PPARγ在賁門腺癌中表達及生物學意義

葛宇君

（嘉興市第二醫院心胸外科 浙江 嘉興 314001）

賁門癌在我國是一種常見的消化道惡性腫瘤。目前，手術切除是賁門癌的主要治療方式，但預后不佳，術后5年生存率統計只有20%左右。其病理類型腺癌居多，且放化療效果不佳。因此尋找新的高效，低毒的藥物成為了腫瘤治療新的方向。過氧化物酶體增殖物激活受體（PPARs）是屬于核受體超家族的一類核轉錄因子。PPARs可分為三種亞型，包括PPARα，PPAR β/δ，PPARγ。PPARγ在多種腫瘤組織中均有表達，包括：肺癌、胃癌、前列腺癌、結腸癌、膀胱癌、十二指腸癌、乳腺癌、甲狀腺癌。并在腫瘤的發生發展中起著促進細胞分化，抑制腫瘤細胞增殖，誘導細胞凋亡，抑制腫瘤細胞侵襲和血管生成等重要作用。本研究采用RT-PCR的方法檢測賁門腺癌中PPARγmRNA的表達量，研究其與賁門腺癌的生物學特性間的關系。

1.研究對象

標本為手術切除的50例賁門腺癌組織及遠端癌組織（離癌組織邊緣5cm以上，手術后殘端為陰性）。術前均未進行放化療。

2.PCR操作方法

提取賁門腺癌組織及其遠端癌組織的總RNA作為實驗組和對照組。按照逆轉錄試劑盒說明書合成cDNA，進行檢測后以cDNA為模版擴增PPARγ基因，擴增β-actin基因做為內參照基因。操作方法：反應體系為25μL，各引物添加量為：正向引物0.5μL，反向引物0.5μL，模版DNA2μL 。PPARγmRNA上游引物：5'TGGAGAAAATCTGGCACCAC3'，下游引物：5'GAGGCGTACAGGGATAGCAC3'，β-actin上游引物5'TGGAGAAAATCTGGCACCAC3'，下游引物5'-GCATTATGAGACATCCCCCAC-3'。PCR反應參數：94℃預變性2min，94℃變性30s，60℃退火30s，72℃延伸45s，72℃再延伸5min，總計35個循環，

3.數據統計與分析

實驗數據使用SPSS17.0進行統計分析，數據呈非正態分布，方差不齊，故采用Mann Whitney U檢驗，組間比較使用Kruskal-Wallis H檢驗。基因表達量計算采用2-ΔΔCt法。

4.PCR檢測結果

4.1 在癌組織中PPARγ的中位表達量為1.07498，其在遠癌組織中位表達量3.25193。結果顯示PPARγ在賁門癌組織與遠端癌組織之間的表達差異有統計學意義（P=0.01），PPARγmRNA在賁門癌組織中的表達水平較遠癌組織低。

4.2 PPARγ在賁門腺癌組織表達與腫瘤的TNM分期（P=0.01）、淋巴結轉移（P=0.01）、侵潤深度（P=0.01）、分化程度（P=0.013）有關，差異有統計學意義。與患者的年齡、性別無相關性（P＞0.05）。

5.討論

PPARγ分布在不同組織中，具有調節細胞生長、分化、凋亡與代謝平衡等多種生物功能。在結合和激活配體后，PPARγ和視黃酸受體（RXR）形成異二聚體，然后結合過氧化物酶體增殖物反應元件（PPRE）活化靶基因并激活目的基因轉錄發揮其調控作用。PPARγ具有多種抑制腫瘤的機制，主要包括：（1）阻滯細胞周期。（2）誘導細胞凋亡。（3）抑制腫瘤血管生成。（4）減少腫瘤細胞侵襲性。

在胃癌發生、發展和預后中么立萍[1]等研究認為PPARγ表達存在相關性。劉鵬飛、馬秀梅[2，3]等報道認為PPARγ在胃癌的發生發展和浸潤轉移中可能起著抑制作用。在食管癌中，目前研究認為PPARγ表達降低可能與食管癌轉移及預后不良相關[4]。

目前，在賁門腺癌與PPARγ的生物學特性間的相關性研究較少。RT-PCR結果顯示賁門癌組織和遠端癌組織中PPARγ的表達量差異有統計學意義（P=0.01），在賁門腺癌組織中PPARγmRNA的表達水平要低于遠癌組織，與在食管癌中PPARγmRNA表達趨勢一致。我們發現PPARγmRNA的表達水平與腫瘤的分化程度相關，隨著分化程度的降低PPARγmRNA的表達量也隨之減少（P=0.013）。與TNM分期有關，與侵襲和轉移，侵潤深度（P＜0.05）有關。與年齡、性別無關（P＞0.05）。RT-PCR的實驗結果提示在賁門癌的發生發展可能有PPARγ的參與，其在賁門癌組織中的表達水平的降低提示賁門腺癌的發生和進展可能與PPARγ抗腫瘤活性喪失或者下調相關。

綜上所述，PPARγ在賁門癌組織中的表達與其預后相關，可能是賁門癌預后的一個有用指標，可對賁門癌的發展及預后做出準確的判斷，并更好地進行個體化治療。