怒江流域滇橄欖優樹選擇及優樹無性系早期測定

龔發萍，石卓功，黃佳聰，楊晏平，陳世祥

（1.西南林業大學，云南 昆明 650224；2.保山市林業技術推廣總站，云南 保山 678000；3.保山市隆陽區東祥林產品有限公司，云南 保山 678000）

滇橄欖Phyllanthus emblica Linn.又名余甘子，為大戟科葉下珠屬落葉喬木，分布于中國南部、西南部省區和印度、東南亞國家及中南半島[1]，野生資源以云南省最為豐富[2-3]。滇橄欖為生態經濟兼用型樹種。其果實藥食同源，風味獨特，具有良好的食用、保健及藥用價值，食用時先酸澀而后甘甜爽口，《云南省藥品標準》、《藏藥標準》及《中國藥典》中均有收載，具有清熱利咽，潤肺化痰，健胃消食，收斂止瀉，護肝解酒毒，抗衰老，抗腫瘤，抗菌消炎，抗氧化，降脂減肥，降血壓及護膚養顏等功用[4-6]，商品利用價值較高。同時，滇橄欖具有經濟壽命長，抗旱耐瘠薄，生長快結果早，豐產穩產，綠化效果好等優良性狀，適宜干熱河谷地區造林綠化[7-9]。

國外滇橄欖育種研究工作早于國內。1901年前后，美國、澳大利亞和古巴等對滇橄欖進行引種；印度對滇橄欖的研究比較深入，已篩選培育了一批良種在生產上推廣[10]。1980年以來，中國林業科學院資源昆蟲研究所及亞熱帶林業研究所、福建省農業科學院、云南省保山市林業技術推廣總站等單位在滇橄欖品種選育方面做了大量的研究工作；姚小華等[11]對滇橄欖的生物學特性進行了初步研究，李昆等[12]對野生滇橄欖果實類型及其分布特點進行了研究，吳建花等[8]、陳進等[13]對滇橄欖自然居群果實經濟性狀變異進行了研究，龔發萍等[7]對云南省主要栽培的高黎貢山糯滇橄欖優良無性系（云R-SC-PE-069-2013）進行了研究報道，陳敏等[4]等對福建、廣東、廣西等省區廣泛種植的粉甘、人面子、赤白、棗甘等進行了報道。尚未見較為系統的滇橄欖優樹選擇及其優樹無性系測定方面的研究報道。截至2016年，怒江流域干熱河谷地區滇橄欖栽培面積1.4萬hm2，滇中、滇西干熱河谷地區群眾種植滇橄欖的熱情高漲，滇橄欖產業已經成為該地區的新興農業產業，并且滇橄欖成為造林成效明顯的樹種之一。為此，自2011年9月筆者開展怒江流域滇橄欖優樹選擇及其無性系測定，以期為滇橄欖種質資源評價、良種選育及其產業可持續發展提供參考。

1 材料與方法

1.1 優樹選擇地域與標準

1.1.1 優樹選擇的地域

滇橄欖優樹選擇在怒江流域滇橄欖集中分布的保山市隆陽區、龍陵縣、昌寧縣、施甸縣進行。該區域海拔535～1 700 m，年均氣溫14.8～25.6 ℃，年平均降雨量700～1 100 mm，具有明顯的“冬無嚴寒，夏有酷暑，雨熱同季，干濕分明”的低緯山地季風氣候特點。

1.1.2 優樹選擇的標準

植株生長、結果正常，連續3 a平均冠影鮮果產量大于等于2 kg/m2，單果質量大于等于10 g、可食率大于等于80%、可溶性固形物含量大于等于5%、維生素C含量大于等于2.2 mg/g，酸澀味輕、口感好、酥脆；果實特大（平均質量大于等于18 g）或口感較好的單株可降低選擇指標。為便于產業化開發，以果大、酥脆口感好、維生素C及可溶性固形物含量較高作為主要考量指標。

1.2 優樹選擇方法與步驟

1.2.1 初 選

2011年6—9月，將選優標準下發到涉及區域鄉林業站，并在調查區域鄉、村集市張貼以獎代補宣傳頁（40個果質量≥1 kg、50個果質量≥1 kg、55個果質量≥1 kg、65個果質量≥1 kg的植株分別獎勵3 000、2 000、600及300元），發動群眾報優。根據報優情況，于10月下旬—翌年1月果實成熟期，分單株實地調查平均單果質量、口感、實測產量，合格者確定為備選株，并逐項調查填寫優樹調查表，用紅色油漆在其樹干上記號、GPS定點，以備查找。

