麥冬化學成分研究

曠湘楠 ，朱 娜 ，劉時喬

（1.河北中醫學院，河北 石家莊 050200； 2.河北省石家莊市食品藥品檢驗中心，河北 石家莊 050031）

麥冬為百合科沿階草屬植物麥冬 Ophiopogon japonicus（L.f） Ker－ Gawl.的干燥塊根，有養陰生津、潤肺清心功效[1]。麥冬又名麥門冬、沿階草、書帶草、寸冬等，分布于我國南方各地，四川、浙江和貴州是其主要產區[2]，不同產區麥冬中的活性成分略有差異[3]。近年來，學者已對麥冬的化學成分及其活性作了大量研究，發現甾體皂苷、高異黃酮和麥冬多糖為其主要活性成分[4－6]，且麥冬具有耐缺氧、抗心律失常、增強心肌收縮力、抗癌、降血糖等生理活性[7－9]，含有麥冬提取物的參麥注射液、生脈注射液等可用于治療氣陰兩虛之休克、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(簡稱冠心病)、病毒性心肌炎、慢性肺源性心臟病、粒細胞減少癥。本研究中對麥冬的化學成分進行了系統研究，通過各種色譜、波譜等方法分離鑒定了5個化合物（1個苯丙醇苷、1個龍腦苷、1個膽甾醇苷、2個高異黃酮）。現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Waters e2695型分析型高效液相色譜（HPLC）儀（美國Waters有限公司），Waters 2487型雙波長紫外檢測器（波長203 nm，美國Waters有限公司）；YMC ODS－A C18分析型色譜柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm；日本 YMC有限公司）；LC－20A型制備型高效液相色譜儀，SP－20A型示差檢測器（日本 Shimadzu有限公司）；YMC ODS－A C18制備型色譜柱（250 mm ×20 mm，5 μm，250 mm ×10 mm，5 μm；日本 YMC 有限公司）。Brucker AVANCEⅢ 型超導高分辨核磁共振譜儀（600 MHz，德國Brucker公司）；Synapt G2 MS型高分辨質譜儀（美國Waters有限公司）。

1.2 試藥

Sp825大孔吸附樹脂（日本三菱公司）；甲醇、乙腈（美國Fisher公司）均為色譜純；羥丙基葡聚糖凝膠：Sephadex LH －20（美國 Amersham Biosciences公司）；乙醇、甲醇和氯仿（天津永大化工廠）均為分析純；Milli－Q超純水（美國Millipore有限公司）。新鮮麥冬，采自四川綿陽，經河北中醫學院鄭玉光教授鑒定為 Ophiopogon japonicus（Thunb.） Ker－ Gawl，標本保存于河北中醫學院科研中心。

2 方法與結果

2.1 提取與分離

取麥冬干燥塊根10 kg，70%乙醇回流提取，過濾，減壓濃縮至無醇味。浸膏用水混懸，離心，水洗沉淀，得到沉淀部分和水溶液部分。將水溶液上樣至Sp825樹脂柱內。先用蒸餾水洗脫至流出液澄清后，依次用35%，55%，85%乙醇洗脫（均為 5倍柱體積），得到 MD－35%（180 g）、MD － 55% （8 g）、MD － 85%（15 g）三部分。

取MD－35%上樣于Sp825大孔吸附樹脂，分別用水及5%，15%，25%，35%乙醇洗脫，取35%乙醇洗脫流分，用制備型高效液相色譜儀（流動相為35%甲醇）分離，得化合物 1（343.6 mg）。取 MD－55% 上樣至Sp825樹脂，分別用35%，45%，55%乙醇洗脫，取55%乙醇洗脫流分，用制備型高效液相色譜儀（流動相為52%甲醇）分離，得化合物 2（8.9 mg）和化合物 3（16.5 mg）。取 MD－85%上樣于 Sp825樹脂，分別用55%，65%，75%，85%乙醇洗脫，85%乙醇洗脫流分有針晶析出，用羥丙基葡聚糖凝膠Sephadex LH－20（流動相為無水乙醇）分離，得化合物 4（105.3 mg）和化合物 5（98.2 mg）。

