江西省269例臍血染色體核型臨床分析

王欣榮，劉艷秋

(江西省婦幼保健院產前診斷中心，南昌 330006)

染色體疾病是導致胎兒出生后智力低下、生長發育遲緩的常見原因之一，是嚴重的先天性疾病，且目前缺乏有效的治療方法[1]。因此通過產前診斷及時發現并阻止有染色體疾病胎兒兒的出生是優生工作的重點。由于絨毛穿刺和羊水穿刺的手術時間均有孕周的限制，而臍血穿刺的手術時間受孕周限制較小，因此對于較大孕周（孕22周以上）的有產前診斷指征的孕婦行臍血染色體檢查已成為一種不可或缺的產前診斷方式。我中心自2014年在江西省率先開展臍血穿刺手術以來，已陸續為多例孕婦行臍血穿刺及染色體核型分析，本文對269例臍血染色體核型結果進行總結，探討臍血染色體異常核型與產前診斷各指征的關系，從而為今后的產前診斷工作提供客觀的實驗數據。

1 對象與方法

1.1 臨床資料 選擇2014年1月-2017年8月在我院就診具有臍血穿刺指征、自愿行臍血穿刺產前診斷的孕婦277例，年齡為18-45歲，孕周為24-30周。我們將臍血穿刺產前診斷的指征分為8組，分別是：高齡（≥35歲）、唐氏征篩查高風險、NIPT陽性、不良生育史、羊水染色體核型分析提示嵌合體、夫婦一方為染色體異常攜帶者、孕期不良接觸史、孕中期或孕晚期B超胎兒異常，例如：心臟結構畸形，心室強光斑，脈絡叢囊腫，腦室增寬，頸部皮膚層增厚，四肢畸形，唇腭裂，宮內發育遲緩，羊水過多或過少，鼻骨短小或缺失，腸管回聲增強，胎兒水腫等情況。

1.2 方法 在無菌條件下，在B超引導下，經腹壁進行臍血穿刺，抽取臍血2ml，注入無菌肝素鈉管中送實驗室，進行常規染色體培養、制片、G顯帶，計數30個分散好、中等長度的中期分裂相染色體，用德國萊卡公司染色體自動分析儀分析3-5個核型，發現嵌合體時，計數100個核型后計算比例。根據國際人類細胞遺傳學命名體系(ISCN2009)描述染色體核型。

1.3 統計分析 將數據錄入excel，數據分析采用率和構成比表示。采用SPSS 18.0統計軟件，組間計數和計量資料比較分別行χ2和t檢驗，P<0.05為有統計學差異。

2 結果

2.1 臍血穿刺不同指征異常染色體核型檢出情況臍血細胞常規培養277例，8例培養不成功，培養成功率為97.11%。符合衛生部產前診斷實驗室關于臍血細胞培養的要求。共發現異常核型59例，異常核型檢出率為21.93%。其中NIPT陽性異常染色體核型檢出率最高，為78.57%，而B超胎兒異常染色體異常核型檢出例數最多，為45例。臍血穿刺各指征染色體異常檢出情況具體情況見表1。

2.2 異常染色體核型類型分析 59例異常核型中，染色體數目異常最多，為26例，占44.07%，而其中21三體19例，占32.20%。其次是染色體多態性，為17例，占28.81%。結構異常中以倒位最多，是5例，占8.47%。具體見表2。

3 討論

3.1 臍血穿刺術在產前診斷中的價值 產前診斷就是對胎兒進行先天缺陷和遺傳性疾病的診斷。其目的不僅為符合產前診斷指征的孕婦提供可靠的信息，使她們能夠在妊娠期間對胎兒的去留作出適當的選擇，而且對于B超已確定畸形的胎兒進行染色體分析，還可以協助醫生對孕婦的下次妊娠進行有效指導。由于臍血穿刺術相比絨毛穿刺和羊水穿刺術，具有⑴較大的孕周適用范圍，孕22-32周；⑵較快的出具染色體核型結果：臍血從手術取樣到出具染色體核型分析報告一般一周即可，較絨毛和羊水的時間要縮短很多；⑶培養成功率和特異性高：可對絨毛或羊水中培養失敗進行補救，也可對絨毛或羊水中培養中出現的嵌合現象進行確診等優點，因此對于孕中期錯過唐氏篩查或羊水穿刺的高危孕婦，和孕中晚期B超提示胎兒異常的孕婦，以及絨毛及羊水培養失敗或培養出現嵌合體時，行臍血穿刺進行染色體核型分析就顯得尤為重要[2]。

