FAME試劑槽對兩家HBsAg ELISA試劑檢測結果的影響分析

劉玉強，謝 輝（開封市中心血站檢驗科，河南475000）

酶聯免疫吸附試驗（ELISA）具有操作簡單、靈敏度高等優點，在臨床及血液安全篩查中得到廣泛應用[1-3]。但在日常工作中常遇到假陽性率高、重復性不好等問題，原因是影響ELISA試劑檢測結果的因素很多[4-6]。本研究探討了全自動酶免分析儀FAME試劑槽對兩家乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）ELISA試劑檢測結果的影響，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 STAR全自動加樣儀（瑞士HAMILTON公司）、FAME24/20全自動酶免分析儀（瑞士HAMILTON公司）等。

1.1.2 試劑 4項混合質控血清（康徹思坦公司，批號：201601002）、HBsAg ELISA試劑盒（北京萬泰公司生產，批號：B20151228；法國伯樂公司生產，批號：5L0207）、抗丙型肝炎病毒ELISA試劑盒（北京萬泰公司生產，批號：CS20151208，珠海麗珠公司生產，批號：2015121608）、抗人類免疫缺陷病毒ELISA試劑盒（珠海麗珠公司生產，批號：2015122308；法國伯樂公司生產，批號：5L0342）、抗梅毒螺旋體ELISA試劑盒（北京萬泰公司生產，批號：N20151222；珠海麗珠公司生產，批號：2015121908）等，試劑均在有效期內使用。

1.2 方法 啟用新的FAME試劑槽后，對兩家HBsAg ELISA試劑進行室內質控品檢測，每次檢測重復10次，計算檢測結果與臨界值比值（S/CO）均值，連續檢測5 d，記錄每天的S/CO均值，分析S/CO值變化趨勢。

1.3 統計學處理 應用SPSS17.0統計軟件進行數據分析，計數資料以率或構成比表示，采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩家HBsAg ELISA試劑進行室內質控品檢測結果比較 國產HBsAg ELISA試劑S/CO變異系數（CV）為10.5%（＜20.0%），符合實驗室對批間變異的要求；進口 HBsAg ELISA 試劑 S/COCV為 20.4%（＞20.0%），不符合實驗室對批間變異的要求；FAME試劑槽對2家HBsAg ELISA試劑檢測結果的影響比較，差異有統計學意義（χ2=5.21，P=0.025），見表 1。

表1 兩家HBsAg ELISA試劑進行室內質控品檢測結果比較

2.2 兩家HBsAg ELISA試劑進行室內質控品檢測結果趨勢性分析 國產HBsAg ELISA試劑S/CO沒有發生趨勢性變化，進口HBsAg ELISA試劑S/CO發生逐漸降低的趨勢性變化。見圖1。

圖1 兩家HBsAg ELISA試劑進行室內質控品檢測結果趨勢性分析

3 討 論

ELISA法檢測HBsAg因具有靈敏度高、特異性強等優點而被廣泛應用，在日常工作中影響ELISA法檢測HBsAg的因素很多，HBsAg假陽性結果易給廣大獻血者造成極大的精神壓力，易引起獻血資源的流失[7]。但HBsAg假陰性結果卻給受血者帶來額外的痛苦。

全國采供血機構為防止ELISA法檢測HBsAg假陰性結果，普遍選擇高靈敏度的HBsAg ELISA試劑，設置一定范圍的檢測灰區[8]或選擇靈敏度更高的核酸檢測，以進一步提高血液檢測的安全性。

