實驗動物山羊血型鑒定初探

王振芳,武永霞,胡佳麗

(冀中能源邢臺礦業集團總醫院,河北 邢臺 054000)

隨著人們對健康指數期盼越來越高,臨床醫生在防病治病崗位上,不斷探索新技術、新術式。在探索新術式時,某些高難度的術式,需要先在動物身上做實驗。本院骨科研究中心,選用當地山羊開展新術式,在開展新術式中有的山羊因出血過多而導致實驗延長,甚至山羊死亡。此時輸血在山羊生命支持中扮演著重要作用。因此,快速和準確鑒定血型,是保證山羊安全有效輸血的首要任務。現將山羊術前血型鑒定情況報告如下。

1 材料與方法

1.1 被檢山羊 被檢山羊來自河北省邢臺縣當地,共31只山羊。其中公羊12只,母羊19只。山羊年齡為1～2歲;體重為23.34 kg,平均體重為28.5 kg。

1.2 主要試劑與儀器 A型紅細胞、B型紅細胞及抗篩紅細胞(批號20170907、20171029)為長春博德生物技術有限責任公司生產;微柱凝膠血型卡(批號20170815),FYQ免疫微柱孵育器,TD-3A型血型血清學離心機均為長春博德生物技術有限責任公司生產,2005-2型血庫專用離心機(BaSo貝索)。

1.3 方法

1.3.1 血樣采集及處理 山羊頸靜脈采集3 mL EDTA抗凝全血,3 400.r/min離心,將血漿分離移入另一試管待檢。

1.3.2 血型檢測 (1)將山羊血標本的壓積紅細胞洗滌3次,配成0.8%紅細胞懸液;(2)取出微柱凝膠血型卡,標記檢測號,撕開封口膜;(3)微柱凝膠血型卡前三孔從左到右依次各加入山羊紅細胞懸液50 μL;微柱凝膠血型卡后三孔從左到右依次加入山羊血漿各50 μL,再分別加入0.8%O型紅細胞、A型紅細胞、B型紅細胞各50 μL,離心5 min觀察結果。

2 結果

山羊紅細胞血型結果 山羊紅細胞血型檢測結果見表1,從表1可知,山羊紅細胞血型正反定型類似人類紅細胞A B O系統的O型。Rh(D)陰性;

3 討論

過去人們認為只有人才有血型,現在隨著社會的進步,檢測方法越來越先進,發現動物的血型也很復雜,如貓有6種血型,馬有9～10種血型,豬有15種血型,牛有40多種血型。山羊有幾種血型至今未見詳細報道。目前尚無市售山羊的血型抗原抗體檢測專用試劑,筆者選用微柱凝膠血型卡對當地山羊進行了血型檢測。微柱凝膠卡是近年來興起的一項免疫學檢測新技術,其原理是微柱管中的凝集間隙可利用凝膠的濃度來調節,使其間隙只能允許單個紅細胞通過,可將聚集紅細胞與游離紅細胞分開,在通過離心作用,若紅細胞沉于凝膠管底部為陰性,在管上部為陽性【1-3】。用山羊的紅細胞分別加入微柱凝膠的單克隆抗-A、抗-B及抗-D中,再用山羊的血清分別加入Oc、Ac、Bc出現類似人類“O”型,Rh(D)陰性血型。由表1發現山羊抗原抗體反應結果有悖于人類O型血清學反應格局,即所選實驗山羊血清加入人的O型紅細胞后,在血型檢測和抗體篩查中均出現凝集現象,這一異常現象進一步證明了山羊的血清中存在著抗人類紅細胞抗體。由于實驗的標本數量少,還有待于今后繼續擴大檢測范圍,做大數據深入研究,不斷發現山羊的其他血型。

總之,了解掌握山羊的血型有其重要意義,尤其有助于山羊在新術式實驗過程中提高實驗效果,延長山羊的生命,也有助于山羊的優種優育以及創傷輸血救治。

表1 31只山羊血型檢測結果