咽拭子肺炎支原體-DNA檢測用于診斷兒童肺炎支原體肺炎的應用價值

楊芬蓮 羅家怡 溫海鵬 陳惠敏

（1高明區人民醫院檢驗科 廣東 佛山 528500）

（2高明區人民醫院輸血科 廣東 佛山 528500）

肺炎支原體是導致小兒出現急性呼吸道感染的主要病原體，對患兒的身體健康造成較大威脅。支原體肺炎的早期表現多不典型，臨床診斷難度較大，往往需要進行實驗室檢驗，其中咽拭子肺炎支原體-DNA檢測是近年來較為常用的方法[1]。本研究以本院2015年1月-2017年2月收治的120例兒童肺炎支原體肺炎患兒為研究對象，探析咽拭子肺炎支原體-DNA檢測用于診斷兒童肺炎支原體肺炎的應用價值，現將結果作如下報道。

1.資料與方法

1.1 一般資料

將本院2015年1月-2017年2月間收治的120例兒童肺炎支原體肺炎患兒作為研究對象，120例患兒均實施咽拭子肺炎支原體-DNA檢測以及肺炎支原體-IgM檢測，男66例，女54例，年齡6個月～14歲（5.7±1.2）歲；33例年齡＜1歲，29例1～2歲，30例3～5歲，28例6-14歲。

1.2 方法

咽拭子肺炎支原體-DNA檢測方法：于清晨患兒尚未進行口腔清潔、未進食、未飲水前（對于哺乳期的嬰兒要停止納奶2h以上）進行檢驗，使用無菌拭子對患兒咽部的分泌物進行采集并送檢。試劑盒均由中山大學達安基因股份有限公司提供，具體檢驗操作方法均要依據相關說明書嚴格進行：向采集分泌物中加入4倍體積的滅菌生理鹽水，震蕩2～3次，混勻后吸取1.5ml置入離心管中進行離心處理，轉速控制為12000r/min，處理時間為5min，離心完成后將上清液去除，并向沉淀中加入50μL的DNA提取液混勻后進行100℃恒溫處理，時間控制在10min左右，進行離心處理，轉速與時間同之前相同，取2μl進行RCR擴增。

肺炎支原體-IgM檢測方法：取患兒靜脈血2～3ml，以37℃保存1h，進行低速離心處理，離心時間為10min，將血清分離后進行檢驗。使用低效價顆粒凝集實驗試劑盒，依據說明書進行操作，均設陰性、陽性對照，以滴度≥1∶80判定為陽性。

1.3 統計學處理

采用SPSS 19.0軟件進行數據處理，計數資料（%）行χ2檢驗，顯著性水平為P＜0.05。

2.結果

2.1 咽拭子肺炎支原體-DNA檢測組檢出陽性率87.5%（105/120）明顯高于肺炎支原體-IgM檢測組71.7%（86/120），（P＜0.05）。

2.2 咽拭子肺炎支原體-DNA檢測不同年齡組中3～5歲組患兒的陽性檢出率最高，見表1。

表1 咽拭子肺炎支原體-DNA檢測不同年齡組支原體肺炎檢出陽性率的比較

3.討論

支原體肺炎患兒的臨床表現多不具有典型性，臨床診斷多需要進行實驗室檢驗，目前臨床應用較多的檢驗方法有支原體分離培養、特異性抗體檢驗等等，其中支原體分離培養的時間較長，在常規檢驗中應用并不十分廣泛；冷凝集檢驗方法雖較為簡便，但敏感性以及特異性相對較差，其陽性檢驗結果也可能是由流行性感冒、傳染性單核細胞增多癥等引發[2-3]。近年來隨著臨床醫療水平的不斷提高，咽拭子肺炎支原體-DNA檢測得以在臨床推廣應用，該種檢驗方法利用熒光定量PCR技術，不僅有效減少可擴增產物污染風險，提高檢驗特異性，而且也不會受到患兒年齡、病程以及用藥情況的影響，臨床具有較高的診斷準確性[3]。

本研究中，對120例兒童肺炎支原體肺炎患兒實施了咽拭子肺炎支原體-DNA檢測以及肺炎支原體-IgM檢測，結果顯示前者的檢驗陽性率顯著高于后者，另外對不同年齡段患兒咽拭子肺炎支原體-DNA檢測，結果可發現3～5歲組患兒的陽性檢出率最高，其次為6～14歲組。究其原因，可能與學齡前兒童在學校集體生活以及其自身免疫系統尚未發育完全等因素有關，6～14歲組患兒陽性率低于3～5歲組，可能是因為該年齡組患兒年齡增長，免疫力有所提高。

綜上所述，應用咽拭子肺炎支原體-DNA檢測診斷兒童肺炎支原體肺炎，準確率較高，具有較好的應用價值，可作為早期診斷小兒肺炎支原體肺炎的方法。

【參考資料】

[1]楊麗娟,許美善. 咽拭子肺炎支原體-DNA檢測診斷兒童肺炎支原體肺炎的價值[J]. 中國婦幼保健,2017,32(8):1671-1673.

[2]劉香花,穆義英,趙玥,等.肺炎支原體DNA檢測對兒童肺炎的診斷價值[J]. 中國衛生檢驗雜志,2016,26(22):3248-3249.

[3]楊文青,呂曉麗,李銳成,等.實時熒光定量PCR檢測肺炎支原體DNA在小兒肺炎診斷中的應用價值[J].國際檢驗醫學雜志，2014,35(4):416-418.