2.2 結構鑒定

2.2.1 化合物 1

結構見圖1。白色不定型粉末，易溶于甲醇、乙醇、吡啶、二甲基亞砜（DMSO）。Molish反應呈陽性，紫外燈（254 nm波長）下顯暗棕色。

HR －ESI－MS：m ／z457.169 9[M －H]－，311.090 8[M －H －146]－，149.060 6[M －H －146－162]－，計算得其分子式為C21H30O11，且結構中含有1個六碳糖和1個去氧六碳糖。

1H － NMR（pyridine － d5，600 MHz）：δ，7.07（1H，d，1.8，H － 2），7.57（1H，d，8.4，H － 5），6.72（1H，dd，1.8，8.4，H － 6），5.93（1H，m，H － 8），5.27（1H，d，7.2，glc －H － 1），5.51（1H，brs，rha － H － 1）。

13C － NMR（pyridine － d5， 150 MHz）：δ， 145.1（C －1）， 149.7（C － 2）， 117.5（C － 3）， 137.1（C － 4）， 120.1（C －5）， 121.2（C － 6）， 39.9（C － 7）， 138.2（C － 8），115.6（C －9）， 106.0（glc－ C －1）， 74.9（glc－ C －2），77.6（glc－ C － 3），71.5（glc － C － 4），78.4（glc － C － 5），68.0（glc－ C －6）， 102.6（rha－C －1）， 72.3（rha－C －2）， 72.8（rha－ C － 3）， 74.1（rha－ C － 4）， 69.9（rha－C － 5），18.6（rha － C － 6）。

與文獻[10]對照，確定其與 4－烯丙基 －1，2－苯二酚 1－O－[α－L－吡喃鼠李糖（1→6）]－β－D－吡喃葡萄糖苷（3，4－dihydroxy－allylbenzene 4－O－α－L－rhamnopyranosyl－（1 → 6）－β－D－ glucopyranoside）的核磁數據一致，確定其為該化合物。

2.2.2 化合物 2

結構見圖1。無色針晶，易溶于甲醇、乙醇、吡啶。Molish反應成陽性，紫外燈（254 nm波長）下不顯色。

HR －ESI－MS：m ／z 339.175 9[M ＋Na]＋，317.195 3[M ＋ H]＋，137.139 5[M ＋ H －180]＋，計算得其分子式為C16H28O6，結構中含有1個六碳糖。

1H － NMR （DMSO － d6，600 MHz）：δ，0.85（3H，s，H － 1），0.81（3H，s，H － 9），0.79（3H，s，H － 10），4.11（1H，d，7.8，glc － H － 1）。

13C － NMR（DMSO － d6，150 MHz）：δ，13.7（C － 1），49.1（C － 2）， 26.2（C － 3）， 27.8（C － 4）， 44.3（C － 5），37.1（C － 6）， 84.3（C － 7）， 47.1（C － 8）， 18.6（C － 9），19.6（C －10）， 104.2（glc－C －1）， 73.7（glc－ C － 2），76.8（glc － C －3），70.1（glc － C － 4），76.6（glc－ C － 5），61.1（glc － C －6）。

圖1 化合物1～5結構

與文獻[11]對照，確定其與龍腦7－O－β－D－葡萄糖苷（borneol 7－O－β－D－glucopyranoside）的核磁數據一致，確定其為該化合物。

2.2.3 化合物 3

結構見圖1。白色無定型粉末，易溶于甲醇、吡啶，可溶于乙醇。Lieberman－Burchard反應顯陽性，E試劑顯陰性，Molish反應呈陽性。

HR －ESI－MS：m ／z 765.443 7[M ＋Na]＋，計算得出其分子式為C39H66O13。Positive模式下顯示其碎片離子峰 m ／z：765.443 7[M ＋ Na]＋，743.464 4[M ＋ H]＋，725.457 6[M ＋H －18]＋，707.444 3[M ＋H －18－18]＋，545.385 8[M ＋H －18－18－162]＋，399.324 6[M ＋H －18－18－162－146]＋。質譜可見有 1個六碳糖和 1個去氧六碳糖，且此苷元含有2個游離羥基。

1H － NMR （pyridine － d5，600 MHz）：δ，5.52 （1H，d，2.4，H － 6），1.03（3H，s，H － 18），1.20（3H，s，H － 19），1.15（3H，d，7.2，H － 21），0.92（3H，d，o，H －26），0.91（3H，d，o，H － 27），5.63（1H，brs，glc － H － 1），4.73（1H，d，7.8，rha － H － 1），1.64（3H，d，6.0，rha － H － 6）。

