糖化血紅蛋白檢測方法研究與觀察

伍娟，陳紅

糖尿病是由于患者血液中的糖含量升高，是胰腺功能逐漸下降而導致的一種疾病，俗稱“富貴病”，主要多發于中老年患者[1]。該疾病屬于臨床內科較頻發的一類慢性代謝性疾病，其發病率逐年呈上升趨勢，據統計，我國糖尿病的發病率高達15%[2]。發病后主要表現為“三多一少”癥狀，若不能得到及時檢查與治療，伴隨著病情的進展遷延，容易引發其它臟器病變，嚴重影響其日常生活、學習和工作。隨著發病率的逐年升高，得到了社會及臨床醫生的廣泛重視。

臨床上對于糖尿病采用糖耐量試驗進行監測，如空腹血糖：＞7.0 mmol/L，或餐后2 h血糖：＞11.1 mmol/L為糖尿病的入選標準。糖耐量試驗只能檢測血糖變異度和血糖水平，還受到體內胰島素分泌的影響，存在較多的干擾因素，影響診斷結果。隨著醫療科技的發展，糖尿病的檢測方式也日漸成熟，其國際糖尿病協會已將糖化血紅蛋白指標列入診斷標準[3]。當糖化血紅蛋白含量（HbAlc）＞48 mmol/L，可以診斷為糖尿病。臨床上檢測糖化血紅蛋白的方式較多，包括生化免疫比濁法、陽離子交換色譜法、乳膠凝集法及離子捕獲法等。這些檢測方式對糖化血紅蛋白含量的測定均具有一定的臨床意義和價值[4]。本文主要針對糖化血紅蛋白的檢測方式進行研究，希望可以為臨床檢驗提供借鑒。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇糖化血紅蛋白檢測儀型號：MQ－2000 HbAlc分析儀（上海惠中醫療科技有限公司生產），試劑（上海華臣生物有限責任公司，批準文號20111111）。血液生化檢測儀（深圳邁瑞800生化分析儀）。通過第三方質物（Bio-Rad）控進行質控簡評，觀察兩個水平的濃度變化。血液標本：選取2014年12月～2017年2月在本院進行糖尿病檢測的患者45例，均抽取2 ml的靜脈血液加入1.5 mg/m LEDTA-K的抗凝劑中，所有血液標本均在采集后的12 h內進行檢測。

1.2 檢測方式 采用TTAB作為溶血劑，將采集的血液標本中的紅細胞溶血，再加入抗HbAlc的抗體緩沖液與可溶性的抗體抗原反應，形成可溶性的抗體復合物，再使用Bio-Rad的配套試劑：全血灌注液、洗脫緩沖液與過剩的HbAlc抗體進行結合，形成不溶血的多聚半抗原后，再進行免疫比濁測定[5]。

陽離子交換色譜法：主要先選定合適的緩沖液，然后在低溫環境下進行洗脫HbAlc再應用高濃度的洗脫液清洗出非HbAlc物質，然后可以獲得相應的血紅蛋白層析譜，根據HbAlc指標變化值在色譜圖中所顯示的HbAlc峰面積占全血紅蛋白面積的百分比來進行表示[6]。

