ＨＰＬＣ－ＩＣＰ－ＭＳ測定牛黃解毒片中砷形態(tài)分析的不確定度

艾丹 陳秋生

摘要：建立了液相-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（HPLC-ICP-MS）測定牛黃解毒片中砷元素形態(tài)的不確定度評價方法。根據(jù)JJF1059.1-2012《測量不確定度評定與表示》技術(shù)規(guī)范的要求，對液相-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測定牛黃解毒片中砷元素形態(tài)含量的結(jié)果進(jìn)行不確定度分析。結(jié)果表明，影響樣品溶液濃度測定結(jié)果不確定度的主要包括標(biāo)準(zhǔn)溶液的不確定度、工作曲線方程的不確定度、重復(fù)測定樣品的不確定度，計算出各種不確定度分量并將其合成，以此計算出牛黃解毒片中砷元素形態(tài)測量的不確定度。

關(guān)鍵詞：液相-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（HPLC-ICP-MS）;不確定度;牛黃解毒片;砷元素形態(tài)

中圖分類號：O657.63? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：0439-8114（2018）23-0132-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.23.031? ? ? ? ? ?開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

測量不確定度是測量結(jié)果的科學(xué)表達(dá)，也是測量結(jié)果可靠性、可比性和可接受性的基礎(chǔ)[1]。目前，中國各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室為實(shí)現(xiàn)與國際接軌，開始進(jìn)行國家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可評審，目的是評價測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，需對檢測過程進(jìn)行不確定度評定。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可準(zhǔn)則要求，在分析檢測過程中，需要建立并應(yīng)用評定結(jié)果的不確定度程序[2]。目前國內(nèi)外文獻(xiàn)報道關(guān)于分析方法測量不確定度的評定多見于食品分析[3，4]、環(huán)境分析[5，6]等領(lǐng)域，且在藥物分析領(lǐng)域也得到了一定的應(yīng)用[7，8]，并將得到越來越多分析工作者的重視。測量不確定度是對測量結(jié)果的定量表征，不確定度越小，測量結(jié)果越準(zhǔn)，使用價值越大[2]。

2015年藥典中，液相-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用法（HPLC-ICP-MS）是常見測定方法之一。由于HPLC-ICP-MS是一種新型元素和同位素分析技術(shù)，具有檢出限低、動態(tài)線性范圍寬、干擾少、分析精密度高和分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，可同時完成多元素測定，具有極高的檢測效率，是痕量、超痕量元素分析領(lǐng)域最先進(jìn)的方法之一[9，10]。因此，采用HPLC-ICP-MS手段對中藥重金屬含量進(jìn)行測定，進(jìn)而采取質(zhì)量控制手段，對于規(guī)范中藥采集、運(yùn)輸、加工飲片及制劑過程中可能引入的重金屬進(jìn)行監(jiān)控和規(guī)范有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

目前，ISO/IEC17025：2005[11]以及GB/T 27025-2008[12]中均要求檢測實(shí)驗(yàn)室具有評價測量不確定度的程序，能夠?qū)z測項目的不確定度作出正確評估，滿足客戶及檢測工作的要求。測量不確定度在實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)比對、方法確認(rèn)、標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備校準(zhǔn)、量值溯源以及實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制與管理等方面具有重要的意義。本研究根據(jù)JJF1059.1-2012[13]、CNAL/AG06：2003[14]技術(shù)規(guī)范的要求，對HPLC-ICP-MS技術(shù)測定牛黃解毒片中砷元素形態(tài)的不確定度進(jìn)行了分析，以期為這方面研究提供參考。

1? 材料與方法

1.1? 主要儀器與試劑

液相-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國安捷倫公司）;超純水儀MILLI-Q（美國Millipore公司）;亞砷酸根分析標(biāo)準(zhǔn)溶液（GBW08666），濃度為1.011±0.016 μmol/g;砷酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液（GBW08666），濃度為0.233±0.005 μmol/g;乙二胺四乙酸二鈉。

1.2? 方法

牛黃解毒片樣品按文獻(xiàn)[15]進(jìn)行樣品前處理，稱取牛黃解毒片樣品0.2 g，加入人工腸液25 mL，置37 ℃水浴中超聲處理20 min，搖勻，離心或過濾，吸取中層溶液10 mL，用微孔濾膜（10 μm）濾過，精密量取濾液1 mL，用0.02 mol/L乙二胺四乙酸二鈉溶液稀釋至100 mL，搖勻。分別吸取一定體積的溶液，上機(jī)測定，其吸收量與砷元素形態(tài)含量成正比，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。標(biāo)準(zhǔn)曲線取6個濃度點(diǎn)，每個濃度點(diǎn)重復(fù)進(jìn)樣3次，以系列標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液不同形態(tài)或價態(tài)砷的峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。同時作空白試驗(yàn)。

3? 小結(jié)

以液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測定牛黃解毒片中的砷元素形態(tài)為例，討論了測定牛黃解毒片中的砷元素形態(tài)的不確定度的主要來源及其各不確定度分量評定方法。可以看出，該方法也適用于其他儀器分析方法（如原子熒光法、火焰原子吸收法等），該方法的不確定度主要來源于測量全過程的重復(fù)性、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作、稱量和定容所使用的天平、玻璃器皿等方面。從以上分析可知，在實(shí)際操作中，認(rèn)真、細(xì)心、按規(guī)范做好每一步操作，就可以減少不確定度，保證測量結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

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