本研究探討了FAME試劑槽對兩家HBsAg ELISA試劑檢測結果的影響，結果顯示，國產HBsAg ELISA試劑連續5 d室內質控品檢測S/CO為3.65～4.88，CV為10.5%（＜20.0%），符合血站技術操作規程要求[9]，檢測結果在有效控制范圍內。進口HBsAg ELISA試劑室內質控品檢測S/CO由第1天的3.16逐漸降低至第5天的1.80，CV為20.4%（＞20.0%），超出血站技術操作規程要求，檢測結果出現失控，必須采取相應措施進行控制。FAME試劑槽對兩家HBsAg ELISA試劑檢測結果的影響比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。因此，為保證檢測結果的準確性，進口HBsAg ELISA試劑使用FAME試劑槽時應及時更換，而國產HBsAg ELISA試劑使用FAME試劑槽時應注意觀察室內質控檢測數據，如發生不可逆轉的趨勢性降低變化時再更換新的FAME試劑槽。

從圖1可見，國產HBsAg ELISA試劑在連續5 d檢測時間內檢測結果沒有發生趨勢性變化，進口HBsAg ELISA試劑在連續5 d檢測時間內檢測結果呈逐漸降低的趨勢性變化。因此，為保證血液檢測質量，對進口試劑應密切觀察檢測結果的趨勢性變化，及時更換FAME試劑槽，防止檢測結果出現失控；對國產試劑應密切觀察室內質控圖，如發生不可逆轉的趨勢性降低變化時再更換FAME試劑槽。

綜上所述，在5 d檢測時間內，FAME試劑槽對進口HBsAg ELISA試劑影響隨檢測時間呈逐漸降低的趨勢性變化，第5天檢測結果已出現失控，必須采取有效措施進行控制；而對國產HBsAg ELISA試劑影響隨檢測時間無趨勢性變化，5 d的檢測結果均在有效控制范圍內；FAME試劑槽對進口HBsAg ELISA試劑影響大于國產HBsAg ELISA試劑，對二者的影響存在顯著差異。因此，建議及時更換進口HBsAg ELISA試劑的FAME試劑槽，對國產HBsAg ELISA試劑應密切觀察室內質控變化趨勢，當檢測結果發生趨勢性降低不可逆轉時分析其產生原因，采取糾正措施，確保檢測結果準確性。目前，FAME檢測分析系統在全國采供血系統實驗室得到廣泛應用[10]，應加強對全自動檢測設備的維護，注重細節管理，避免因設備、耗材等原因對檢測結果造成影響，確保檢測結果的準確性。

[1]姚燕紅，黎四平，彭琪.3 678例術前4項感染性標志物檢測結果分析與探討[J].檢驗醫學與臨床，2013，10（1）：85.

[2]李燕斌.術前血清感染性指標檢測結果分析[J].國際檢驗醫學雜志，2013，34（8）：1035-1036.

[3]沈霞.臨床免疫學與免疫學檢驗新技術[J].北京：人民軍醫出版社，2002：68-69.

[4]溫秀明，鄔旭群，劉詠梅，等.深圳市志愿無償獻血者HIV感染狀況分析[J].中國輸血雜志，2012，25（8）：767-711.

[5]劉淑芬，劉立群.用酶聯免疫吸附試驗方法評價膠體金測試卡檢測乙型肝炎病毒血清標志物的性能[J].河北中醫，2014，36（11）：1753-1754.

[6]張保平，劉珊，韓艷秋.內蒙古某院2011—2013年抗HIV1/2抗體篩查與確診結果分析[J].檢驗醫學與臨床，2014，11（20）：2839-2840.

[7]陳洪生，陳佳微，張三明，等.ELISA“灰區”范圍的設定對獻血者血液安全檢測和血源保的意義[J].中國輸血雜志，2015，9（28）：1140-1141.

[8]陳善華，朱麗莉，李浩，等.ELISA檢測HBsAg設置灰區的必要性探討[J].中國輸血雜志，2013，26（10）：1013-1014.

[9]中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會.國家衛生計生委關于印發血站技術操作規程（2015版）的通知[Z].2015-12-17.

[10]王新波，魏哲.FAME全自動酶免分析系統的應用[J].臨床輸血與檢驗，2010，2（2）：187-189.