魚藤素對胃癌細胞SGC7901/VCR細胞活力的影響研究

陳立加 張雙喜 黃景彬 高卓維

（廣州中醫藥大學順德醫院，廣東 佛山 528300）

胃癌是一種常見惡性腫瘤，早期胃癌以手術為主，進展期胃癌則往往需要聯合化療[1]，但化療耐藥是臨床棘手的問題。本課題從中藥單體入手，研究中藥單體-魚藤素對胃癌多藥耐藥細胞SGC7901/VCR的活性影響。

1 材料與方法

1.1 試驗藥物。魚藤素：相對分子質量為394.42，由廣東藥科大學仇志坤博士饋贈，4 ℃避光保存，臨用時配成實驗所需濃度。

1.2 細胞系：胃癌細胞SGC7901/VCR，由廣東藥科大學仇志坤博士饋贈，實驗室傳代培養。

1.3 試劑和儀器：RPMI 1640培養基、0.25%胰酶、胎牛血清（美國HyClone公司）；細胞增殖與活性檢測試劑盒（Cell Counting Kit，CCK-8）。

1.4 方法：將胃癌細胞SGC7901/VCR培養于體積分數為10%胎牛血清的RPMI 1640培養基中，置37 ℃、5% CO2培養箱中培養。

CCK-8法測定肺癌細胞的活力：將胃癌細胞SGC7901/VCR接種于96孔培養板中，每孔細胞數2.5×103個。細胞分為3組。第1組為實驗組，分別加入含苦參堿濃度為5、50、100、250、500 μg/mL的完全培養基，終體積為100 μL，每濃度組設3個復孔。第2組為陰性對照組，細胞培養體系中不加藥物，設3個復孔。第3組為空白調零組，僅加等體積的培養液。將培養板放在培養箱中預培養12或24 h后，加入終濃度為10 μL/mL CCK8溶液，在培養箱內孵育1 h后上酶標儀檢測450 nm處的吸光度（A值）。細胞活力（%）=[A（加藥）-A（空白）]/[A（0加藥）-A（空白）]×100。

2 結 果

CCK-8檢測肺癌細胞活力的變化：魚藤素在不同濃度（100、250、500 μg/mL）對胃癌細胞SGC7901/VCR活力有不同程度的抑制作用，并呈現出濃度和時間梯度依賴性，當藥物終濃度為250 μg/mL作用時間為12、24 h時，對胃癌細胞SGC7901/VCR胞的抑制率分別為36.70%、41.10%。

3 討 論

胃癌是世界范圍內最常見的惡性腫瘤之一，據2000年資料統計，全球每年新發胃癌87.6萬例，占所有新發癌癥病例的9%，僅次于肺癌、乳腺癌和腸癌之后，位居第4位。每年約有64.7萬人因胃癌死亡，位居癌癥死因的第2位[2]。現階段胃癌的治療仍是以綜合治療為主，當然手術是主要治療手段，由于許多胃癌發現就屬于中晚期，失去了手術機會，化療是提高治愈的主要手段[3]。但多藥耐藥（multi drug resistance，MDR）是化療失敗的主要因素[4]。因此本研究以胃癌多藥耐藥細胞SGC7901/VCR為研究對象。試圖探討中藥單體對抗胃癌耐藥的可能機制。

魚藤素是從豆科家族絹毛萌豆中提取的一種黃酮類化合物，分子式C23H22O6，是一種有潛在應用價值的抗癌新藥，可抑制腫瘤細胞增殖，誘導細胞凋亡[5]。美國Anderson癌癥中心的Chun等指出，魚藤素的作用機制是高度專一性的，其主要攻擊目標是腫瘤細胞及癌前病變細胞，對其周邊組織的正常細胞影響甚微，魚藤素在很低濃度下即可抑制多種腫瘤細胞的生長，且對腫瘤細胞的作用有較強的選擇性，對正常細胞的不良反應小，具有高效低毒特點，其作用機制以誘導凋亡為主[6]。美國癌癥研究協會的研究表明，魚藤素可對多種進展期腫瘤，如結腸癌、肺癌、皮膚癌和乳腺癌等有治療作用[7]。體外實驗發現，魚藤素可抑制肺癌、白血病等多種腫瘤細胞增殖并誘導凋亡，還能增加腫瘤細胞對化療藥物和放射線的敏感性[8]。動物實驗顯示魚藤素在有效的濃度范圍發揮抗癌作用的同時未發現有明顯不良反應[9]。

魚藤素對胃癌多藥耐藥細胞的作用效果既往未見報道。本課題研究結果顯示，魚藤素在不同濃度（100、250、500 μg/mL）對胃癌細胞SGC7901/VCR活力有不同程度的抑制作用，并呈現出濃度和時間梯度依賴性，當藥物終濃度為250 μg/mL作用時間為12、24 h時，對胃癌細胞SGC7901/VCR的抑制率分別為36.70%、41.10%，顯示魚藤素對胃癌細胞SGC7901/VCR的活力有抑制作用，且呈時間和濃度依賴性。本研究提示魚藤素可能是對抗胃癌多藥耐藥的一種潛在藥物，值得深入研究。