急慢性腎功能衰竭動(dòng)物模型研究進(jìn)展

何鵬飛+高敏+張婭

摘要：人類疾病動(dòng)物模型是現(xiàn)代中藥藥理藥效研究的重要方法和手段。近年來，急性腎功能衰竭（ARF）和慢性腎功能衰竭（CRF）動(dòng)物模型的建立方法不斷完善，不同的動(dòng)物模型均有其各自的特點(diǎn)及運(yùn)用范圍。筆者對(duì)近年來文獻(xiàn)中建立ARF和 CRF 動(dòng)物模型的操作方法、模型特點(diǎn)與臨床運(yùn)用進(jìn)行歸納和總結(jié)，以期為中醫(yī)藥研究者根據(jù)各自研究的側(cè)重點(diǎn)合理選用模型提供有益參考。

關(guān)鍵詞：急性腎功能衰竭（ARF）；慢性腎功能衰竭（CRF）；動(dòng)物模型；綜述

中圖分類號(hào)：R965.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1007-2349（2017）12-0080-05

中醫(yī)藥是中華傳統(tǒng)文化之瑰寶，近年來，隨著中醫(yī)中藥的廣泛運(yùn)用，腎衰竭患者看到了治療自身疾病的希望。中醫(yī)藥治療腎衰竭有悠久歷史，古代醫(yī)學(xué)典籍中記載頗多，用現(xiàn)代科學(xué)方法闡明中醫(yī)藥治療腎衰竭的科學(xué)內(nèi)涵，對(duì)中醫(yī)藥學(xué)的發(fā)展具有極大的促進(jìn)作用。其中，人類疾病動(dòng)物模型是現(xiàn)代中藥藥理藥效研究的重要方法和手段。筆者對(duì)近年來文獻(xiàn)中建立ARF和 CRF 動(dòng)物模型的操作方法、模型特點(diǎn)與臨床運(yùn)用進(jìn)行歸納和總結(jié)，以期為中醫(yī)藥研究者根據(jù)各自研究的側(cè)重點(diǎn)合理選用模型，明確中醫(yī)藥治療疾病的科學(xué)內(nèi)涵提供有益參考。

當(dāng)各種病因引起腎功能嚴(yán)重障礙時(shí)，人體內(nèi)環(huán)境就會(huì)發(fā)生紊亂，其主要表現(xiàn)為代謝產(chǎn)物在體內(nèi)蓄積，水、電解質(zhì)和酸堿平衡紊亂，并伴有尿量和尿質(zhì)的改變以及腎臟內(nèi)分泌功能障礙引起一系列病理生理變化，稱之為腎功能衰竭。根據(jù)發(fā)病的急緩和病程長(zhǎng)短分為：急性腎功能衰竭（acute renal failure，ARF）和慢性腎功能衰竭（chronic renal failure，CRF）。動(dòng)物模型是有效認(rèn)識(shí)疾病發(fā)生，發(fā)展規(guī)律和研究防治措施的重要途徑之一。近年來隨著實(shí)驗(yàn)研究的不斷深入，腎功能衰竭實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的造模方法有了長(zhǎng)足發(fā)展。筆者對(duì)近年來建立腎功能衰竭實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的研究方法做一綜述。

1ARF動(dòng)物模型

急性腎功能衰竭（ARF）是指由于各種原因引起的雙腎泌尿功能在短期內(nèi)急劇障礙，導(dǎo)致代謝產(chǎn)物在體內(nèi)迅速積聚，水電解質(zhì)和酸堿平衡紊亂，出現(xiàn)氮質(zhì)血癥和代謝性酸中毒，并由此發(fā)生的機(jī)體環(huán)境嚴(yán)重紊亂的臨床綜合征[1]。目前使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型種類很多，從機(jī)制上可分為缺血性ARF模型和中毒性ARF模型。

1.1缺血性ARF模型缺血性ARF模型，是通過機(jī)械方法或者藥物方法，造成腎臟缺血，最終導(dǎo)致腎小管上皮細(xì)胞損傷，從而使動(dòng)物發(fā)生急性腎衰竭臨床癥狀。

制備缺血性ARF模型的方法包括：擠壓法、腎動(dòng)脈血流阻斷法、輸尿管結(jié)扎法、腎缺血/再灌注法、部分結(jié)扎腹主動(dòng)脈法、甘油法、油酸法等。制備模型常用動(dòng)物有大鼠、小鼠、豚鼠、家兔、犬和豬等。

