太平白枇杷花主要有效成分檢測(cè)及制作工藝

陳 翔，鄭士華，王喜周，葉小林，陳俊偉，周曉音*

(1.麗水市農(nóng)作物站，浙江 麗水 323000； 2.麗水學(xué)院，浙江 麗水 323000； 3.麗水市蓮都區(qū)農(nóng)業(yè)局，浙江 麗水 323000；4.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 園藝研究所，浙江 杭州 310021)

枇杷花為薔薇科枇杷屬植物枇杷的干燥花蕾及花序，其味淡，微溫，入肺經(jīng)，能疏風(fēng)止咳，通鼻竅。《本草綱目》中記載：枇杷花具有“止渴下氣，利肺氣，止吐逆，去焦熱，潤(rùn)五臟”及“治頭風(fēng)、鼻涕清涕”等功效。在《土家族醫(yī)藥學(xué)》中稱“枇杷卡蒙”，認(rèn)為“花蕾治各種咳嗽，百日咳”。枇杷花含有豐富的類黃酮、胡蘿卜素、酚類等生物活性成分，其中含有醫(yī)藥上受關(guān)注的生物活性強(qiáng)、藥理作用廣泛、副作用小的酚類物質(zhì)槲皮素和槲皮苷[1]，以及具有祛痰止咳、輔助性抗癌藥物苦杏仁苷[2-3]，這些都有非常高的藥用價(jià)值和保健功能，可用于開發(fā)新型藥物與枇杷花蜜、花茶飲品等保健品。

麗水枇杷種質(zhì)資源豐富，素有“浙江枇杷基因庫”之稱。但麗水豐富的枇杷種質(zhì)資源至今尚未得到有效利用，特別是大量的枇杷花資源。為調(diào)節(jié)花果比例，保證枇杷果實(shí)發(fā)育良好，達(dá)到年年豐產(chǎn)優(yōu)質(zhì)，每年進(jìn)行疏花保果措施乃至70%～80%的枇杷花被浪費(fèi)。吳媛琳等[4]研究發(fā)現(xiàn)，枇杷的生殖器官(花和花蕾)的抗氧化活性顯著高于其營(yíng)養(yǎng)器官(花梗、枝條、葉)。因此，如能有效利用枇杷花資源，開發(fā)枇杷花茶產(chǎn)品，將增加農(nóng)民收入，創(chuàng)造非常可觀的經(jīng)濟(jì)效益。

白枇杷花的抗氧化活性優(yōu)于紅枇杷花[3]。太平白枇杷是從麗水豐富枇杷資源里篩選出的一個(gè)抗性好、品質(zhì)優(yōu)、可食率高、適合在山地推廣栽植的白沙枇杷新品系[5]。本文通過研究其不同花期和加工工藝對(duì)枇杷花功能成分的影響，以期為進(jìn)一步深入研究該品種打下基礎(chǔ)，為本地枇杷花的綜合利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

供試材料為浙江省麗水市蓮都區(qū)太平鄉(xiāng)枇杷園里的本地特有枇杷。品種為太平白(白肉)，采集時(shí)間為2015年11月5日的花序、花朵、花蕾、花瓣。色譜標(biāo)準(zhǔn)品為SIGMA公司生產(chǎn)的槲皮素(批號(hào)：117-39-5)、槲皮苷(批號(hào)：522-12-3)、苦杏仁苷(批號(hào)：29883-15-6)，其他試劑為分析純級(jí)。

1.2 方法

1.2.1 枇杷花功能成分供試液的制備

枇杷花50 ℃烘干，冷藏備用。枇杷花粉碎，過篩，精確稱取枇杷花樣品1 g，按1∶30的固液比用95%乙醇浸泡30 min后超聲提取。提取條件：時(shí)間30 min，溫度75 ℃，超聲頻率40 KHz。提取液過濾、濃縮、定容備用，每個(gè)樣品做3個(gè)平行；測(cè)定前樣品經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾。

1.2.2 槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷含量測(cè)定

取1.2.1制備的溶液采用Agilent1200series高效液相色譜儀，按照各自的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)峰面積計(jì)算樣品中槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷的含量，重復(fù)3次。

