Graves眼病與相關(guān)miRNA的研究

花蕊 孫曙光

（大理大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院內(nèi)分泌科 云南 大理 671000）

甲狀腺相關(guān)眼病（thyroid associated ophthalmopathy，TAO）是成年人最常見(jiàn)的眼眶疾病的一種，屬于自身免疫性疾病的一種，但TAO的確切發(fā)病機(jī)制目前尚不清楚。Graves眼病（Graves’ophthalmopathy，GO）也稱(chēng)為T(mén)AO。GO臨床上主要表現(xiàn)為眼球突出、眼外肌的運(yùn)動(dòng)障礙、眼痛、眶周水腫，嚴(yán)重影響人們健康和生活。MicroRNAs（miRNAs）是一類(lèi)非編碼小分子RNA，許多研究顯示miRNA可能在自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。研究miRNA與GO的關(guān)系，可以為今后的GO的治療提供新思路，本文就其作一綜述。

1.GO與miRNA概述

1.1 GO

Graves病是一種常見(jiàn)的自身免疫性疾病。在臨床上，GO影響了50%～60% Graves甲狀腺功能亢進(jìn)的患者。GO的臨床特征性表現(xiàn)包括突眼，眶周水腫，眼瞼退縮，疼痛，復(fù)視，視神經(jīng)病，變視力下降。GO的發(fā)病機(jī)制目前仍無(wú)明確的定論，多認(rèn)為與自身免疫、甲狀腺功能失調(diào)、遺傳、環(huán)境、吸煙、感染等相關(guān)[1]。目前研究認(rèn)為GO的相關(guān)癥狀是眼眶組織病理改變過(guò)程的結(jié)果。眶內(nèi)成纖維細(xì)胞是導(dǎo)致GO的主要靶細(xì)胞及效應(yīng)細(xì)胞[2]。GO被認(rèn)為與眼眶成纖維細(xì)胞中存在的抗原有關(guān)。

1.2 MicroRNAs

MicroRNAs（miRNAs）是真核生物體內(nèi)的一類(lèi)長(zhǎng)度約為20～23個(gè)核苷酸并具有基因高度保守性的小分子非編碼單鏈RNA。miRNA 通過(guò)與靶mRNA 3’端非翻譯區(qū)特異性堿基配對(duì)結(jié)合，降解靶mRNA，或者抑制靶基因的翻譯，在許多關(guān)鍵細(xì)胞途徑中起著重要的調(diào)節(jié)作用，如細(xì)胞的發(fā)育、分化以及凋亡[3]。與神經(jīng)突觸形成、病毒感染甚至腫瘤的轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)[4]。

研究顯示一系列RNA(miRNA)直接或間接參與了固有性和適應(yīng)性免疫應(yīng)答，從而可能在自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用[5]。最近的一些研究表明，自身免疫性疾病如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[6]，系統(tǒng)性紅斑狼瘡[7]，潰瘍性結(jié)腸炎[8]和銀屑病[9]與改變的miRNA表達(dá)有關(guān)。因此，基于炎性自身免疫病與相關(guān)miRNA改變表達(dá)的相關(guān)報(bào)道，我們考慮miRNA也可能與GO相關(guān)。

2.相關(guān)MiRNA介紹

越來(lái)越多的研究證實(shí)，miRNA異常與自身免疫性疾病的發(fā)生有密切的關(guān)系，尋找與GO發(fā)病相關(guān)的miRNA，可為GO的發(fā)病預(yù)測(cè)及臨床治療提供一個(gè)新的方向。下面將針對(duì)目前研究的熱點(diǎn)進(jìn)行介紹。

2.1 miRNA-155

miRNA-155（miR-155）可通過(guò)增強(qiáng)炎性T細(xì)胞發(fā)育來(lái)促進(jìn)自身免疫性炎癥[10]。miR-155的表達(dá)可以通過(guò)核因子活化B細(xì)胞κ輕鏈增強(qiáng)子（NF-κB）途徑誘導(dǎo)[11]。miR-155通過(guò)抑制細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白1（SOCS1）和SHIP1來(lái)促進(jìn)炎癥，這是NF-κB通路中重要的兩個(gè)負(fù)調(diào)節(jié)因子。另一方面，在GO眼病患者中IL-1b和TNF-α可以通過(guò)激活眶內(nèi)成纖維細(xì)胞中的NF-kB途徑來(lái)誘導(dǎo)炎癥，脂肪產(chǎn)生和浸潤(rùn)[12]，考慮miR-155的表達(dá)增加，從而促進(jìn)Graves眼病中的眼部炎癥和纖維增殖。

