇慶市第一人民醫院，廣東肇慶 526100

急性淋巴細胞白血病為臨床常見白血病，其發生于老年患者可因老年人群機體功能減退等而進一步加重治療困難，預后情況更差[1-2]。改善老年急性淋巴細胞白血病大劑量甲氨蝶呤化療預后十分重要。β2微球蛋白（β2-MG）、免疫球蛋白重鏈（IgH）重排均與白血病密切相關，而細胞周期蛋白B2（CyclinB2）則被證實與多種癌癥性疾病相關[3]。本研究檢測了老年急性淋巴細胞白血病患者外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率，分析了其與患者大劑量甲氨蝶呤治療生存預后的關系及其聯合預測大劑量甲氨蝶呤治療患者生存預后的價值，現報道如下。

表1 隨訪1年期間存活和死亡患者治療前β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排比較

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年1月～2015年12月我院收治的老年急性淋巴細胞白血病患者36例為研究對象，急性淋巴細胞白血病，均為初治患者，患者年齡均高于60歲，性別不限。患者均符合納入標準，且無患者排除，男20例，女16例，年齡61～79歲，平均（68.4±8.2）歲，WHO2008標準分型為 B-ALL患者28例，T-ALL患者8例，均對試驗簽署知情同意書，符合倫理學標準。

1.2 方法

患者均采用大劑量甲氨蝶呤（山西普德藥業股份有限公司，H14022462，劑型：注射劑，規格：5mg）治療，用量為 3g/（m2·d）。在甲氨蝶呤用藥后12h行7.5%甲氨蝶呤劑量的甲酰四氫葉酸[CF，注射用亞葉酸鈉，武漢人福藥業有限責任公司，H20090013 ，劑型：注射劑，規格：0.1g(以亞葉酸計)]解救，CF解救分至少6次進行，每次之間間隔時間為6h，至血清甲氨蝶呤水平＜0.1μmol/L時停止CF解救。

1.3 觀察指標和檢測方法

在治療前取患者空腹靜脈血8mL置于EDTA抗凝管中常規冷藏待測。采用放射免疫法檢測β2-MG水平[4]。采用實時定量RT-PCR法檢測其治療前的外周血CyclinB2[5]。采用半巢式PCR方法檢測外周血IgH基因重排[6]。統計其隨訪1年生存率。

1.4 統計學方法

采用SPSS19.0軟件，計量資料均符合正態分布并采用兩獨立樣本均數t檢驗進行組間比較，計數資料比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 患者隨訪1年生存預后情況分析

36例患者隨訪1年存活患者29例，死亡患者7例，1年生存率為80.56%（29/36），患者1年生存率較低，預后情況差，急需改善 。

2.2 隨訪1年期間存活和死亡患者治療前β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排比較

比較隨訪1年期間存活患者和死亡患者治療前β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排陽性率，死亡患者β2-MG、CyclinB2水平均明顯高于存活患者，且死亡患者IgH基因重排陽性率100%也明顯高于存活患者的48.28%，組間比較差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.3 老年急性淋巴細胞白血病外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率與其1年生存率的關系分析

Spearman相關性分析結果顯示，老年急性淋巴細胞白血病外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率與其1年生存率均呈負相關（r= -0.844，-0.818，-0.852，P ＜ 0.05）。

2.4 老年急性淋巴細胞白血病外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率預測其1年生存預后的價值分析

老年急性淋巴細胞白血病外周血β2-MG、CyclinB2水平預測其1年生存預后的價值良好，診斷性試驗四格表分析結果顯示，老年急性淋巴細胞白血病IgH基因重排率預測其1年生存預后的價值良好，其中個以三者聯合預測患者1年生存預后的價值最優。見表2。

3 討論

本研究結果提示，老年急性淋巴細胞白血病大劑量甲氨蝶呤治療患者隨訪1年的生存率僅約8成，其隨訪1年生存率較低，患者預后情況較差，亟待改善。因此，改善老年急性淋巴細胞白血病大劑量甲氨蝶呤治療預后是目前急需解決的醫療難題。與其他癌癥性疾病一致，急性淋巴細胞白血病的發生發展亦涉及多個因子。CyclinB2僅在部分腫瘤細胞中表達，已成為腫瘤細胞的標志[7-12]。因此，CyclinB2亦可能與老年急性淋巴細胞白血病相關。β2-MG亦是腫瘤標志物，腫瘤細胞可合成β2-MG[13-14]。因此β2-MG亦可能與老年急性淋巴細胞白血病相關。IgH重排更是淋巴細胞克隆性增生的特異性標準，與淋巴細胞來源惡性腫瘤密切相關[15-16]。因此，IgH重排亦可能與白血病密切相關。

表2 老年急性淋巴細胞白血病外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率預測其1年生存預后的價值

