豬弓形體抗體膠體金快速檢測(cè)法的應(yīng)用

徐晶晶，蒲敬偉

（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第十二師畜牧獸醫(yī)工作站，新疆 烏魯木齊 830009）

豬弓形體病，又稱為弓漿蟲(chóng)病或弓形蟲(chóng)病，是由弓形體感染動(dòng)物和人而引起人畜共患的原蟲(chóng)病。本病以高熱、呼吸及神經(jīng)系統(tǒng)癥狀、豬只死亡和懷孕母豬流產(chǎn)、死胎、胎兒畸形為主要特征。弓形蟲(chóng)可致母豬流產(chǎn)和仔豬生長(zhǎng)發(fā)育不良，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。由于豬是弓形蟲(chóng)重要的中間宿主，通過(guò)攝食未煮熟的含包囊的豬肉制品可使人感染弓形蟲(chóng)病，從而嚴(yán)重影響豬肉品質(zhì)并威脅人類的身體健康。應(yīng)用弓形體膠體金快速檢測(cè)卡操作簡(jiǎn)單，敏感性和特異性較高，結(jié)果判定直觀，對(duì)操作人員要求不高，適合應(yīng)用于養(yǎng)殖場(chǎng)、牧區(qū)等不具備實(shí)驗(yàn)室條件的基層單位使用。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 血清樣品 對(duì)來(lái)源于不同養(yǎng)殖場(chǎng)的豬全血樣本150份，通過(guò)直接涂片，姬姆薩染色鏡檢，以看到新月形滋養(yǎng)體即可初步判為陽(yáng)性，結(jié)果檢出陽(yáng)性樣本13份。全部全血樣本分離出血清后低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2 檢測(cè)試劑 弓形體抗體膠體金檢測(cè)試劑盒（批號(hào)20170601），由深圳市綠詩(shī)源生物技術(shù)有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)方法和結(jié)果判定

先將檢測(cè)卡和待檢血清恢復(fù)至室溫。取出檢測(cè)卡，用吸管吸取待檢血清，滴2～3滴到加樣孔；也可用移液器加70 μL血清到加樣孔。室溫條件下15 min內(nèi)判定結(jié)果。若質(zhì)控（C）線、檢測(cè)（T）線均顯色，表示血清樣本中含有弓形體抗體；若檢測(cè)（T）線不顯色，僅質(zhì)控（C）線顯色，則表示血清樣本中不含有弓形體抗體或其含量低于檢測(cè)域值；若未出現(xiàn)質(zhì)控（C）線，表明操作不正確或檢測(cè)卡已失效。

2 結(jié)果

應(yīng)用膠體金檢測(cè)卡對(duì)150份豬血清樣本進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果詳見(jiàn)表1。

表1 應(yīng)用膠體金法與直接涂片法檢測(cè)豬血清樣品的陽(yáng)性率比較

結(jié)果顯示，直接涂片法檢出陽(yáng)性樣本13份，陽(yáng)性率8.7%；膠體金法檢測(cè)出陽(yáng)性樣本15份，陽(yáng)性率10%。膠體金法與直接涂片法的符合率為98.7%。

3 分析與討論

（1）根據(jù)《豬弓形蟲(chóng)病防治技術(shù)規(guī)程》（DB13 T 555—2004）中關(guān)于豬弓形體病的診斷和判定方法，直接涂片法是判定陽(yáng)性動(dòng)物的主要標(biāo)準(zhǔn)之一，但此法由于人為因素易造成漏檢情況的出現(xiàn)。而膠體金法作為新型快速診斷方法，可以作為直接涂片法的補(bǔ)充和驗(yàn)證。

（2）根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)用膠體金法較直接涂片法陽(yáng)性率略高，說(shuō)明前者的敏感性大于后者。在實(shí)際應(yīng)用中，直接涂片法所需的試驗(yàn)器材較多，步驟繁瑣，對(duì)檢測(cè)人員要求較高，檢出率較低；而膠體金檢測(cè)卡操作簡(jiǎn)易高效，準(zhǔn)確性較高，非專業(yè)人員也可操作，同時(shí)具有良好的特異性、敏感性、重復(fù)性和穩(wěn)定性，適用于弓形體病早期檢測(cè)和診斷，特別適合在基層推廣應(yīng)用。

（3）膠體金法不僅限于檢測(cè)血清，還可以對(duì)當(dāng)天采集的抗凝全血進(jìn)行檢測(cè)。在養(yǎng)殖場(chǎng)和牧區(qū)等不具備離心條件的場(chǎng)所可以應(yīng)用，該方法將在新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第十二師逐步推廣。