1.1.1擠壓性ARF模型該模型制備的方法[2]：采用家兔，通過禁食、放血和擠壓，造成局部水腫，導(dǎo)致全身血容量不足，腎小球灌注不足，出現(xiàn)血漿尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）上升，尿量、肌酐清除率（Ccr）下降等現(xiàn)象，從而復(fù)制ARF模型。

擠壓性造模，屬于單一因素造模法，由于動(dòng)物間存在個(gè)體差異，且作用力難以控制，故而穩(wěn)定性差，難以建立典型的ARF動(dòng)物模型，目前實(shí)驗(yàn)研究應(yīng)用較少。

1.1.2血流阻斷法致ARF陳寧等[3]采用新西蘭兔，靜脈注射烏拉坦進(jìn)行全身麻醉，分離兩側(cè)腎動(dòng)脈，并進(jìn)行雙側(cè)腎動(dòng)脈不完全結(jié)扎，造成急性腎缺血。阻斷腎血流20min后，恢復(fù)腎臟血流再灌注，從而制備缺血性ARF模型。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物伴隨著雙側(cè)腎動(dòng)脈不全結(jié)扎，尿量明顯減少，血清肌酐水平顯著升高，血鉀呈升高趨勢(shì)，并出現(xiàn)代謝性酸中毒，符合ARF臨床表現(xiàn)。

腎動(dòng)脈血流阻斷法建立的動(dòng)物模型表現(xiàn)了功能性AR F的多重特點(diǎn)，且臨床及病理上較易觀察，從病因和對(duì)腎臟的損傷上也符合臨床實(shí)際。是缺血性ARF模型常用的方法。

1.1.3輸尿管結(jié)扎法致ARF黃彥彬[4]采用Wistar雄鼠，腹腔注射水合氯醛（300mg/kg）進(jìn)行麻醉，游離腎臟和輸尿管，結(jié)扎左側(cè)輸尿管，制備ARF模型。術(shù)后14、21、28 d，模型組血清尿素氮和肌酐與假手術(shù)組比較，均有明顯升高。術(shù)后14 d模型組大鼠結(jié)扎側(cè)左腎體積擴(kuò)大，大于對(duì)側(cè)腎臟，腎盂和腎盞高度擴(kuò)張。病理學(xué)檢查顯示腎小管呈囊性擴(kuò)張，部分區(qū)域可見腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞明顯減少，間質(zhì)成纖維細(xì)胞大量增生，膠原纖維形成。

有研究顯示[5]，采用體重250～350 g 豚鼠，雌雄兼用，在2%戊巴比妥鈉（30 mg/kg）腹腔內(nèi)注射麻醉下，結(jié)扎雙側(cè)輸尿管，術(shù)后24 h 血清尿素氮和肌酐明顯升高，病理學(xué)亦證實(shí)符合ARF的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

輸尿管結(jié)扎，可造成尿路梗阻，腎盂積水，腎間質(zhì)壓力升高，腎小球囊內(nèi)壓升高，引起腎小球有效濾過壓下降，從而導(dǎo)致ARF的形成。結(jié)扎輸尿管造成的ARF動(dòng)物模型，操作簡(jiǎn)單，費(fèi)時(shí)短，創(chuàng)傷小。

1.1.4缺血/再灌注致ARF模型急性缺血/再灌注ARF模型的制備[6-7]：動(dòng)物麻醉后，切除右腎。鈍性分離左腎動(dòng)脈，用無創(chuàng)動(dòng)脈夾夾閉左腎動(dòng)脈45min，腎臟由鮮紅色逐漸變?yōu)榘导t色。然后松開動(dòng)脈夾，腎臟逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)檎５募t色，認(rèn)為再灌注成功。

腎缺血后由于灌注不足導(dǎo)致缺氧，代謝產(chǎn)物堆積，導(dǎo)致腎小管上皮細(xì)胞損傷，逐漸發(fā)展為細(xì)胞凋亡和壞死，既急性腎小管壞死，其基本的病理機(jī)制主要包括血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌的損傷、炎癥反應(yīng)、氧自由基產(chǎn)生、補(bǔ)體免疫系統(tǒng)的激活、小管上皮細(xì)胞的損傷、間質(zhì)纖維化的逐漸形成[8]。

該模型采用外科手術(shù)使模型動(dòng)物腎臟血供受阻，可用于探討ARF發(fā)病機(jī)制及氧自由基清除劑對(duì)ARF防治作用方面的研究。

1.1.5低灌注性ARF模型葉志斌等[9-10]通過部分結(jié)扎腹主動(dòng)脈的方法，壓迫腹主動(dòng)脈，使腎臟持續(xù)低灌注、缺血，導(dǎo)致腎小管上皮細(xì)胞損傷，誘導(dǎo)產(chǎn)生ARF模型。