13C － NMR（pyridine － d5，150 MHz）：δ，81.4（C － 1），36.1（C － 2），68.1（C －3），43.8（C －4）， 139.2（C －5），125.1（C － 6），31.6（C － 7），33.5（C － 8），50.9（C －9），42.9（C － 10）， 24.8（C － 11）， 40.6（C － 12），42.3（C －13）， 55.4（C － 14）， 37.2（C － 15）， 82.6（C － 16）， 58.1（C － 17）， 13.9（C － 18）， 14.6（C － 19）， 36.0（C － 20），12.7（C － 21）， 73.2（C － 22）， 33.8（C － 23），36.8（C －24），28.9（C － 25），23.1（C － 26），23.1（C － 27），107.0（glc－ C －1），75.7（glc － C －2），78.8（glc － C － 3），71.8（glc－ C －4），78.2（glc － C －5），63.0（glc － C － 6），97.7（rha－C －1）， 72.9（rha－C －2）， 73.0（rha－C －3）， 73.7（rha－ C － 4），70.7（rha － C － 5），18.7（rha － C －6）。

與文獻[12]對照，確定其與（22S）－cholest－5－ene－1β，3β，16β，22－tetrol 1－O －α － L－rhamnopyranosyl－16－O－β－D－glucopyranoside的核磁數據一致，確定其為該化合物。

2.2.4 化合物 4

結構見圖1。黃色針狀結晶，易溶于氯仿、丙酮、DMSO，可溶于乙醇，微溶于甲醇。三氯化鐵反應呈陽性。紫外燈（254 nm波長）下顯深藍色。

HR －ESI－MS： m ／z 343.122 7[M ＋H]＋，計算得其分子式為C19H18O6。

1H － NMR（pyridine － d5，600 MHz）：δ，4.34（1H，dd，4.2，10.8，H － 2 － 1），3.29（1H，dd，4.2，10.8，H －2 －2），2.99 （1H，m，H － 3），4.14（1H，dd，4.2，13.8，H －9 － 1），2.75（1H，dd，4.2，13.8，H － 9 － 2），6.89（1H，d，1.8，H － 2’），6.86（1H，d，7.8，H － 5’），6.73（1H，dd，1.8， 7.8， H －6’）， 5.97（2H， m， H － [O －CH2 －O]），2.41（3H，s，H － [6 － Me]），2.33（3H，s，H － [8 － Me]），13.03（1H，s，H － [5 － OH]）。

13C － NMR（pyridine － d5，150 MHz）：δ，69.5（C － 2），46.9（C － 3）， 198.5（C － 4）， 160.4（C － 5）， 104.7（C －6）， 164.2（C － 7）， 103.4（C － 8）， 32.7（C － 9）， 158.3（C － 10）， 101.5（C － 11）， 132.7（C － 1＇）， 109.9（C －2＇）， 148.4（C － 3＇）， 146.8（C － 4＇）， 108.7（C － 5＇），122.6（C － 6＇）， 102.3（C － [O － CH2 － O]）， 8.8（C －[6 － Me]），8.5（C － [8 － Me]）。

與文獻[13]對照，確定其與甲基麥冬黃烷酮A（methyophiopogonanone A）的核磁數據一致，確定其為該化合物。

2.2.5 化合物 5

結構見圖1。黃色針狀結晶，易溶于氯仿、丙酮、DMSO，可溶于乙醇，微溶于甲醇。三氯化鐵反應呈陽性。紫外燈（254 nm波長）下顯深藍色。

HR －ESI－MS： m ／z 329.141 0[M －H]－，計算得其分子式為C19H20O5。

1H －NMR（pyridine－ d5， 600 MHz）： δ， 4.33 （1H，dd，4.2，10.8，H － 2 － 1），3.32 （1H，dd，4.2，10.8，H －2 － 2），2.99 （1H，m，H － 3），4.15 （1H，dd，3.6，11.4，H －9－1），2.79 （1H，dd，3.6，11.4，H －9－2），6.96（1H，dd，3.0，9.6，H － 2’），7.23 （1H，d，3.0，H － 3’），7.23 （1H，d，7.8，H － 5’），6.96 （1H，dd，3.0，9.6，H －6’），3.68 （1H，s，H － [O － CH3]），2.42 （3H，s，H － [6 －Me]），2.33 （3H，s，H － [8 －Me]），13.06 （1H，s，H －[5 － OH]）。