本研究結果顯示，老年急性淋巴細胞白血病患者外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率均較高，提示β2-MG、CyclinB2和IgH基因重排可能與老年急性淋巴細胞白血病的發生相關。而本研究中老年急性淋巴細胞白血病大劑量甲氨蝶呤治療后死亡患者治療前外周血CyclinB2和β2-MG水平以及IgH基因重排陽性率均較高，提示其外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率可能與生存相關。進一步Spearman相關性分析結果顯示，老年急性淋巴細胞白血病外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率與其1年生存率均呈負相關，其外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率可反映其隨訪1年不良預后風險，可能用于其預后情況評估。進一步研究證實，老年急性淋巴細胞白血病大劑量甲氨蝶呤治療患者治療前外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率預測其1年生存預后的價值良好，其中以三者聯合預測患者1年生存預后的價值最優，對老年急性淋巴細胞白血病大劑量甲氨蝶呤治療患者治療前外周血β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排率的檢測可能早期預知其不良預后風險，對于外周血β2-MG、CyclinB2水平分別高于2213ng/mL、1582以及IgH基因重排陽性患者需盡早進行干預，以期改善預后情況。

綜上所述，老年急性淋巴細胞白血病大劑量甲氨蝶呤治療患者β2-MG、CyclinB2水平和IgH基因重排聯合預測患者預后價值良好，可能用于其早期預后評估干預，從而指導臨床改善預后情況。

[1] 王業生，孫玲，焦雪麗，等.改良VDLP方案在老年急性淋巴細胞白血病中的應用研究[J].中華老年醫學雜志，2016，35（9）：975-977.

[2] 張閏，劉娟，葛崢，等.老年人急性淋巴細胞白血病臨床和實驗室特征研究[J].中華老年醫學雜志，2013，32（4）：426-429.

[3] 王淑梅，孫路路，楊平，等.大劑量甲氨蝶呤注射劑化療導致急性淋巴細胞白血病患兒肝功能異常的危險因素分析[J].中國臨床藥理學雜志，2016，32（21）：2012-2014.

[4] 王建功，胡萬寧，王曉紅，等.Wnt5a、CyclinB2在甲狀腺腫瘤組織及血清中的表達及臨床意義[J].河北醫科大學學報，2012，33（11）：1268-1270.

[5] 錢瑛，陳國千.中樞神經系統白血病患者腦脊液胱抑素C、β2-微球蛋白及乳酸脫氫酶水平觀察[J].國際檢驗醫學雜志，2014，35（4）：412-413.

[6] 鄭苗苗，岳麗杰，陳小文，等.急性淋巴細胞白血病患兒MTHFR基因多態性與大劑量甲氨蝶呤毒副反應的關系 [J].中國當代兒科雜志，2013，15（3）：201-206.

[7] 王婧，黃曉軍，江濱，等.55歲以上中老年急性淋巴細胞白血病患者的臨床特征與療效分析[J].北京大學學報（醫學版），2013，45（6）：938-944.

[8] 龍潺，唐雪元，鄭方英，等.miRNA－19b 在急性淋巴細胞白血病發病中的作用機制[J].中國老年學雜志，2016，36（19）：4724-4726.

[9] 梅艷，汪洋，宋新文，等.兒童急性淋巴細胞白血病化療中甲氨蝶呤血藥濃度監測結果分析[J].中國臨床藥理學雜志，2012，28（8）：566-568.

[10] 王淑梅，孫路路，楊平，等.大劑量甲氨蝶呤注射劑化療導致急性淋巴細胞白血病患兒白細胞減少的危險因素分析 [J].中國臨床藥理學雜志，2016，32（20）：1905-1907.

[11] 王建功，胡萬寧.PPN/MG61、CyclinB2在甲狀腺腫瘤組織及外周血中的表達[J].山東醫藥，2009，49（16）：76-77.

[12] 顧敏，李爽，郝良純，等.大劑量甲氨蝶呤治療兒童急性淋巴細胞白血病的血藥濃度及影響因素分析[J].中國醫科大學學報，2013，42（6）：566-569.

[13] 譚必然 .血清與腦脊液 β2-MG、SDF-1、IGF-1及MBP與急性淋巴細胞白血病的相關性研究[J].臨床和實驗醫學雜志，2014，13（14）：1148-1150.

[14] 張傳新，胡國敏，賈國存，等.中樞神經系統白血病患兒腦脊液β2-M G、IL-2、IL-6水平測定[J].鄭州大學學報（醫學版），2013，48（4）：568-569.

[15] 田佳懿，劉俊麗，王淑梅，等.大劑量甲氨蝶呤注射劑化療導致急性淋巴細胞白血病患兒貧血的相關因素分析[J].中國臨床藥理學雜志，2016，32（20）：1908-1910.

[16] 王淑梅，孫路路，曾蔚欣，等.CYP2 C19基因多態性與急性淋巴細胞白血病易感性及甲氨蝶呤血清濃度的關系 [J].中國臨床藥理學雜志，2014，30（7）：577-580.