由于腎臟的持續(xù)低灌注為臨床上ARF常見誘發(fā)因素，而傳統(tǒng)的腎動(dòng)脈夾閉引起的腎缺血與持續(xù)低灌注致在發(fā)病機(jī)制上存在差異，因此，該方法建立的低灌注模型具有重要的臨床意義。

1.1.6甘油致ARF模型張春梅等[11]采用日本大耳白兔肌肉注射50%甘油（10 mL/kg）的方法誘導(dǎo)形成ARF模型。模型組血Cr、BUN 均高于同時(shí)間點(diǎn)正常對(duì)照組（P<0.01），病理學(xué)檢查可見腎小管上皮細(xì)胞腫脹，部分管腔閉塞、壞死等病理改變。證實(shí)ARF模型成功。

趙楠[12]用SD大鼠，禁水24h，體重減輕10%的大鼠肌肉注射50%甘油生理鹽水（10 ml/kg）制備ARF模型。模型組大鼠注射甘油生理鹽水1小時(shí)后可見腎小球輕微充血腫脹，24小時(shí)可見腎小球系膜細(xì)胞腫脹、空泡變性，大量近端小管和遠(yuǎn)端小管上皮細(xì)胞壞死、崩解。24小時(shí)血肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）及磷酸肌酸激酶（CK）均明顯高于對(duì)照組（P<0.01）。

甘油作為高滲性物質(zhì)，局部肌注后，局部肌肉變性壞死及血管內(nèi)溶血，釋放肌紅蛋白和血紅蛋白，二者可使腎血管收縮，腎小球出入球小動(dòng)脈均發(fā)生收縮，導(dǎo)致腎血流量和腎小球?yàn)V過率下降，引起腎臟缺血而使腎小管受到損害，導(dǎo)致腎小管損傷。同時(shí)，肌紅蛋白和血紅蛋白可分解為高鐵血紅素，對(duì)腎小管產(chǎn)生毒性作用[13-14]。

甘油誘導(dǎo)的ARF模型，兼有腎缺血及內(nèi)源性毒性物質(zhì)對(duì)腎臟損傷的雙重作用[15]，且該模型制備簡(jiǎn)單易操作，模型穩(wěn)定，動(dòng)物存活率高。

1.1.7油酸誘導(dǎo)ARF模型吳廣禮等[16]選用Wistar雄鼠，通過左腎動(dòng)脈注射油酸（0.15ml/kg）的方法制備ARF模型。模型組注射油酸后24h，病理檢查顯示：腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞核固縮、核碎裂、核溶解，線粒體腫脹空化，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，內(nèi)皮細(xì)胞崩解，基底膜部分破壞、消失。

油酸是一種具有較強(qiáng)毒性作用的脂肪酸，左腎動(dòng)脈注射油酸后，引起腎小管上皮細(xì)胞腫脹、壞死，間質(zhì)水腫，腎內(nèi)血管缺血，腎微循環(huán)嚴(yán)重障礙，腎臟排泄功能衰竭，形成ARF[17]。

此動(dòng)物模型適合于腎微循環(huán)的研究，模擬人類起源于腎微循環(huán)障礙的缺血性ARF，為了解ARF時(shí)腎微循環(huán)的改變提供了有效載體。

1.2中毒性ARF模型通過肌肉、靜脈或者腹腔注射的方式，將具有腎毒性的試劑注入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)，在體內(nèi)經(jīng)過一系列代謝最終蓄積于腎小管上皮細(xì)胞。由于其細(xì)胞毒性效應(yīng)，最終導(dǎo)致腎小管上皮細(xì)胞損傷及壞死，誘導(dǎo)產(chǎn)生ARF。

制備中毒性ARF模型的方法包括：順鉑誘導(dǎo)法、氨基糖苷類誘導(dǎo)法、內(nèi)毒素介導(dǎo)法、氯化汞誘導(dǎo)法。

1.2.1順鉑誘導(dǎo)ARF模型順鉑腎毒性可導(dǎo)致腎小管細(xì)胞死亡，包括細(xì)胞壞死與凋亡，高濃度導(dǎo)致腎小管細(xì)胞壞死，低濃度誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[18]。