2.2 miRNA-146a

miRNA 146a（miR-146a）是炎癥性自身免疫性疾病中相對(duì)熟知的miRNA。微小RNA 146a似乎通過(guò)諸如TRAF6和IRAK1分子下調(diào)靶基因從而抑制NF-κB途徑起作用。這導(dǎo)致炎癥反應(yīng)的終止或緩解[13]。韓國(guó)Jin Sook Yoon等研究者基于這一背景，集中研究了在由IL-1β誘導(dǎo)的眶內(nèi)成纖維細(xì)胞炎癥的炎性細(xì)胞模型中的miR-146a，實(shí)驗(yàn)證實(shí)來(lái)自GO患者眶內(nèi)脂肪組織中的miRNA-146a顯著高于非GO受試者。miR-146a似乎通過(guò)調(diào)節(jié)眶內(nèi)成纖維細(xì)胞中的炎癥蛋白表達(dá)和細(xì)胞功能來(lái)導(dǎo)致GO發(fā)病。

2.3 miRNA-125a

已知miRNA 125a（miR-125a）是調(diào)節(jié)活化正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的趨化因子（RANTES），白細(xì)胞介素（IL）-6和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）-β負(fù)調(diào)控因子。Inoue Y等人對(duì)Graves ?。℅D）患者外周血單核細(xì)胞（PBMCs）中miR-125a的表達(dá)進(jìn)行了定量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明GD患者PBMCs中miR-125a的表達(dá)顯著降低，且研究數(shù)據(jù)表明miR-125a表達(dá)隨年齡增長(zhǎng)而下降，這也是首次報(bào)告miR與年齡之間的相關(guān)性。而miR-125a作為RANTES，IL-6和TGF-β的負(fù)調(diào)節(jié)劑，所以Inoue Y等研究人員認(rèn)為在GD患者中，miR-125a的下調(diào)可能間接促進(jìn)Th17細(xì)胞的分化并導(dǎo)致GD發(fā)育[14]。

2.4 miRNA-21

Tong Bo-ding等研究者通過(guò)測(cè)試正常受試者及甲狀腺相關(guān)性眼?。═AO）受試者眶內(nèi)成纖維組織中miRNA-21（miR-21）的表達(dá)[15]，證實(shí)TAO受試者中miR-21在眶內(nèi)成纖維細(xì)胞中的表達(dá)高于無(wú)TAO的受試者。TGF-β是參與纖維化進(jìn)程的關(guān)鍵病理介質(zhì)[16]。TGF-β1以時(shí)間和濃度依賴(lài)方式誘導(dǎo)miR-21表達(dá)，miR-21通過(guò)TGF-β1促進(jìn)I型膠原mRNA表達(dá)和總膠原產(chǎn)生。Tong Bo-ding等人的實(shí)驗(yàn)表明miR-21增強(qiáng)增殖，減少細(xì)胞凋亡，促進(jìn)TAO眶內(nèi)成纖維細(xì)胞分化。表明miR-21是眶內(nèi)成纖維細(xì)胞中的抗細(xì)胞凋亡因子[15]。抑制miR-21表達(dá)可以為未來(lái)TAO的治療抗纖維化治療。

2.5 miRNA-346

濾泡輔助性T細(xì)胞（Tfh細(xì)胞）廣泛參與自身免疫疾病的發(fā)病機(jī)制，轉(zhuǎn)錄因子Bcl-6在調(diào)控Tfh細(xì)胞分化中有重要作用，miR-346可以在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上抑制Bcl-6，miR-346的表達(dá)與Graves病患者的Bcl-6 mRNA水平和CD4+CXCR5+T細(xì)胞百分比呈負(fù)相關(guān)，miR-346可能通過(guò)觸發(fā)CD4+CXCR5+T細(xì)胞中的Bcl-6參與GD的發(fā)病機(jī)制，Juan Chen等研究者發(fā)現(xiàn)GD患者的循環(huán)CD4T+細(xì)胞中miR-346顯著下調(diào)[17]，miR-346可作為治療Graves患者新靶點(diǎn)。