表1 臍血穿刺各指征染色體檢出情況

表2 染色體異常核型分類

3.2 胎兒異常核型分布分析 本中心臍血染色體異常核型檢出率為21.93%，遠遠高于國內郭小寶等[3]報道5.5%的異常率，可能因為我們研究的樣本里大部分都是B超胎兒異常的高危孕婦，而且我們將染色體多態性也歸類為異常核型，所以異常檢出率較高。在檢出的59例異常核型中，三體檢出率最高，占異常核型的44.07%(26/59)，其中21-三體19例、18-三體5例，13三體1例，說明三體核型仍然是胎兒最常見的異常核型，三體中又以21-三體為主，這與國內外的報道一致[4]。NIPT是運用高通量測序技術檢測母血內胎兒游離DNA的一種新技術，目前主要用于胎兒21-三體、18-三體、13-三體的產前檢測，也用于性染色體的非整倍體的檢測。本中心對14例NIPT檢測高風險的的孕婦行臍血穿刺染色體核型分析，發現11例異常核型 （檢出率78.57%）：其中8例21三體高風險，臍血確診6例（檢出率75%）；1例NIPT18三體高風險，確診1例（檢出率100%）；2例性染色體高風險，確診2例 （檢出率100%）；3例其他異常（NIPT提示染色體微缺失或微重復或提示其他染色體數目異常等），確診1例（檢出率33.33%）。本中心的NIPT 21三體高風險經過臍血染色體檢查，符合率僅75%，較國內其他中心明顯偏低[5]，主要原因可能跟樣本數較少有關。胎兒超聲檢查在產前診斷中有著重要的作用，特別是超聲檢查異常往往提示胎兒染色體異常的可能性較大，如本中心對246例妊娠中晚期超聲提示異常的孕婦行臍帶穿刺，發現45例異常核型，檢出率18.29%，在8組臍血穿刺指征中異常染色體檢出率排第二位。其中28例是染色體數目異常和結構異常，另外17例是染色體多態性，檢出率為6.91%。染色體多態是一種常見的染色體結構變異，在人群中的攜帶率為2.6%[6]，主要是指染色體結構或帶型強度的微小變異，常涉及遺傳上相對不活躍、含高度重復DNA結構的異染色質區。以往的觀點認為，染色體多態屬于正常形態變異，不引起表型和功能的異常，因而不具有臨床意義。但最近幾年越來越多的研究表明，染色體多態性與反復稽留流產、胎死宮內、生育畸形兒、男性少精、弱精或無精、女性不孕等生殖異常有一定相關性[6，7]。本文B超胎兒異常中染色體多態檢出率為6.91%，較普通人群攜帶率（2.6%）明顯要高很多，提示我們要對B超胎兒異常合并染色體多態的情況引起重視，要密切觀察和隨訪。我們相信，隨著醫學技術的不斷進步和發展，染色體多態性作用機理及遺傳效應將得到進一步了解，為產前診斷提供更好的理論依據。

綜上，近幾年隨著新技術如NIPT和四維彩超在醫院越來越普及，尤其是四維彩超在臨床的大規模使用，越來越多的胎兒結構異常在妊娠中晚期即被發現，如本研究收集269例中就有多達246例因此原因來我院就診，而臍血穿刺術相對絨毛取樣及羊水穿刺而言，具有適用孕周廣泛、過程簡便快速等優點，將在今后的產前診斷工作中發揮更大的作用。