1.2.2 復 選

分單株從備選株上采集果實樣品（約100果/株），裝入專用樣品袋并編號，帶回室內后及時復測單果質量、口感，檢測果實橫徑、縱徑、核質量及果肉可溶性固形物含量，計算可食率。檢測及計算結果與選優標準對照，達標者即確定為復選株。

1.2.3 決 選

對確定的復選株，根據其成熟期早晚，于2012年10月—2013年1月及2013年10月—2014年1月果實充分成熟時全株實測產量，計算連續3 a每平方米冠影鮮果平均產量，符合標準者即決選為優樹。

1.3 優樹指標測定與計算

以單株為單位，剔除樣品果實中畸形、病蟲害等不正常果后充分混合均勻，隨機抽取30粒，逐粒測定各項經濟性狀指標。利用電子天平稱取單果質量（精度0.1 g）；剔除每粒果實的果肉后，稱取核質量（精度0.1 g），計算可食率；利用數顯糖度計測量每粒果實的果肉可溶性固形物含量（精度0.1%）；總糖、總酸、粗纖維、維生素C含量分別按照GB/T 5009.7-2008、GB/T 12456-2008、GB/T 5009.10-2003及GB/T 6195-1986規定的方法進行測定。

可食率＝[(單果質量－核質量)/單果質量]×100%。

1.4 優樹無性系測定

1.4.1 試驗地概況

試驗地位于隆陽區潞江鎮勐柳村鐵場坡（東經 98°50′49″、北緯 25°07′23″、海拔 810 m）。該地屬山地南亞熱帶季風氣候，年均氣溫21.3 ℃，最熱月7月平均氣溫29.3 ℃，最冷月1月平均氣溫13.2 ℃，極端最高氣溫40.4 ℃，極端最低氣溫0.2 ℃；干濕季分明，雨熱同季，年均降雨量845.5 mm，6—9月為雨季，降雨量占全年的72.5%；年日照時數2 975 h，無霜期340 d以上。坡度17°，土壤為紅壤，土層厚度大于1.0 m，前茬種植作物為甘蔗。

1.4.2 試驗設計

8處理、6株條狀小區、5重復隨機區組試驗設計，株行距3 m×4 m，建立優樹無性系測定試驗林0.32 hm2。測定林采用相同的栽培技術。

1.4.3 栽培技術

2013年3—4月，溝槽狀整地，規格為寬、深各60 cm。整地結束30 d后，按每米溝槽施腐熟農家肥10 kg、磷肥2 kg，與表層熟土混勻后回填，邊回土邊踏實，回土高度與地面持平。7月種植地徑大于等于0.3 cm且苗高大于等于25 cm的當年生容器播種苗，種植后澆足定根水。2014年2月上旬，按試驗設計，以決選優樹1年生枝條作為接穗，采用切接方法高接在上述實生滇橄欖砧木上，嫁接成活后適時解綁。每年3月上旬，株施尿素0.2～1.5 kg；5月下旬—6月中旬，每株施磷肥0.4～2.5 kg，鉀肥0.10～0.25 kg，尿素0.1～0.5 kg；10月每株施有機肥5～20 kg、磷肥0.5～3.0 kg。6月、10月各除草1次。以變則主干形為主要樹型，每株選留5～12 個主枝，各主枝成螺旋狀均勻分布在主干不同方向。可全年進行整形修剪，以1—2月為主；修剪主要采用摘心、短截、回縮、疏枝、除萌、曲枝、拉枝及長放等方法。適時防治病蟲害。

1.5 物候期觀測

于2015年、2016年對無性系測定林各優樹無性系的萌芽期、展葉期、花期、果實成熟期、落葉期等主要物候期進行觀測記錄，取2 a平均值。物候期均指其起始日，其中萌芽期為有5%的芽膨大且現紅綠色脫落枝原始體的日期，展葉期為脫落枝伸長生長且脫落枝基部有5%的葉片展開的日期，雌花期為有5%雌花的3個柱頭向外側開張并具光澤分泌物的日期，雄花期為脫落枝伸長生長且有5%單花開放的日期，果實成熟期為果實生理成熟率達20%的日期，落葉期為葉片自然脫落達20%或脫落枝自然脫落達5%的日期。

