用血清藥理學方法研究中藥苦參的抗腫瘤作用

張宏梅，崔佰吉

（吉林醫(yī)藥學院，吉林 吉林 132013）

1 資料與方法

1.1 一般資料

實驗動物為20只SD大鼠（成都達碩實驗動物有限公司提供），體重220～250 g，雌雄各10只。實驗藥劑：噻唑藍、臺盼藍以及蛋白酶K，均由北京索萊寶科技有限公司提供。小牛血清（賽默飛世爾科技有限公司）。細胞株：SPC-A1人肺癌細胞，中國醫(yī)學科學院腫瘤研究所提供。檢測儀器：EUROStar II熒光顯微鏡（歐蒙醫(yī)學實驗診斷有限公司）、流式細胞儀（貝克曼庫爾特商貿有限公司）、PCR擴增儀和酶標儀（賽默飛世爾科技有限公司）以及高效液相色譜（HPLC）等。水煎中藥苦參，煎劑濃度為3 mg/ml。

1.2 方法

選取10只SD大鼠（雄、雌各5只）作為給藥組，灌服中藥苦參煎劑（150 ml/kg）。2次/d。另外選取10只SD大鼠（雄、雌各5只）作為對照組，灌服生理鹽水（150 ml/kg），2次/d。連續(xù)給藥3天后，行腹主動脈采血，分離血清，獲得含藥血清和空白血清。其中含藥血清需要接受有效成分和含量的鑒定，離心、取上清液，并進行等體積氯仿萃取，定容后進行高效液相色譜分析。在含藥血清，中苦參堿和氧化苦參堿的濃度相對較高

將SPC-A1人肺癌細胞（5×104/mL）的加入96孔板（每孔含培養(yǎng)液100 μL），在培養(yǎng)箱（37℃，5%CO2）中進行孵育。24 h后分為兩組，分別加入不同濃度的含藥血清和空包血清。在此基礎上，每孔加入生理鹽水，用以調整每孔細胞總體積。24 h后加入濃度為2 mg/mL的噻唑藍20 μL后，孵育4 h后去除上清液，使用酶標儀進行處理，測定吸光值，每個濃度平行測定3孔，計算平均吸光值，進而得到中藥苦參對于SPC-A1人肺癌細胞的抑制率。

2 結 果

2.1 含藥血清對于腫瘤細胞的生長抑制作用

給藥組，測得活細胞數(shù)為（491.44±28.62）×103/mL，生長抑制率為（42.41±11.25）%。對照組，測得活細胞數(shù)為（992.18±114.26）×103/mL，對比差異顯著（P＜0.05）。

2.2 不同濃度含藥血清對于腫瘤細胞的生長抑制作用

對比2.5%、5%、10%、15%以及20%濃度的含藥血清對于腫瘤細胞的生長抑制作用，見表1。

表1 不同濃度含藥血清對于腫瘤細胞的生長抑制作用分析（±s）

表1 不同濃度含藥血清對于腫瘤細胞的生長抑制作用分析（±s）

3含藥血清濃度（%） 活細胞數(shù)（×10/ml） 生長抑制率（%）2.5 904.24±76.52 10.14±2.52 5 681.62±62.18 16.87±3.04 10 517.72±44.82 39.95±5.85 15 449.23±35.51 53.39±4.74 20 419.62±25.56 62.29±5.43 P＜0.05

2.3 含藥血清和空白血清的腫瘤細胞周期分布分析（見表2）

表2 含藥血清和空白血清的腫瘤細胞周期分布分析結果對照（±s）

表2 含藥血清和空白血清的腫瘤細胞周期分布分析結果對照（±s）

組別 G0G1 S G2M給藥組 62.28±6.15 28.44±1.96 1.85±0.34對照組 46.24±3.55 39.64±2.97 15.69±1.42 P＜0.05

3 討 論

目前，中藥苦參提取物及其復方制劑在臨床疾病的治療中有著較為廣泛的應用，且獲得了良好的療效，其應用領域也在不斷拓展，并在抗腫瘤治療的研究中取得一定的進展。中藥苦參的抗腫瘤作用并不十分明確，可能存在著一定的風險性，則需要通過含藥血清試驗研究來予以驗證和判斷。

綜上所述，中藥苦參有效成分在抗腫瘤治療方面具有很高的應用價值，需要進一步開發(fā)和利用，這對于抗腫瘤治療的發(fā)展有著十分重要的意義。

[1]夏艷陽,李 艷.中藥苦參抗腫瘤作用研究進展[J].中醫(yī)藥臨床雜志,2014,26(01):91-92.

[2]邵明坤,范 青.苦參堿抗腫瘤作用研究的新進展[J].實用藥物與臨床,2014,17(06):756-759.