RP-HPLC法測定復方消旋山莨菪堿滴眼液硫酸軟骨素以氨基葡萄糖計的含量

欒雨

（江蘇省鎮江藥品檢驗所 江蘇 鎮江 212003）

復方消旋山莨菪堿滴眼液是為復方制劑。用于治療青少年假性近視眼。本文通過RP-HPLC法測定復方消旋山莨菪堿滴眼液中硫酸軟骨素以氨基葡萄糖的含量，進一步提高了該藥標準，方法簡便、快速，重現性。

1.儀器與試藥

1.1 儀器

BP211D型電子天平（賽多利士）；Agilent1260高效液相色譜儀，UVA檢測器（美國Agilent公司）

1.2 試藥

D-鹽酸氨基葡萄糖對照品(中國藥品生物制品檢定所140649-201505 100%)；水為二次重蒸水；乙腈為色譜純；復方消旋山莨菪堿滴眼液（鎮江恒新藥業有限公司，批號：160903，160902，160901）

2.實驗方法

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent C-18柱（3.9 mm×250mm，5um），流動相：水（水2000mL加磷酸1mL，用KOH溶液調節pH值至3.0）—乙腈(3:2)，流速：1.0mL/min，檢測波長195nm，理論塔板數：10000。

2.2 對照品溶液制備：

精密稱取在105℃干燥至恒重的鹽酸氨基，葡萄糖對照品適量，加流動相稀釋成1mg/ml的溶液。

2.3 樣品溶液的制備

精密量取本品10mL，置100mL量瓶中，加流動相溶解稀釋至刻度，搖勻濾過，取續濾液。

圖1 鹽酸氨基葡萄糖對照品

2.4 標準曲線制備的制備

取鹽酸氨基葡萄糖對照品溶液0.3mg/ml，分別進樣1.0、2.0、3.0、4.0、5.0μl，以峰面積（y）為縱坐標，相應濃度（x）為橫坐標進行線性回歸，y=1772.1x-1.04 R=1，線性范圍0.3～1.5mg。結果表明種峰面積與濃度呈良好的線性關系。見圖1、2。

圖2 品色圖譜

2.5 精密度測定

取對照品溶液，重復進樣5次，記錄峰面積分別為837.82、840.10、839.33、841.24、837.21。平均值為 839.14。RSD為 0.2%。

2.6 重復性測定

按照擬訂的含量測定方法，取同批號樣品5份，分別制備樣品供試液，在上述色譜條件下測定5次，鹽酸氨基葡萄糖的RSD為 1.06%。

2.7 穩定性試驗

在本試驗條件下，樣品溶液室溫放置12h，每隔一段時間進樣10μL記錄峰面積。氨基葡萄糖峰面積平均值為677.6，RSD分別0.3%。

2.8 回收率試驗

取氨基葡萄糖適量配制成1.1mg/ml，取1.0ml加入到樣品中照樣品測定法測定，測得結果：氨基葡萄糖回收率平均值為99.9%，RSD 為 0.4%。

2.9 樣品測定

取樣品溶液和對照品溶液，各進樣10μL，讀取峰面積值，按外標法計算含量，結果見表1。

表1 樣品含量測定結果（n=3）

3.討論

3.1 通過實驗得知在195nm處有較大吸收，其它成分在該波長處無干擾，因此可選擇此波長作為檢測波長。

3.2 采用HPLC法測定中復方消旋山莨菪堿滴眼液以水氨基葡萄糖計的含量與原UV生物顯色法比較，結果一致，但方法簡便、準確、重現性好。原UV過程繁瑣，影響因素多，耗時長，不利于生產環節的質量控制。

[1]國家藥典委員會，國家食品藥品監督管理局國家藥品標準新藥轉正第47冊，化學工業出版社，2004，47.

[2]HPLC-ELSD法測定鹽酸氨基葡萄糖膠囊中鹽酸氨基葡萄糖的含量-淮陰師范學院學報（自然科學版）2015(1).