高效液相色譜法在果蔬農藥殘留檢驗中的運用

◎ 李 燕

（菏澤市食品藥品檢驗檢測研究院，山東 菏澤 274000）

高效液相色譜法英文簡稱為HPLC，是在普通液相色譜法的基礎上引用氣相色譜理論優化而來的。該色譜檢測法具備分離速度較快、檢測耗時短等優點，同時其自動化發展水平與氣相色譜法不相上下，不僅如此，高效液相色譜法還保留了液相色譜法本身的優勢，能夠適用于大部分的檢測要求、流動相易于改變以及能夠大規模制作等，正因為融合了液相和氣相的優勢，高效液相色譜法在現代檢測技術中得到了廣泛的應用。農藥是果蔬農產品生長期間為防治害蟲而播撒的藥劑，在果蔬成熟后仍然會有少量殘余。現代許多果蔬種植地為了提高果蔬產量、增加產品的競爭力，在果蔬生長期間大量使用農藥，造成果蔬中的農藥殘留嚴重超標，人體在攝入超標的果蔬產品會對身體造成嚴重的危害[1]。當前階段，果蔬中主要的農藥殘留有有機磷、有機氯、氨基甲酸酯類、煙堿類、氟草煙等，前兩種已經得到了有效控制，為此，本文對后三種進行高效液相色譜法進行農藥檢測。

1 高效液相色譜法對氨基甲酸酯類農藥檢測

從功能上劃分，氨基甲酸酯類農藥屬于一種植物源殺蟲劑，20 世紀60 年代推廣以后在農產品種植上得到了廣泛的運用。這種農藥是在甲酸酯化合物的基礎上演變來的，具有快速分解、殘留時間短、藥效好、實用范圍廣等優勢，被普遍應用在蔬菜、水果等農副產品的種植上。但是，許多果蔬種植者為了實現利潤的最大化，在果蔬種植過程中使用了超量的氨基甲酸酯類農藥，造成成熟后的果蔬仍殘留著氨基甲酸酯類農藥，給食品的安全帶來了非常大的隱患。目前，國內外科學家在對氨基甲酸酯類農藥進行檢測時通常采用氣相色譜法、高效液相色譜法-質譜法等，通過對這些方法對比可知，每種方法都有各自的優缺點。在使用高效液相色譜法-質譜法檢測時，由于氨基甲酸酯類化合物熱穩定性能不好，造成檢測過程復雜，而高效液相色譜法由于本身具有精度高、適用性廣、重現性好等優勢，能夠很好地滿足氨基甲酸酯類農藥的檢測。

龔久平等[2]對原有的檢測方法進行優化，調整定容溶液與流動相溶液的比例，使用高效液相色譜儀對果蔬中的氨基甲酸酯類農藥進行含量檢測，以外標法為理論支持，可以得到標準曲線中的系數值為 0.999 3 ～0.999 6，回收率為93.6%～100.9%，保持時間為8.5 min。采用這樣的方法能夠實現較快的分析速度，具有檢測效果好、精度高等優勢，對氨基甲酸酯類農藥的檢測能夠取得良好的效果。

2 高效液相色譜法對煙堿類農藥檢測

煙堿類農藥是新研發出來的果蔬類農藥，具有殺蟲性能好、藥效持久性長、殘余量少等優點，在世界范圍內得到了廣泛的應用，年銷售產值突破了68 億美元。市面上在售的殺蟲劑中，煙堿類農藥是綜合性能最好的藥劑，總體銷售數量已經超越了氨基甲酸酯類農藥。現階段，市場上比較常用的煙堿類農藥品種有吡蟲啉、啶蟲脒、烯啶蟲胺、氯噻啉、噻蟲嗪等，吡蟲啉殺蟲劑是一種較為均衡的藥劑，是世界上最受歡迎的殺蟲劑，啶蟲脒在煙堿類農藥中也具有非常大的影響力。當果蔬中殘留有不止一種農藥成分時，需要對所有農藥進行同步檢測，通常采用氣相色譜-質譜法與高效液相色譜-質譜法兩種方法。其中高效液相色譜法-質譜法適用于受熱變化大、強極性以及揮發能力弱的農藥檢測。

侯如燕等[3]將實驗用的材料用乙腈提取，然后使用固相萃取柱對其進行凈化處理，檢測器械選取反向高效液相色譜-二極管陣列檢測器。選取黃瓜空白基質0.1 ～1.0 mg·kg-1的加標質量濃度區間內，烯啶蟲胺、氯噻啉這兩類藥劑的回收率可以達到50.8%～108.9%，相對偏差數值RSD ＜14%，這種檢測辦法對于分析果蔬產品中煙堿類農藥的含量具有非常顯著的效果。蘭珊珊等[4]將實驗用的材料用乙腈提取，運用氨基小柱凈化處理，反向固定相C18柱分開，測定波長為275 nm，烯啶蟲胺、氯噻啉在0.2 ～10.0 mg·L-1質量濃度區間內線性關系較好，并且這兩類藥劑的回收率可以達到80.1%～103.7%，相對偏差數值RSD 為0.17%～7.80%。對這種檢測方式進行分析與研究，可以得到該檢測辦法具有檢測時間短、精確度高、重現性良好等優點，比較適合在大規模的樣品檢測中使用。

3 高效液相色譜法對氟草煙農藥檢測

氟草煙是隨著科學技術的進步而出現的新型農藥，該藥劑本身具有胃毒、觸殺以及少量的內消化功能，在世界上的果蔬種植中應用非常廣泛，占據了重要的地位。隨著人們生活水平以及生活質量的提高，對農藥殘留的檢測標準也越來越齊全，前些年，法國、英國等國家制定了果蔬產品中氟草煙農藥殘留量的制度標準，明確要求對氟草煙農藥的檢測方法采用氣相色譜法和氣相色譜-質譜法，這兩種類型的檢測都要進行甲酯化衍生步驟，這就要求在進行酯化期間需要嚴格控制過程的時間和溫度，操作步驟難度大，對設備儀器和技術要求較高；若運用高效液相色譜法對氟草煙農藥進行檢測具有簡潔、精準的優勢。

房超等[5]將實驗樣品通過丙酮振蕩提取，添加適量的酸、堿溶液調整試劑中的pH 值濃度，促進實驗物質實現凈化與剝離，再向其中加入石油醚清除雜質，通過萃取的方式獲得二氯甲烷液體，并將該液體運用高效液相色譜法進行檢測。對檢測結果進行分析可以得知，在果蔬產品中加入0.05 ～0.20 mg·kg-1氟草煙，回收率可以達到73.8%～89.5%，相對偏差數值RSD 為1.57%～14.4%。

4 結語

高效液相色譜法是在傳統液相色譜法和氣相色譜法的原理上進行整合、改進的新型檢測方法，具有適用范圍廣、檢測精度高、檢驗時間短等優點，在果蔬農藥殘留檢驗中占據著非常重要的地位。從氨基甲酸酯類、煙堿類以及氟蟲腈農藥檢測實驗可以得出，高效液相色譜法是一種適用性廣泛、操作性好的檢測方法。