超高效液相色譜法測定Menaquinone-7原料藥主成分及有關物質

宋 怡，孔凡建，李銀科，王 泉

維生素K是一類天然存在的脂溶性維生素，維生素K2（甲基萘醌類，Menaquinone，簡稱MK）是一組在2-甲基-1，4-萘醌母核上有不同長度的聚異戊二烯側鏈的化合物。Menaquinone-7（MK-7）屬于維生素K2中的一類，它的側鏈含有7個異戊二烯基團，結構式見圖1。

維生素 K2主要通過微生物發酵產生［1－2］，也可由人工合成得到［3］。研究發現，維生素K2具有治療和預防骨質疏松［4－6］、促進凝血等功能［7］，同時在治療肝癌［8－9］、乳腺癌［10］等方面表現出良好的療效。MK-7作為維生素K2最重要的一類，還具有防止血管鈣化，降低冠狀動脈心臟病的風險［11］，以及治療類風濕性關節炎的功能［12］。

圖1 MK-7的結構式Fig．1 Structural f or mula of MK-7

目前，尚未見到用超高效液相色譜法測定MK-7原料藥主成分及有關物質的報道。本工作參考了國外對母乳、血液、食品中維生素K2的測定方法［13－17］，應用超高相液相色譜分析技術對 MK-7原料藥主成分及有關物質進行測定，擬為MK-7質量標準的制定提供參考。

1 試驗部分

1．1 儀器與試劑

Agilent 1290 Infinity型超高效液相色譜系統，配二極管陣列檢測器（DAD）和Open LAB CDS工作站；TB-215D型十萬分之一電子天平；Elga型超純水機。

對照品溶液：避光操作，稱取 MK-7對照品25．21 mg置于25 mL棕色容量瓶中，加無水乙醇超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成對照品儲備溶液。移取1．00 mL對照品儲備溶液，置于10 mL棕色容量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

MK-7對照品純度為99．1%，無水乙醇、異丙醇為分析純，甲醇為色譜純，試驗用水為超純水。

1．2 儀器工作條件

Agilent Eclipse pl us C18色譜柱 （2．1 mm×50 mm，1．8μm）；流動相為甲醇-水（98＋2）混合液；流量0．3 mL·min－1；檢測波長為246 n m（主成分測定），270 n m（有關物質測定）；……