順鉑誘導(dǎo)的ARF模型被認(rèn)為是較為典型的急性腎小管壞死模型，采用一次性注射大劑量順鉑的方式，可以誘導(dǎo)急性腎損傷動(dòng)物模型，表現(xiàn)為腎衰竭，腎小球上皮細(xì)胞水腫、壞死和脫落等病理改變。

順鉑誘導(dǎo)的ARF模型的給藥途徑和動(dòng)物類型多樣。因?qū)嶒?yàn)者注射劑量和動(dòng)物種類選擇的不同而存在一定差異。李景山[19]選用C57BL/6小鼠，通過一次性腹腔注射順鉑（15 mg/kg）的方式復(fù)制ARF模型。董小君等[20]報(bào)道采用貴州小型豬一次性腹腔注射4 mg/kg順鉑可建立穩(wěn)定而又典型的ARF模型。陳小波等[21]報(bào)道采用雄性SD大鼠，以順鉑6 mg/kg單次尾靜脈注射，造模第4 天開始 Scr、BUN 顯著上升，腎小球?yàn)V過率顯著降低，從而成功復(fù)制成腎毒性ARF模型。

此類模型可用于順鉑腎毒性作用機(jī)制及相關(guān)防治措施的研究。

1.2.2氨基糖苷類誘導(dǎo)ARF模型慶大霉素等氨基糖苷類抗生素進(jìn)入人體后，在腎小管蓄積，造成腎小管上皮細(xì)胞及溶酶體等微細(xì)胞器的功能障礙，最終導(dǎo)致腎小管損傷，發(fā)生急性腎功能衰竭。

向麗等[22]選用Wistar雄鼠，腹腔注射慶大霉素140 mg/kg，連續(xù)注射7 d，建立慶大霉素ARF模型。模型組大鼠24h 尿量、尿NAG酶活性、Scr 和BUN均有明顯升高。

急性腎小管壞死是ARF的主要病因。氨基糖苷類誘導(dǎo)的ARF模型，是當(dāng)今公認(rèn)的腎毒性ARF實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停芎芎玫啬M腎小管壞死造成的急性腎衰竭，適用于急性腎小管壞死機(jī)制、防治腎小管壞死以及氨基糖苷類抗生素致ARF 的藥物防治方面的實(shí)驗(yàn)研究。

1.2.3內(nèi)毒素介導(dǎo)的ARF模型內(nèi)毒素可引發(fā)彌漫性血管內(nèi)凝血，而腎小球毛細(xì)血管內(nèi)廣泛形成的微血栓阻斷了腎小球毛細(xì)血管血流，從而導(dǎo)致腎小球?yàn)V過率降低，這是內(nèi)毒素介導(dǎo)急性腎功能衰竭的首要機(jī)理[23]。

王華等[24]報(bào)道家兔一次性靜脈注射大腸桿菌O111B4內(nèi)毒素生理鹽水溶液（100μg/kg），測(cè)定肌酐、尿素氮、腎衰指數(shù)、鈉排泄率和內(nèi)生肌酐清除率等腎功能指標(biāo)，顯示該試驗(yàn)動(dòng)物模型發(fā)生嚴(yán)重腎功能衰竭。聶祥智等[25]采用C57BL/6小鼠一次性腹腔注射大腸桿菌內(nèi)毒素脂多糖（LPS）15mg/kg的方法制備內(nèi)毒素型ARF模型。腎功能及腎臟病理檢測(cè)顯示，模型組小鼠肌酐、尿素氮值均明顯升高，腎組織出現(xiàn)腎小管擴(kuò)大、空泡形成等病理改變。

內(nèi)毒素性急性腎衰竭是目前感染性休克患者死亡的原因之一，目前臨床仍舊缺乏有效的藥物進(jìn)行治療，因此，此類模型的成功應(yīng)用，對(duì)于內(nèi)毒素性急性腎衰竭的機(jī)理研究、治療藥物的研發(fā)等方面都有積極意義。

1.2.4氯化汞誘導(dǎo)ARF模型汞離子經(jīng)腎小球率過后被腎小管上皮細(xì)胞重吸收，并在細(xì)胞內(nèi)積聚，與細(xì)胞內(nèi)的巰基和二硫基等結(jié)合，影響細(xì)胞酶活性，并使蛋白質(zhì)凝固，造成重金屬鹽導(dǎo)致的中毒性腎小管損傷，臨床出現(xiàn)ARF。

王順蓉等[26]報(bào)道家兔肌肉加壓注射1% 氯化汞1ml/kg，造模24h，測(cè)定Cr、BUN、MDA含量、SOD活力及腎臟病理檢測(cè)，結(jié)果表明造模成功，動(dòng)物形成ARF。

