高效液相色譜測定甘草酸的研究進展

田建軍 張彥波 夏立君 張明明

【摘 要】概述了近年來應用高效液相色譜法測定甘草不同制劑類型甘草酸的研究進展。重點介紹了膠囊劑、粉劑、注射劑、沖劑、片劑甘草酸的研究進展。

【關鍵詞】高效液相色譜法；甘草；制劑；甘草酸

【中圖分類號】R917 【文獻標識碼】A 【文章編號】1005-0019（2018）22--01

1 前言

中藥甘草性甘，進入肝臟，脾臟，肺經脈，補脾益氣，清熱和解毒，祛痰和咳嗽，緩解疼痛，緩解壓力，調和各種藥物。有助于脾胃虛弱，疲勞，心悸，氣短，呼吸短促，咳嗽和痰，腹部和四肢癱瘓的疼痛，發紅，痛苦的中毒，減少藥物的毒性和強度[1]。甘草具有廣泛的功能，包括抗炎劑、抗過敏劑、抗驚厥劑、抗病毒、抗癌、鎮痛藥、利尿劑等。

現代研究表明甘草酸是甘草中最重要的活性成分之一。甘草酸廣泛用于治療急性、慢性肝炎、支氣管炎和艾滋病，因為其具有糖皮質激素的藥理作用，并且沒有嚴重的副反應。它有防癌、抗癌，干擾素誘生劑和細胞免疫調節功能[2]。測定甘草酸的方法包括比色法、氣相色譜法、薄層色譜法和高效液相色譜法[3-6]。高效液相色譜法，由于其簡單的操作，高靈敏度，快速的分析速度以及良好的可再生性而被廣泛使用。

2 膠囊劑

李冬梅等[7]人決定用hplc法測定甘草酸的含量，Shugan膠囊通過高效液相色譜法。色譜柱為Hypersil C18柱（250mm×4.6mm，5um），以甲醇-水-冰醋酸（63：37：1）為流動相，流速為1.0ml/min，測波長為254nm，色譜柱上的理論柱的數量不少于2000的甘草酸，而甘草提取物的成分在這種情況下是完全分開的，甘草酸的分離度大于1.5，結果表明，甘草酸之間有良好的線性關系和峰面積積分，質量濃度在10-100ug/ml的濃度范圍。甘草酸回收率為101.0%，RSD回收率為1.4%；王志平等[8]用采用HPLC法測定復方甘草酸膠囊中的甘草酸苷含量。采用Vercopak（ODS-3：4.6mm×150mm，5μm）色譜柱，流動相為乙腈-0.01mol/L-H3PO4水溶液（38：62），柱溫30℃，流速1.0ml/min，檢測波長249nm。測定出甘草酸苷39.8～199μg/ml的范圍呈良好線性，相關系數為R2=0.9996，平均加樣回收率為98.99%，RSD為0.98%；張軼華[9]采用高效液相色譜法測定甘草酸二銨膠囊。色譜柱為Agilent Extend-C18柱，流動相為乙腈-0.01mol·L-1磷酸溶液（38∶62），檢測波長為252nm，柱溫為35℃，流速為1.0mL·min-1，進樣量為20μL結果：甘草酸二銨檢測濃度在12.5～1250?g·mL-1范圍內與峰面積積分值呈良好的線性關系；平均回收率為100.1%，RSD=0.3%。

3 粉劑

尹麗平[10]應用高效液相色譜法測定甘草酸粉中甘草酸的含量。色譜柱：內徑4～6mm，長15～25cm的不銹鋼管。填充劑為液相色譜用硬脂酸硅膠5～10um，流動相：稀乙醇（1～15）/乙腈混合液（3：2）；結果甘草酸在20.72～124.32μg/mL范圍內有良好的線性關系，r= 0.9999（n= 5），平均回收率為97.08%。

4 注射劑

劉海靜等[11]用HPLC法測定強力寧注射液中甘草酸單銨的含量。采用C18反相柱，檢測波長258nm，流動相為乙腈-0.01mol/L醋酸銨（3∶ 7）；平均回收率99.63%（RSD為1.07%）；甘草酸單銨在40～200μg/ml濃度范圍呈良好的線性關系。

5 沖劑

宋洪杰等[12]應用HPLC法測定胃脘舒沖劑中甘草酸的含量。色譜柱為Shim-packCLC-ODS（6.0mm×150mm，5um），以甲醇-水–36%冰醋酸（65：28：7）為流動相，流速為1.0ml/min，測波長為254nm，甘草提取物各成分在此條件下得到很好地分離，結果是甘草酸在質量濃度18-300ug/ml范圍內與峰面積積分值呈良好的線性關系，加樣回收率98.35±3.34%，RSD為3.39%。日內變異1.63%，日間變異3.35%；許楊彪等[13]測定了健胃茶中甘草酸含量，色譜柱為Inertsil ODS-3柱，流動相為甲醇-0.2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸（67：33：1），測波長為250nm，以流動相超聲提取30min，流速為1.0ml/min，結果甘草酸進樣量在0.784-4.70ug范圍內與峰面積積分值線性關系良好（r=0.9999），平均回收率為99.1%（RSD=1.26%）。

6 片劑

邰順章等[14]通過HPLC法測定復方桔梗止咳片中甘草酸及甘草苷的含量。采用Agilent C18（4.6mm×150mm，5μm）色譜柱；以乙腈-0.05%磷酸為流動相進行梯度洗脫；流速1.0mL·min-1；檢測波長237nm；進樣量：10μL；柱溫30℃。結果：甘草苷、甘草酸分別在10.65～42.60mg·L-1、97.30～389.30mg·L-1范圍內呈良好的線性關系，r分別為1.0000、1.0000；平均回收率（n=6）分別為98.80%（RSD=0.73%）、99.84%（RSD=0.10%）。測得6批復方桔梗止咳片，每片分別含甘草苷135.28μg、123.16μg、113.21μg、136.08μg、160.84μg、156.32μg，甘草酸441.36μg、405.86μg、364.69μg、446.93μg、518.22μg、509.65μg。

7 結語

應用HPLC法測定甘草制劑的類型多樣化，其測定方法雖有差異，但甘草酸含量的測定結果都具有一定研究價值，對于藥物質檢或研制方面具有指導意義。另有實驗表明，例如長期服用大劑量的藥物，可能會導致類醛固酮樣的副作用，主要是由高血壓，低鉀血癥和水，鈉潴留和其他癥狀引起的。這種機制被認為與這種藥物結構中的皮質類固醇的結構有關。因此如何有效利用甘草酸來減少副作用的發生是一個值得探討和研究的課題。簡而言之甘草酸的藥理學機制是多方面的，它的應用已經擴展到諸如抗肝炎病毒，抗艾滋病，抗癌，防癌，以及免疫增強的領域。

參考文獻

王修榮，王巖樹.淺談甘草的功效及應用.實用中醫藥雜志.2005，4：23-25.

國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：化學工業出版社，2005.

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呂堅，吳錫銘，周腈.氣相色譜法測定人鼠血漿中18-β甘草酸差向異構體含量[J].中國藥學雜志，1993，28（9）：552.