槲皮素色譜條件。色譜柱Agilent Eclipse plus C18(4.6 m×150 mm，5 μm)；流動(dòng)相MeOH∶0.4% H3PO450∶50，檢測(cè)波長(zhǎng)360 nm；流速1 mL·min-1；柱溫25 ℃；進(jìn)樣量10 μL；積分方法為歸一化法。

槲皮苷色譜條件。色譜柱Agilent Eclipse plus C18(4.6 m×250 mm，5 μm)；流動(dòng)相Acetonitrile:0.02 mol·L-1KH2PO4(adjust pH 2.5 with H3PO4)18∶82，檢測(cè)波長(zhǎng)350 nm；流速1 mL·min-1；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量10 μL；積分方法為歸一化法。

苦杏仁苷色譜條件。色譜柱Agilent Eclipse plus C18(4.6 m×150 mm，5 μm)；流動(dòng)相ACN:0.1%H3PO412∶88，檢測(cè)波長(zhǎng)210 nm；流速1 mL·min-1；柱溫25 ℃；進(jìn)樣量10 μL；積分方法為歸一化法。

1.2.3 枇杷花的干燥方法

烘箱干燥。將枇杷花分別在50 ℃、100 ℃和150 ℃的烘箱中烘干至恒重。

室溫干燥。將枇杷花放置室內(nèi)通風(fēng)處自然風(fēng)干。

微波干燥。將枇杷花分別用高火、中火、低火微波殺青5 min，再烘箱50 ℃干燥至恒重。

以微波高火，分別對(duì)供試品殺青5、7、11 min，再烘箱50 ℃干燥至恒重。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同花期槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷的含量

由表1可知，枇杷花中生物活性物質(zhì)的含量隨發(fā)育階段不同而發(fā)生波動(dòng)。太平白枇杷花不同發(fā)育階段的花朵其槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷的含量存在顯著差異。晚花期的花朵所含的槲皮素和槲皮苷最高，分別為0.34±0.17和0.82±0.14 mg·g-1，而苦杏仁苷含量最低，為0.66±0.09 mg·g-1，盛花期的花朵苦杏仁苷含量最高，為2.03±0.17 mg·g-1，而初花期的枇杷花的槲皮素和槲皮苷的含量最低，分別為0.16±0.06和0.43±0.16 mg·g-1。隨著枇杷花發(fā)育的不同階段，里面槲皮素和槲皮苷的含量變化曲線是一直增加，而苦杏仁苷含量是先增加再降低。從枇杷花的生物活性物質(zhì)含量及生物總量的角度考慮，采收時(shí)間應(yīng)確定為盛花期。

表1 不同花期枇杷花槲皮素、槲皮苷和 苦杏仁苷含量

2.2 不同干燥方式對(duì)槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷含量的影響

表2統(tǒng)計(jì)分析表明，太平白枇杷花用不同干燥方法測(cè)的生物活性物質(zhì)存在顯著性差異。對(duì)于烘箱干燥，50 ℃干燥的條件下，枇杷花中的槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷含量較高，含量分別為0.28、0.63、1.92 mg·g-1，隨著烘箱干燥溫度的升高，生物活性物質(zhì)含量逐漸下降，說明測(cè)定的3種物質(zhì)不耐高溫；對(duì)于微波干燥來說，從測(cè)定含量上看高火和中火處理無顯著差別，但中火含量略高于高火，且高火容易將花瓣燒焦變形，降低枇杷花商品性；室溫干燥，生物活性物質(zhì)含量最低，可能是枇杷花中自帶的酶和空氣中的氧氣把槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷分解和氧化。

表2 干燥方式對(duì)槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷 含量的影響

2.3 微波殺青時(shí)間對(duì)盛花期時(shí)槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷含量的影響

由表3統(tǒng)計(jì)分析表明，不同微波殺青時(shí)間，樣品間的生物活性物質(zhì)的含量存在顯著性差異。殺青時(shí)間為5 min時(shí)，枇杷花中的槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷含量最高，含量分別為0.25±0.11、0.74±0.14、2.12±0.56 mg·kg-1，且此時(shí)花瓣完整，無變色。隨著殺青時(shí)間的延長(zhǎng)，枇杷花開始變形變色，其生物活性物質(zhì)含量降低，其中槲皮素的含量的降幅最大，苦杏仁苷降幅最小。