3.前景展望

近年來(lái)隨著對(duì)miRNA的深入研究，其對(duì)GD、TAO等的發(fā)病機(jī)制、診斷方法、治療措施的研究開(kāi)辟了新的方向，對(duì)GO的發(fā)病機(jī)制有了進(jìn)一步的研究，可使其治療更具有針對(duì)性，然而，目前關(guān)于與GO相關(guān)的miRNA研究仍處于初級(jí)階段，大多數(shù)miRNA是否可成為作為靶向治療的生物標(biāo)志還需進(jìn)一步研究來(lái)測(cè)試其可能性。

[1]陳盼,歐陽(yáng)偉.Graves眼病的發(fā)病機(jī)制及131I綜合應(yīng)用的進(jìn)展[J].廣東醫(yī)學(xué),2014(17):2776-2779.

[2] Feldon S E, Park D J J, Nguyen V T, et al. Autologous T-Lymphocytes Stimulate Proliferation of Orbital Fibroblasts Derived from Patients with Graves'Ophthalmopathy[J]. Investigative Ophthalmology & Visual Science, 2005.

[3] Gommans W M, Berezikov E. Controlling miRNA regulation in disease.[J].Methods in Molecular Biology,2012, 822(822):1.

[4] Podshivalova K, Salomon D R. MicroRNA regulation of T-lymphocyte immunity: modulation of molecular networks responsible for T-cell activation, differentiation, and development.[J]. Critical Reviews in Immunology,2013,33(5):435-76.

[5] Pedersen I, David M. MicroRNAs in the Immune Response[J]. Cytokine, 2008, 43(3):391.

[6] Nakasa T, Miyaki S, Okubo A, et al. Expression of microRNA-146 in rheumatoid arthritis synovial tissue.[J]. Arthritis & Rheumatism, 2008, 58(5):1284.

[7] Dai Y, Huang Y M, Lv T, et al. Microarray analysis of microRNA expression in peripheral blood cells of systemic lupus erythematosus patients.[J].Lupus,2007, 16(12):939-46.

[8] Wu F, Zikusoka M, Trindade A, et al. MicroRNAs are differentially expressed in ulcerative colitis and alter expression of macrophage inflammatory peptide-2 alpha.[J]. Gastroenterology, 2008, 135(5):1624-1635.e24.

[9] Sonkoly E, Wei T, Janson P C, et al. MicroRNAs: novel regulators involved in the pathogenesis of psoriasis?[J]. Plos One, 2007, 2(7):e610.

[10] Li K, Du Y, Jiang B L, et al. Increased microRNA-155 and decreased microRNA-146a may promote ocular inflammation and proliferation in Graves' ophthalmopathy.[J]. Medical Science Monitor International Medical Journal of Experimental & Clinical Research, 2014, 20(20):639.

[11] Ma X, Buscaglia L E B, Barker J R, et al. MicroRNAs in NF-κB signaling[J]. Journal of Molecular Cell Biology, 2011, 3(3):159-166.

[12] Li K, Du Y, Jiang B L, et al. Increased microRNA-155 and decreased microRNA-146a may promote ocular inflammation and proliferation in Graves' ophthalmopathy.[J]. Medical Science Monitor International Medical Journal of Experimental & Clinical Research, 2014, 20(20):639.

[13]Jang S Y, Chae M K, Lee J H, et al. Role of miR-146a in the Regulation of Inflammation in an In Vitro Model of Graves' Orbitopathy[J]. Investigative Ophthalmology & Visual Science, 2016, 57(10):4027.

[14] Inoue Y, Watanabe M, Inoue N, et al. Associations of single nucleotide polymorphisms in precursor-microRNA (miR)-125a and the expression of mature miR-125a with the development and prognosis of autoimmune thyroid diseases[M]// Clinical & Experimental Immunology.2014:229-235.

[15] Tong B, Xiao M Y, Zeng J X, et al. MiRNA-21 promotes fibrosis in orbital fibroblasts from thyroid-associated ophthalmopathy[J]. Molecular Vision, 2015, 21:324.

[16] Leask A, Abraham D J. TGF-beta signaling and the fibrotic response.[J]. Faseb Journal Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology, 2004, 18(7):816-27.

[17] Juan Chen;Jie Tian;Xinyi Tang;Ke Rui;Jie Ma;Chaoming Mao;Yingzhao Liu;Liwei Lu;Huaxi Xu;Shengjun Wang;.MiR-346 regulates CD4+CXCR5+ T cells in the pathogenesis of Graves’disease[J],2015,49(3):752-760.