肖兆愛
(江蘇省建湖縣疾病預防控制中心,江蘇 建湖 224700)
沙門氏菌是一種病原體,不僅能夠引發疾病還會使食物受到污染,是人類食物中毒的重要原因之一[1],為了能夠有效找到沙門氏菌的檢驗、分離、鑒定技術,我院對其進行了不斷的研究,因此,本文主要針對在不同培養基中對沙門氏菌檢出效果進行分析。研究如下。
1.1 一般資料 在2013年6月1日-2018年6月1日期間,選取500例病毒樣本,分布采用SS、HE、XLD三種培養基,在相同溫度(37oC)和相同時間(24 h)下分析沙門氏菌的檢出效果。SS培養基的主要原料為:牛肉膏、脙胨、三號膽鹽、瓊脂、乳糖、檸檬酸鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鐵溶液、中性紅溶液、煌綠溶液,加熱溶化該培養基,備用。HE培養基的主要原料為:牛肉膏、蛋白胨、乳糖、氯化鈉、瓊脂、酸性復紅、去氧膽酸鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鐵銨,加熱溶化該培養基,備用。XLD培養基的主要原料為:酵母浸粉、氯化鈉、乳糖、苯酚紅、去氧膽酸鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鐵銨、瓊脂、苯酚紅,加熱溶化該培養基,備用。
1.2 方法 制作相關的培養基,在CB4789.4-2010標準下進行相關的培養操作和鑒定。首先用緩沖蛋白胨水BPW將5支無菌棉簽進行潤濕,涂抹在每片病毒上,并將處理后的病毒樣本放入BPW增菌液中,在37oC對病毒樣本進行恒溫培養6 h,然后加入SC、TTB兩種增菌液,在同一溫度下繼續培養18 h-24 h,然后將樣本分別放入SS、HE、XLD培養基中,37oC下恒溫培養24 h。觀察沙門氏菌的檢出效果。
1.3 觀察指標 觀察三種培養基出現的現象,一般為無色的透明菌落,若有黑色中心的菌落就為沙門氏菌陽性,通過采用沙門氏菌鑒定法,對沙門氏菌的陽性和假陰性進行鑒定[2]。
1.4 統計學方法 采用SPSS 17.0分析數據,計數和計量資料比較分別行χ2和t檢驗,P<0.05為有統計學差異。
在本次研究中,一共入選了500份病毒樣本,其中SS培養基的假陽性為5%(25/500)、陽性21.6%(108/500),HE培養基的假陽性為8.8%(44/500)、陽性15.6%(108/500),XLD培養基的假陽性為8.2%(41/500)、陽性10.2%(51/500)。在本次研究中,HE培養基的假陽性率最高,其次是SS培養基,假陽性率最低的是XLD培養基,沙門氏菌檢出率依此為SS>HE>XLD(χ2=9.627, 7.814, 9.054;P=0.005, 0.012, 0.009)。
就目前而言,在檢驗沙門氏菌的過程中,由于沙門氏菌結構與革蘭陰性桿菌相似,且分布較廣、類型較多,導致沙門氏菌分解和鑒定的過程中效果較差。目前在進行沙門氏菌檢驗的時候,最常采用的方法為平板分離培養基,該培養基具有操作簡單等特點,能夠有效節約檢驗材料,且在檢驗過程中能夠有效促進沙門氏菌的生長,提高沙門氏菌的檢驗效果。但是由于沙門氏菌類型較多,同一種培養基在檢測不同類型的沙門氏菌的過程中,檢驗效果有所不同。因此,在實際檢驗過程中需要采用兩種或多種培養基對沙門氏菌進行培養、檢測,防止出現漏檢的情況,從而有效提高沙門氏菌檢出率[3]。其中,SS瓊脂是一種選擇性較強的培養基,主要成分為胨、牛肉膏、氮、碳源外還包括一定的選擇劑、抑制劑以及緩沖劑。HE賀氏菌屬培養基主要內容包括緩沖蛋白胨水(BPW)、四硫磺酸鈉、增菌液以及亞硒酸鹽胱氨酸增菌液等,這些成分能夠使沙門菌和志賀菌有效分離。XLD是一種選擇性培養基,主要用于分離志賀氏菌,也可用于分離沙門氏菌,其成分主要為酵母浸粉,從而提供培養基所必須的氮源、維生素和生長因子。在本次研究中,通過對500份病毒樣本進行檢測,采用SS、HE、XLD三種培養基對其進行培養以后,可以發現SS培養基的檢出率最高,假陽性最低,另外,SS的抑制效果要大于HE、XLD,因此,SS培養基由于具有良好的檢出效果。
綜上所述,針對在不同培養基中沙門氏菌檢出效果進行分析后,SS的抑制效果大于HE、XLD,且HE、XLD的差異不大,沙門氏菌檢出率依此為SS、HE、XLD,在檢測沙門氏菌的時候,可優先采用SS培養基。