再生障礙性貧血患者外周血T細胞亞群的變化

麻鴻飛，季生吉

（遼寧撫順礦務局總醫(yī)院，遼寧 撫順 113008）

再生障礙性貧血患者外周血T細胞亞群的變化

麻鴻飛，季生吉

（遼寧撫順礦務局總醫(yī)院，遼寧 撫順 113008）

目的 探討再生障礙性貧血患者外周血T細胞亞群變化，旨在分析再生障礙性貧血患者與健康人群T細胞亞群的變化規(guī)律，為臨床診斷、治療提供理論依據(jù)。方法 選取本院接診再生障礙性貧血患者32例，與同期健康體檢人群32例作為對照組，于晨起重復空腹靜脈血，經(jīng)處理后，采用流式細胞儀檢測CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、Th/Ts。結果 再障組CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts胞測定結果低于健康對照組，CD3+CD8+測定結果高于健康對照組（P＜0.05）；治療后，再生組CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts測定結果顯著升高，CD3+CD8+測定結果顯著下降（P＜0.05）。結論 再生障礙性貧血患者外周血T細胞亞群表達失衡，通過測定T細胞亞群可由于再生障礙性貧血診斷和治療效果判定。

再生障礙性貧血；外周血T細胞亞群；變化

再生障礙性貧血是一種非常多見的造血系統(tǒng)疾病，關于該病的發(fā)生機制目前學界尚不明確，患者多表現(xiàn)為出血、貧血、低燒或者高燒等，同時伴隨有頭昏、走路乏力等。目前，學界公認免疫介導在造血功能抑制在再障發(fā)病中占據(jù)著非常重要的作用。T淋巴細胞及所產生的相關細胞因子作為免疫調節(jié)和造血過程中非常重要的部分，其能夠直接迅速地反應出機體變化[1]。為此，通過檢測T淋巴細胞亞群，觀察其變化規(guī)律，對再生障礙性貧血診斷有著非常重要的作用。鑒于此，本文選取再生障礙性貧血與健康人群，對其外周血T細胞亞群進行測定，分析兩組T細胞亞群變化，旨在為再生障礙性貧血的診斷、治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 自本院2013年1月～2015年12月接診再生障礙性貧血患者中選取32例，所有患者均符合《血液病診斷及療效標準（第三版）》[2]中再生障礙性貧血診斷標準，其中女11例，男21例，年齡15～62歲，平均年齡為（34.52±12.43）歲；其中19例慢性再生障礙性貧血，13例急性再生障礙性評學。另從同期體檢人群中選取32名健康人群作為對照組，其中女13名，男19名，年齡16～61歲，平均年齡（33.21±11.73）歲。兩組患者一般資料逐項比較，差異均無統(tǒng)計學意義，具有可比性。

1.2 方法 兩組患者均于晨起，空腹行靜脈血抽取2 ml，置入5 ml乙二胺四乙酸（EDTA）與肝素鈉抗凝試管內，充分搖勻，取材1 h內完成樣本處理。采用流式細胞儀行外周血T淋巴細胞亞群水平測定，主要測定CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、Th/Ts。每例樣本均同時準備兩支流式絕對計數(shù)管兩支上樣管，分別標記為A、B；運用移液器取20 μL BD Multitest CD3/CD8/CD8/CD4置入A管，同樣運用移液器取20 μL BD MultitestCD3/CD16+CD56/CD48/CD19置入B管；分別抽取50μL混合液以及未凝結的全血樣本置入到A、B兩管中；充分混合后置于避光處，放置15 min，向其中滴加經(jīng)過稀釋的1 X溶血素工作也450 μL，充分混合再次放置在避光處，靜置15 min，放入流式細胞儀內檢測。

1.3 治療方法 重癥再生障礙性貧血患者給予抗胸腺淋巴細胞球蛋白（ATG）、環(huán)胞素（CSA）聯(lián)合康力龍治療；普通再生障礙性貧血患者給予康力龍聯(lián)合環(huán)胞菌素或者丙酸睪丸酮治療。

1.4 統(tǒng)計學方法 本研究各組資料均運用統(tǒng)計學軟件SPSS15.0分析處理，計數(shù)資料以百分數(shù)和例數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗；計量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組T淋巴細胞亞群測定結果比較 再障組CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts測定結果與健康對照組比較較低（P＜0.05）；CD3+CD8+測定結果與健康對照組比較較高（P＜0.05），見表1。

表1 兩組T淋巴細胞亞群測定結果比較（x±s）

2.2 治療前后再障組患者T淋巴細胞亞群測定結果比較治療后，再生障礙性貧血患者CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts測定結果與治療前比較，有顯著升高（P＜0.05），CD3+CD8+測定結果與治療前比較，有顯著下降（P＜0.05），見表2。

表2 治療前后再障組患者T淋巴細胞亞群測定結果比較（x±s）

3 討論

隨著醫(yī)學技術的快速發(fā)展，實驗血液學、細胞生物學、免疫學等學科也呈現(xiàn)為快速發(fā)展，加之各個學科之間相互滲透、促進，使得醫(yī)學領域的發(fā)展突飛猛進。再生障礙性貧血