13C － NMR（pyridine － d5，150 MHz）：δ，69.5（C － 2），46.9（C － 3）， 198.6（C － 4）， 160.4（C － 5）， 104.7（C －6）， 164.2（C － 7）， 103.4（C － 8）， 32.1（C － 9）， 158.4（C － 10），101.5（C － 11），130.6（C － 1＇），130.8（C －2＇）， 114.5（C － 3＇）， 158.9（C － 4＇）， 114.5（C － 5＇），130.8（C － 6＇）， 55.2（C － [O － CH3]）， 8.8（C － [6 －Me]），8.5（C － [8 － Me]）。

與文獻[14]對照，確定其核磁數據與甲基麥冬黃烷酮B（methyophiopogonanoneB）一致，確定其為該化合物。

3 討論

本研究中從麥冬的低、中、高極性的部位進行分離，得到含量較大的5種非甾體皂苷類化合物。大極性或中等極性化合物，如 AB － 8，D － 101，Sp825，MCI，C18等適合用反相色譜法進行分離，而用正相硅膠法進行分離會造成較大的吸附損失。交叉使用上述反相色譜，如先用Sp825樹脂梯度洗脫，流分再用MCI梯度洗脫，最后用C18反相色譜制備純化，會極大地提高分離純化的效率；另外，極性較小的高異黃酮適合用葡聚糖凝膠進行分離，葡聚糖凝膠對此類化合物具有強保留、吸附損失小的特點，如用聚酰胺色譜會造成較大的吸附損失。

麥冬為臨床常用中藥，本研究中分離得到的非甾體皂苷類化合物豐富了麥冬中化學成分的多樣性。據文獻報道，麥冬均以甾體皂苷單體或總皂苷提取物進行相關活性研究。而本研究中分離得到的1個苯丙醇苷、2個高異黃酮和1個龍腦苷具有多種生物活性，對這些成分的進一步研究有助于為已有藥效及新的臨床應用奠定物質基礎。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫藥科技出版社，2015：155.

[2]張蓮婷.麥冬藥材資源品質評價[D].南京：南京農業大學，2009.

[3]王翰韜，吳 帆，倪 穗.不同地域川麥冬集中活性成分比較[J].中國野生植物資源，2017，36（1）：26 － 29.

[4]張小燕.中藥麥冬的活性成分分析[D].南京：南京中醫藥大學，2007.

[5]張義萍，陳建真，敖志輝.麥冬不同種屬、產地和部位的活性成分研究進展[J].中國實用醫藥，2008，3（10）：191 －193.

[6]張蓮婷，葉正良，郭巧生.土壤因子對麥冬活性成分影響研究[J].中國中藥雜志，2010，35（11）：1372 － 1377.

[7]于曉文，杜鴻志，孫 立，等.麥冬皂苷藥理作用研究進展[J].藥學進展，2014，38（4）：279 － 284.

[8]范 俊，張 旭.麥冬對心腦血管系統藥理作用研究進展[J].南京中醫藥大學學報，2006，22（4）：270 － 272.

[9]張璐欣，周學謙，李德坤，等.麥冬多糖的化學組成、分析方法和藥理作用研究進展[J].藥物評價研究，2017，40（2）：279－284.

[10]張 濤.中藥麥冬中甾體皂苷類成分的研究[D].北京：中國人民解放軍軍事醫學科學院，2009.

[11]劉時喬.中藥穿山龍及麥冬的化學成分研究[D].北京：北京中醫藥大學，2015.

[12]Mimaki Y，Kuroda M，Fukasawa T，et al.Steroidal glycosides from the bulbs of Allium jesdianum[J].J Nat Prod，1999，62（1）：194－197.

[13]梅 吉吉.麥冬須根的化學成分及含量測定研究[D].長春：吉林大學，2008.

[14]程志紅，吳 弢，李林洲，等.中藥麥冬脂溶性化學成分的研究[J].中國藥學雜志，2005，40（5）：337 －341.