1.6 生長結果數據觀測與處理

在2015年各優樹無性系果實成熟期，實測單株產量，12月觀測樹高（精度0.1 m）、地徑（精度0.1 cm）、冠幅（精度0.1 m2）。

應用SPSS 20.0軟件GLM 模型，分處理和單株計算2015年各無性系樹高、地徑、冠幅及果實產量的平均值和標準誤，進行方差分析與Duncan多重比較；采用Pearson系數，對不同性狀間的相關性進行分析。

2 結果與分析

2.1 選優結果

共初選確定備選株20株，復選確定復選株11株，再經連續2 a實測果實產量決選優樹8株。決選8株優樹地理位置、立地氣候及其概況詳見表1。

表1 決選滇橄欖優良單株概況、地理位置及立地氣候條件?Table1 Basic information, location and habitat meteorological conditions of P. emblica plus trees in final election

由表1可知：優樹多來自海拔1 220～1 330 m、年均氣溫18.6～20.7 ℃之間的半干熱地區。優樹多為喬木狀（僅P3表現為灌木狀），優勢木。

2.2 決選優樹果實經濟性狀

決選優樹果實的經濟性狀詳見表2。

由表2可知：8株優樹果實經濟性狀較為優良，平均單果質量14.9 g，可食率86.71%，果肉可溶性固形物含量16.81%，總糖含量2.38%，總酸含量3.64%，粗纖維含量2.89%，維生素C含量4.90 mg/g；3 a平均單位冠影面積果實產量3.16 kg/m2。其中，平均單果質量15 g以上的大果型優樹5株（P3、P4、P6、高、亮），皆分布在海拔1 220～1 330 m、年均氣溫18.6～20.7 ℃之間的半干熱地區。

表2 決選8個滇橄欖優良單株果實經濟性狀Table2 Fruit economic characteristics of the eight P. emblica plus trees in final election

同時，選擇的8株優樹平均單果質量變動幅度9.8～17.5 g，果肉可溶性固形物含量變動幅度6.8%～28.1%，可食率變動幅度83.4%～90.8%，連續3 a單位冠影面積產果量變動幅度2.2～5.1 kg/m2，粗纖維含量變動幅度1.76%～3.92%，總糖含量變動幅度1.28%～6.80%，總酸含量變動幅度0.65%～8.71%，維生素C和口感各不相同，說明不同優樹間果實性狀、產量及口感等差異性仍然較大，有必要進一步開展無性系測定、性狀觀測與評價。

2.3 優樹無性系主要物候期

8個滇橄欖優樹無性系在怒江流域海拔810 m地區的主要物候期見表3。

由表3可知，8個滇橄欖優樹無性系的芽萌發期基本一致，為2月中旬；展葉期基本一致，為3月上中旬；花期一致性亦較高，為3月下旬至4月上旬，多數情況下，雌花期較雄花期早1～2 d；果實成熟期相差較大，達80 d左右。以P2果實成熟期最早，為9月20日左右；以“亮”最晚，為12月上旬成熟；多數無性系的果實成熟期為10月中旬。落葉期相差約20 d，以P1、P2、P5、P6這4個無性系落葉較早，為1月中下旬，以P3、“亮”這2個無性系落葉最晚，為2月上旬。栽培條件下，滇橄欖具有明顯的邊落葉邊萌芽特點。

表3 決選8個滇橄欖優樹無性系的主要物候期?Table3 Main phenological periods of the eight P. emblica plus tree clones in final election

2.4 優樹無性系早期生長情況

8個優樹無性系各指標的方差分析結果（見表4）表明：嫁接第2年（2015年）8個滇橄欖優樹無性系間的樹高、地徑、冠幅生長差異達極顯著水平（P＜0.01）。嫁接第2年，8個優樹無性系的平均樹高2.6 m、地徑6.6 cm、冠幅8.2 m2（見表5）；樹高生長值以P6最大，為2.83 m，以P5最低，為2.22 m，P5高生長與其他7個無性系間差異達顯著水平（P＜0.05）；地徑生長值以P2最大，為7.34 cm，以P4最低，為5.7 cm，P4地徑生長與其他7個無性系間差異達顯著水平（P＜0.05）；冠幅值以“高”最大，為9.15 m2，以P5最低，為6.0 m2，P5冠幅生長與其他7個無性系間差異達顯著水平（P＜0.05）（見表5）。