表3 微波殺青時(shí)間槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷 含量的影響

2.4 不同干燥方式對(duì)枇杷花商品屬性影響

表4表明，烘箱50 ℃干燥至恒重與微波中火5 min+烘箱50 ℃至恒重的工藝，結(jié)果基本一樣，但經(jīng)過微波中火5 min的殺青過程，泡出的花茶更有清香風(fēng)味；微波中火30 min+烘箱50 ℃至恒重工藝，由于微波殺青過程中供試品的溫度過高致使枇杷花的花形、花色及香味欠佳。

表4 不同干燥方式對(duì)枇杷花商品屬性的影響

3 小結(jié)與討論

3.1 生產(chǎn)工藝的制定

采收時(shí)間和初加工方法是花類中藥材GAP實(shí)踐的關(guān)鍵問題之一，直接影響到藥材的產(chǎn)量、品質(zhì)以及深度開發(fā)，因此需摸索枇杷花不同花期及加工方法對(duì)槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷含量的影響。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果可知，綜合花量、花期與有效成分含量的平衡，生產(chǎn)工藝的操作便捷性和規(guī)劃生產(chǎn)的可行性來看，以麗水太平白枇杷花盛花期，微波殺青5 min+烘箱50 ℃干燥至恒重為宜。在實(shí)際生產(chǎn)實(shí)踐中，因人工成本較高，為減少勞動(dòng)力，在疏花采收過程中同時(shí)采收花蕾和盛花花朵作為制作枇杷花茶的原材料，并確定了以下2條生產(chǎn)工藝，以減少加工對(duì)有效成分與商品性的影響。

枇杷花茶(花蕾)：枇杷花→凈制→微波殺青5 min→烘箱50 ℃干燥→稱重→包裝。

枇杷花茶(花瓣)：枇杷花序→凈制→取花瓣→微波殺青5 min→烘箱50 ℃干燥→稱重→包裝。

3.2 枇杷花茶的效益

現(xiàn)代都市由于大氣污染日益嚴(yán)重，空氣中存在大量的灰霾，給人體的健康造成巨大的影響，開發(fā)枇杷花可滿足社會(huì)的保肺護(hù)肺的養(yǎng)生需求。太平白枇杷品種成花易，花序產(chǎn)量高。以2014—2015年的8年生成齡枇杷園觀察，根據(jù)高效生產(chǎn)要求，疏除1/3總枝量的花序，每667 m2枇杷鮮花序產(chǎn)量為40～70 kg，收購價(jià)為40元·kg-1，花蕾/花朵的干鮮比為1∶5，由此推算，每667 m2枇杷花序產(chǎn)值為1 600～2 800元。對(duì)果農(nóng)而言，銷售原本疏除丟棄的枇杷花序，只經(jīng)過簡(jiǎn)單加工，即可增加2 000多元的收入。

已有研究對(duì)枇杷花的主要藥效物質(zhì)不明確。本研究選取槲皮素、槲皮苷和苦杏仁苷為研究切入點(diǎn)，從推廣生產(chǎn)的便捷性與實(shí)用性角度來開發(fā)枇杷花研制工藝，此加工工藝對(duì)于其他生物營(yíng)養(yǎng)活性物質(zhì)含量的影響及不同保存條件對(duì)枇杷花茶品質(zhì)的影響還需要進(jìn)一步研究。

[1] 邢國(guó)秀，李楠，楊美燕，等. 天然苦杏仁苷的研究進(jìn)展 [J]. 中成藥，2003，25(12)：1007-1009.

[2] 駱明旭，羅丹，趙萬紅. 槲皮素藥理作用研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)民族民間醫(yī)藥, 2014(17)：12-13.

[3] 閆永芳. 枇杷花主要營(yíng)養(yǎng)成分、酚類物質(zhì)及其干燥工藝研究[D]. 杭州：浙江大學(xué)，2012.

[4] 吳媛琳，趙聽，張凱煜，等. 枇杷不同部位主要有效成分含量及抗氧化活性比較[J]. 西北林學(xué)院學(xué)報(bào)，2015，30(1)：196-201.

[5] 周曉音，李國(guó)斌，陳俊偉.白沙枇杷太平白的選育及應(yīng)用[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012 (3)：318-319.