是一種較為多見的血液系統(tǒng)疾病，目前，關于該病的發(fā)病機制尚無統(tǒng)一定論，通常認為與造血微循環(huán)出現(xiàn)異常、造血干/祖細胞缺陷與免疫異常等相關[3]。近幾年來，關于再生障礙性貧血免疫異常的研究報道越來越多，尤其是關于T細胞免疫的報道和實驗更是成為了重點研究對象，不少學者認為再生障礙性貧血介導的骨髓造血功能衰竭，是一種自身免疫性疾病，其發(fā)病與T淋巴細胞亞群比例、數(shù)量失調有著非常直接的關聯(lián)[4]。

T淋巴細胞作為細胞免疫反應中最主要的效應細胞，同時還具備極不均一的異質性群體，不同的亞群所表現(xiàn)的功能和標志也有顯著差異。在正常人體中，T淋巴細胞總數(shù)、CD4+、CD8+細胞亞群兩者的比值和數(shù)量均控制在相應范圍內，并呈現(xiàn)為一個動態(tài)平衡的狀態(tài)下，可以說是機體免疫內環(huán)境穩(wěn)定的中心環(huán)節(jié)[5]。當T淋巴細胞數(shù)量出現(xiàn)異常變化時，CD4+、CD8+均會表現(xiàn)出不同程度的變化，或者呈現(xiàn)為上調，或者呈現(xiàn)為下調，這使得兩者比值也會發(fā)生相應的變化，這時即表明體內免疫功能異常，這與部分疾病的發(fā)生、進展均有直接聯(lián)系[6]。保證亞群分布平衡，可以說是維持免疫功能正常的重要基礎，再生障礙性貧血多表現(xiàn)為CD4+、CD8+兩種亞群失衡，并引起CD8+、Th1與Tc隨之發(fā)生相應改變。已有大量臨床報道證實[7]，再生障礙性貧血患者CD8+會有明顯增多，而CD4+呈現(xiàn)為顯著減少，兩者比值有明顯下降，這表明在再生障礙性貧血發(fā)病和進展中，CD8+參與免疫發(fā)病機制。國外有研究者[8]通過對再生障礙性貧血患者行骨髓活檢發(fā)現(xiàn)，患者骨髓中CD3+含量較高，認為T淋巴細胞具備增生或者直接浸潤骨髓時，CD4+會呈現(xiàn)為顯著升高，故在再生障礙性貧血造血功能抑制中，CD3+是非常重要的因素。上述資料均表示，再生障礙性貧血發(fā)病與發(fā)展中，T淋巴細胞均參與其中，而CD8+更是免疫分型中導致再障造血免疫受損的主要效應細胞。

本研究通過對比再生障礙性貧血患者與健康人群T淋巴細胞亞群變化，結果顯示，再生障礙性貧血患者CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts測定結果顯著低于對照組（P＜0.05）；CD3+CD8+測定結果高于健康對照組（P＜0.05）。這表明再生障礙性貧血患者CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts呈現(xiàn)為低表達，CD3+CD8+呈現(xiàn)為高表達，對再生障礙性貧血臨床診斷一定價值。另對比再生障礙性貧血患者治療前后T淋巴細胞亞群變化，結果顯示，再生障礙性貧血CD3+、CD3+CD4+、Th/Ts測定結果所顯著升高，CD3+CD8+有顯著下降，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。該結果表明，通過測定再生障礙性貧血患者T淋巴細胞亞群可用于治療效果判定。

綜上所述，T淋巴細胞亞群在再生障礙性貧血診斷、治療中均具有一定價值，值得推廣。

[1] 陸春偉,佟海俠,陸美言.再生障礙性貧血患者外周血淋巴細胞亞群和調節(jié)性T細胞的檢測及臨床意義[J].中國醫(yī)科大學學報,2010,59（10）:865-867.

[2] 章俏雷,方炳木,曲志剛,等.“益腎生血方”聯(lián)合西藥治療慢性再生障礙性貧血患者血清IFN-γ、IL-4和T細胞亞群的變化[J].中華中醫(yī)藥學刊,2015,33(1):40-42.

[3] 石秀珍,王會平,潘瑩,等.CD+4～+CD+25～Treg細胞和T細胞亞群評估再生障礙性貧血患者免疫狀態(tài)的對比研究[J].臨床薈萃,2015,29(6):628-632.

[4] 高鐵銘,付建珠,趙亞玲,等.再生障礙性貧血患者銅/鋅比對淋巴細胞亞群的影響[J].南昌大學學報(醫(yī)學版),2015,51（3）:44-47.

[5] 張婧瑤,許洪志,尹冬梅,等.再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征、急性髓系白血病患者CD8+T細胞亞群的變化及臨床意義[J].中國實驗血液學雜志,2013,20(1):203-208.

[6] 陸翔,王小超,李金洨,等.再生障礙性貧血患者IL-17、IFN-γ及T淋巴細胞亞群表達的研究[J].廣西醫(yī)學,2013,41(5):534-537.

[7] 張夢穎,馬杰,孫慧,等.低、中危骨髓增生異常綜合征和慢性再生障礙性貧血患者外周血淋巴細胞亞群分析及其對早期治療反應的影響[J].中國實驗血液學雜志,2014,21(2):377-381.

[8] 王良妥,張湘蘭,譚日標.T細胞亞群在再生障礙性貧血外周血的表達及臨床意義[J].海南醫(yī)學,2011,38(14):93-95.

10.3969/j.issn.1009-4393.2018.01.077