醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有關物質的測定

朱劍鋒

【摘要】目的 研究測定醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑相關物質的方法。方法 應用高效液相色譜法（HPLC）測定，色譜柱為Venusil ASBC18，流動相A是甲醇-0.077醋酸銨溶液（20∶80，v/v，PH值調節到4.5），相B是甲醇-乙腈（40∶60，v/v），梯度洗脫的流速為1.0 ml/min，檢測波長是225 nm，溫度為35℃，進樣量是10 μl。結果 硝酸益康唑與其他雜志分離度較好，在0.2～100.0 μg/ml濃度范圍內硝酸益康唑的峰面積和濃度間有良好的線性關系，回歸方程為：y=15.6295x+4.5920（r=0.99997）。結論 應用HPLC測定醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有關物質，簡單有效，應用價值顯著。

【關鍵詞】硝酸益康唑；HPLC；醋酸曲安奈德益康唑乳膏；應用效果

【中圖分類號】R927.2 【文獻標識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2017.26..01

醋酸曲安奈德益康唑乳膏是臨床廣泛治療真菌所致皮膚病的一種藥物，具有止癢、抗過敏、抗炎和抗真菌的效果，該藥物的主要物質有硝酸益康唑、曲安西龍和其他3個單個未知物質。為了提高該藥物的治療，對醋酸曲安奈德益康唑乳膏中的有關物質進行測定非常重要。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

儀器：德國諾爾的高效液相色譜儀，型號為KNAUER S-2500；北京普析的紫外-可見分光光度計，型號為

TU-1810；分析天平，型號為Acculab ALC-110.4；鞏義市英峪予華儀器廠的水浴鍋；乙腈；甲醇；色譜柱。

試藥：武漢諾安藥業有限公司生產的醋酸曲安奈德益康唑乳膏；自制的空白敷料樣品，不含有硝酸益康唑物質，其他成分均與樣品一樣；江蘇恒瑞醫藥股份有限公司的醋酸曲安奈德益康唑乳膏；中國食品藥品檢定研究院所提供的硝酸益康唑對照品；由歐洲藥典委員會提供的硝酸益康唑系統適用性的對照樣品；硝酸益康唑雜志的A、B、C對照品，乙腈、甲醇為色譜純，其他作為分析純。

1.2 方法

應用高效液相色譜法（HPLC）測定，色譜柱為Venusil ASBC18，流動相A是甲醇-0.077醋酸銨溶液（20∶80，v/v，PH值調節到4.5），相B是甲醇-乙腈（40∶60，v/v），梯度洗脫的流速為1.0 ml/min，檢測波長是225 nm，溫度為35℃，進樣量是10 μl。

溶液制備：包含樣品溶液、對照品溶液、空白敷料對照溶液。樣品溶液制備，將2.5 g的醋酸曲安奈德益康唑乳膏置于燒杯中，并加入15 ml的甲醇，在80攝氏度水浴中進行2 min加熱，然后將其移入25 ml量瓶中，充分搖勻，冷卻后進行過濾，將續綠葉放置至常溫備用；對照品溶液制備，將10 mg硝酸益康唑置入100 ml量瓶中，加入甲醛讓其稀釋、搖勻后作為對照品儲備液待用；將適量硝酸益康唑系統適用性對照品用甲醛稀釋為濃度1 mg/ml；分別取10 mgA、B、C對照品用甲醛稀釋為濃度為10 ug/ml，作為對照品溶液。

完成溶液制備后進行專屬性考察和破壞試驗，破壞試驗又包含酸破壞試驗、堿破壞試驗、光破壞試驗、熱破壞試驗以及氧化破壞試驗、精密度試驗、樣品溶液穩定型試驗、定量限以及檢測限研究、重復性試驗和線性關系試驗。

2 結 果

硝酸益康唑與其他雜志分離度較好，在0.2～100.0 μg/ml

濃度范圍內硝酸益康唑的峰面積和濃度間有良好的線性關系，回歸方程為：y=15.6295x+4.5920（r=0.99997）。

3 討 論

在測定醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有關物質成本中應注意以下幾點：（1）檢測波長的選擇，由于醋酸曲安奈德和硝酸益康唑在最大吸收波長方面存在差異，為了更精準的測定雜質種類與控制雜質限度，應根據原料藥項下的相關物質進行檢測。硝酸益康唑原料藥的檢測波長為225 nm，并將2250 nm作為檢測波長；（2）雜質相對保留時間，用硝酸益康唑系統適用性對照品溶液以及A、B、C雜質對照品溶液根據色譜條件，分別進樣2針，結果雜質A的相對保留時間為0.3，雜質B的相對保留時間為0.7，雜質C的相對保留時間為0.9；（3）雜質限度，對比中國藥典標準與歐洲藥典標準中硝酸益康唑原料藥的檢測方法，在雜質限度控制方面歐洲藥典更佳嚴格，對雜質A、雜質B和雜質C分別制定了限度。除此之外，歐洲藥典與中國藥典相比較，對未知的單雜質和總雜質的限度標準更加嚴格。此次研究，通過專屬性考察和破壞試驗，破壞試驗又包含酸破壞試驗、堿破壞試驗、光破壞試驗、熱破壞試驗以及氧化破壞試驗、精密度試驗、樣品溶液穩定型試驗、定量限以及檢測限研究、重復性試驗和線性關系試驗等，最終得出硝酸益康唑與其他雜志分離度較好，在0.2～100.0 μg/ml濃度范圍內硝酸益康唑的峰面積和濃度間有良好的線性關系，回歸方程為：y=15.6295x+4.5920（r=0.99997）。

綜上所述，應用HPLC測定醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有關物質，簡單有效，應用價值顯著。

參考文獻

[1] 齊憲榮，劉海燕，劉明輝，等.RP-HPLC測定硝酸益康唑脂質體凝膠中硝酸益康唑的含量[J].中國新藥雜志，2001，10（5）：360-362.

[2] 楊曉莉，席志芳，繩金房，等.反相離子對高效液相色譜梯度洗脫測定復方硝酸益康唑乳膏含量[J].中國抗生素雜志，2004，29（7）：403-405.

本文編輯：吳宏艷endprint