表4 決選8個滇橄欖優樹無性系生長和產量指標的方差分析Table4 Variance analysis of growth and yield indexes among the eight P. emblica plus tree clones in final election

表5 決選8個滇橄欖優樹無性系生長和產量指標的多重比較分析及變異系數（平均值±標準誤）?Table5 Multiple comparisons analysis and variation coefficients of growth and yield indexes of the eight P. emblica plus-tree clones in final election (mean±standard error)

2.5 優樹無性系早期結實情況

方差分析結果（見表4）表明：嫁接第2年（2015年）8個滇橄欖優樹無性系間的果實產量差異達極顯著水平（P＜0.01）。嫁接第2年8個優樹無性系平均單株果實產量為877 g（見表5），平均單株果實產量以P2為最高（5 300 g），P2單株果實產量與P1、P3、P4、P5、P6、“高”、“亮”7個無性系單株間果實產量差異達顯著水平（P＜0.05），P1、P3、P4、P5、P6、“高”、“亮”7個無性系單株間單株果實產量差異不顯著。其中，P5少量開花未結實，P1、P3、 P6單株果實產量在10～20 g之間，P4、“高”和“亮”單株果實產量在220～540 g之間（見表5）。說明除P5外，其他7個滇橄欖優樹無性系具有早期（嫁接第2年）結實性，尤以P2早實豐產性最好。

2.6 優樹無性系生長、結實性狀間的相關性

為探討參試8個滇橄欖優樹無性系生長與結實性狀間的相互影響，分析其樹高、地徑、冠幅與結實量之間的相關性（見表6）。結果表明：8個滇橄欖優樹無性系早期樹高、地徑、冠幅三者間呈極顯著正相關 （P＜0.01）；單株結實量與地徑極顯著正相關（P＜0.01），與冠幅顯著相關（P＜0.05），與樹高生長的相關性不顯著（P≥0.05）。

3 結論與討論

通過制定優樹選擇標準，按照初選、復選、決選的工作步驟，初選優樹20株，復選11株，決選8株。決選的8株優樹中，平均單果質量15 g以上的大果型優株5株，皆分布在海拔1 220～1 330 m、年均氣溫18.6～20.7 ℃的半干熱河谷區，這與吳建花等[8]開展滇西地區滇橄欖自然居群果實經濟性狀變異研究結論一致，說明怒江流域海拔1 300 m左右的中海拔半干熱河谷地區有利于培育大果型滇橄欖，在產業基地規劃建設中應重視這一點并加以利用。

表6 決選8個滇橄欖優樹無性系生長結實性狀間的相關性?Table6 Correlationship of growth and yield characteristics of the eight P. emblica plus-tree clones in final election

優樹選擇結果表明，廣泛宣傳、以獎代補、群眾報優是發現資源量巨大、分布范圍較廣的滇橄欖優良變異單株快速且有效的方法之一；怒江流域具有分布廣泛而保存完好的滇橄欖原生林分[14]，在其長期異花授粉雜交繁衍過程中產生和保存了大量的遺傳變異[15]，調查、發掘和利用這些變異，是對滇橄欖進行遺傳改良、選育良種的捷徑。

優樹無性系對保存優樹性狀具有較高的可靠性[16-17]。決選的8株優樹在單果質量、可溶性固形物含量、可食率、產量等方面存在的明顯遺傳差異，是建設種質資源收集圃，進一步開展種質評價、選育良種的遺傳基礎；同時，優樹無性系收集為長期保存優樹種質，系統開展其營養生長及生殖生長節律與果實經濟性狀觀測評價，及雜交育種工作創造了條件。

8個滇橄欖優樹無性系早期（嫁接第2年）樹高、地徑、冠幅三者間呈極顯著正相關（P＜0.01）；單株結實量與地徑呈極顯著正相關（P＜0.01），與冠幅顯著相關（P＜0.05），與樹高生長的相關性不顯著（P≥0.05）；研究結果與王明懷等[18]對油茶無性系及楊艷等[19]對黃梔子生長結果規律的研究結果一致。說明促進主干增粗及增加冠幅是滇橄欖栽培早結實、多結實的關鍵因素之一。

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