1.3 觀察指標 觀察不同檢測方式后，第三方質控物質的2個濃度變化及質評結果進行統計比較。

2 結果

2.1 2個濃度水平的變化 經不同的檢測方式后，測定的HbAlc指標的室內變異性＜2%，室間變異性也＜3.5%，且變異系數（CV）與靶值的差異性較小，見表1。

表1 2個濃度水平變化（%）

2.2 兩種檢測方式的質評結果統計 不同檢測方式后的質評結果統計，見表2。

表2 不同檢測方式后的質評結果統計

3 討論

糖尿病是臨床上較常見的內科慢性代謝性疾病，病程相對較長，病情進展緩慢，若不能夠在短時間內預防及治療，伴隨著病程的遷延，往往會延誤最佳的治療時機，出現較多的并發癥情況，甚至損害人體的其它器官組織或臟器，嚴重影響患者的日常生活、工作質量及生命健康[7]。在所有糖尿病類型中，2型糖尿病的發病情況較常見和多發，約占總發病率的95%左右，主要是由于2型糖尿病受遺傳及環境等因素的影響更明顯[8]。糖尿病大多數是由胰腺分泌胰島素不足或胰島素代謝紊亂所致的一類內分泌代謝性疾病。糖尿病的發病人群較廣，且發病率呈逐年上升趨勢，主要多見于青少年及中老年人群。臨床上誘發2型糖尿病的主要因素包括進食過多、運動量少、肥胖等因素息息相關。糖尿病發病后最典型特征是“三多一少”，即多飲、多食、多尿及體重減輕。臨床管理該疾病多采用藥物治療，來快速控制血糖，并進行合理的監督或提高患者自我管控能力，從而達到更好的控制血糖水平的目的，并進一步改善其日常生活質量[9]。臨床中對于該疾病的檢測方式包括糖耐量試驗及糖化血紅蛋白含量的測定。由于在進行糖耐量試驗的過程中，容易受胰島素水平等因素的影響，對血糖水平的測定具有一定的局限性，限制時間及飲食等情況。伴隨著醫療科技的逐漸發展與成熟，糖化血紅蛋白的測定也逐漸完善，并應用于臨床疾病的診斷。其主要的檢測方式包括免疫檢測法、陽離子交換色譜法、乳膠凝集法等[10]。從檢測原理上分析免疫檢測法，主要是利用抗原抗體結合的方式，形成特異性反應，其抗體具有高度的特異性能夠識別鏈糖基化多肽中的氨基酸，盡量避免電荷數的變化，從而減少了干擾因素，同時該檢查技術具有檢測時間短、成本低、重復操作性好及操作方式簡單等臨床檢測優勢。但也存在一定的缺陷，如可能存在含有結構變異的Hb、容易交叉污染，均會對檢測結果造成一定的影響，從而會影響整個疾病的診斷。陽離子交換色譜法，其精密度、敏感性及線性均略高于免疫檢測法，其也有缺點，如不能從HbA1c中分離胎兒型的血紅蛋白，還存在一些稀有異常變化或變種的紅細胞，均會對測定過程造成一定的干擾。

綜上所述，對于糖尿病的檢測中，各種糖化血紅蛋白的檢測方法被廣泛的推廣應用，其檢測方式各有利弊，對檢測結果的影響也均不同。免疫檢測法具有較高的敏感性和特異性，且操作方式簡單方便，檢測成本較低，但受紅細胞的影響較大，形成一定的干擾因素；陽離子交換色譜法，特異性略低，受血紅蛋白的影響小。

[1] 湯世博,曹利民.糖化血紅蛋白檢測方法研究進展[J].北京生物醫學工程,2013,32(3):325-329.

[2] 張捷,楊碩.糖化血紅蛋白檢測的標準化進程及臨床應用[J].中華檢驗醫學雜志,2012,35(6):511-516.

[3] 向陽,姜艷,張瓊.2種糖化血紅蛋白檢測方法的比對和結果一致性評價[J].新疆醫科大學學報,2013,36(7):979-980.

[4] 于秀娟,歐超偉.糖化血紅蛋白檢測的影響因素及臨床意義[J].中國老年學,2013,33(19):4930-4933.

[5] 張靜,王永賓.糖化血紅蛋白檢測的影響因素及臨床意義[J].中外醫療,2014(25):191-192.

[6] 梁江紅,楊福華.淺談對糖尿病腎病患者聯合進行尿微量白蛋白與糖化血紅蛋白檢測的臨床意義[J].當代醫藥論叢,2015,14(2):43-44.

[7] 趙銳,黃新成,吳麗琴,等.糖化血紅蛋白檢測方法的研究進展[J].實用醫技雜志,2014,21(2):167-168.

[8] 趙翠伶,王麗娟,王連英,等.不同糖化血紅蛋白檢測方法在臨床中的應用探討[J].中國醫刊,2013,48(8):35-36.

[9] 徐紅珍,王露,馬正坤.同型半胱氨酸、糖化血紅蛋白和尿微量白蛋白聯合檢測對早期糖尿病腎損傷的診斷價值[J].當代醫學,2012,13(26):7-8.

[10]朱國平.糖尿病患者糖化血紅蛋白與空腹血糖水平的相關性分析[J].當代醫學,2015,21(18):98-99.