毛細管電泳－電化學發光法測定金釵石斛中石斛堿的含量

鄧光輝，羅珍連

（廣西民族大學 化學化工學院 廣西林產化學與工程重點實驗室，南寧530006）

金釵石斛（Dendrobium nobile Lindl）為蘭科屬多年附生草本植物，其入藥始載于《神農本草經》，享有“仙草”之美譽，是名貴中藥材石斛的來源之一［1］。金釵石斛的主要有效成分有生物堿類化合物、酚類化合物、多糖等［2］，其中，生物堿類成分是最早從石斛屬植物中分離得到的物質［3］。石斛堿為金釵石斛的特征性成分，具有止痛、解熱、降低心率和血壓、減慢呼吸、解巴比妥毒等作用［4－5］，有較高的研究開發價值。2010年版《中國藥典》以石斛堿含量作為金釵石斛的質量控制指標［6］。

石斛堿的測定方法有氣相色譜法［7－8］和高效液相色譜法［9－10］。與高效液相色譜法相比，毛細管電泳－電化學發光法（CE－ECL）是一種高效快速、樣品消耗少、成本低的分離檢測技術［11－12］。CE－ECL已經成功應用于生物堿研究［13－17］，但尚未見到 CEECL測定金釵石斛堿的報道。本工作對金釵石斛中具有藥理活性成分的石斛堿進行提取，采用CEECL測定其含量。

1 試驗部分

1.1 儀器與試劑

MPI－A型毛細管電泳電化學發光檢測系統，配未涂層石英毛細管（50μm×55cm）、直徑500μm鉑工作電極、Ag／AgCl參比電極和鉑輔助電極；PHS－3E型酸度計；KQ－100DB型數控超聲波清洗器；1810－B型自動雙蒸餾器。

Ru（bpy）32＋溶液：5mmol·L－1，稱取適量三聯吡啶氯化釕六水合物，用水溶解配制成20mmol·L－1溶液，再用70mmol·L－1磷酸鹽緩沖溶液（PBS，pH 8.10）稀釋配制成5mmol·L－1。

標準儲備溶液：500mg·L－1，稱取石斛堿對照品5.0mg置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，搖勻，使用時用pH 8.10PBS進行稀釋。

石斛堿標準品純度99%，三聯吡啶氯化釕六水合物、甲醇、乙醇為分析純，試驗用水為二次蒸餾水，其他試劑均為分析純。……