本模型操作簡(jiǎn)單易行，創(chuàng)傷小，病變穩(wěn)定，是重金屬致急性腎小管壞死病變的典型模型，并且適用于大鼠和小鼠。但是氯化汞屬于強(qiáng)腎毒性物質(zhì)，劑量掌握不當(dāng)就會(huì)造成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的死亡，而汞離子對(duì)機(jī)體的傷害不僅僅局限于腎臟，還會(huì)影響機(jī)體的其他組織器官[27]。

2CRF動(dòng)物模型

慢性腎功能衰竭（CRF）是一種常見的臨床綜合征，它由各種原因引起腎臟損害并進(jìn)行性惡化、造成腎單位嚴(yán)重破壞、腎實(shí)質(zhì)不可逆性逆轉(zhuǎn)的損害，致使機(jī)體在排泄代謝產(chǎn)物和調(diào)節(jié)水電解質(zhì)及酸堿平衡等方面發(fā)生紊亂[28]。

目前使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型主要可分為腎毒性CRF模型和腎切除CRF模型。

2.1腎毒性CRF模型通過肌肉、靜脈或者腹腔注射的方式，將具有腎毒性的試劑注入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)，在體內(nèi)經(jīng)過一系列代謝最終蓄積于腎臟不同部位。由于其細(xì)胞毒性效應(yīng)，引起腎臟組織的病理改變。腎臟的實(shí)質(zhì)損害，隨病程進(jìn)展，逐步誘導(dǎo)產(chǎn)生CRF。

腎毒性CRF模型主要包括：嘌呤霉素模型、阿霉素模型、腺嘌呤模型。

2.1.1嘌呤霉素CRF模型、嘌呤霉素氨基核苷（puromycin aminonucleoside，PAN）對(duì)腎臟足細(xì)胞具有特異性損害，可以引起足細(xì)胞的損傷和凋亡，并損害腎小球?yàn)V過膜的負(fù)電荷屏障，導(dǎo)致腎小球?yàn)V過屏障受損，產(chǎn)生大量蛋白尿。隨著病程的進(jìn)展，形成微小病變腎病（minimal change nephrotic syndrome，MCNS）和局灶節(jié)段性腎小球硬化（focal segmental glomerulosclerosis，F(xiàn)SGS）樣病變，最終誘發(fā)CRF的形成[29]。

PAN腎病大鼠模型，臨床主要表現(xiàn)為大量蛋白尿，給藥方式包括皮下注射、腹腔注射、尾靜脈注射和頸靜脈注射四種。

董晞等[30]選用Wistar大鼠，用10% 水合氯醛（0.33g/kg）麻醉，行頸靜脈插管術(shù)緩慢推注PAN生理鹽水溶液（40 mg/kg），術(shù)后第13 天、16 天、19 天尾靜脈追加PAN生理鹽水溶液（5 mg/kg），建立PAN腎病大鼠模型。張夢(mèng)歡[31]采用給SD大鼠單次腹腔注射150 mg/kg PAN生理鹽水溶液（20 mg/mL）的方法制備PAN腎病模型，注射后第三天開始，模型組尿蛋白開始升高，腎組織病理檢查顯示造模第10天時(shí)，模型組腎小管明顯擴(kuò)張，腎間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤，腎小管細(xì)胞水腫，泡沫化，并且有大量蛋白管型。

PAN腎病動(dòng)物模型，由于其臨床及病理表現(xiàn)特異、造模方法簡(jiǎn)單，是研究MCNS和FSGS病理損害、發(fā)生機(jī)制及藥物干預(yù)等的理想實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。

2.1.2阿霉素CRF模型阿霉素（Adriamycin，ADR）具有腎毒性，可使腎臟近曲小管上皮細(xì)胞受損，脫落的小管上皮細(xì)胞與管腔內(nèi)的蛋白質(zhì)及其他細(xì)胞成分構(gòu)成管型，堵塞管腔，引起腎小管內(nèi)壓增高，加重腎損傷，最終形成 CRF。目前多采用靜脈注射阿霉素和單側(cè)腎摘除加術(shù)后尾靜脈注射阿霉素的方法制備CRF模型。

張媛媛[32]選用BALB/C小鼠，通過首次靜脈注射10mg/kg ADR，2周后再重復(fù)注射同等劑量ADR的方法制備阿霉素腎病模型，與正常對(duì)照小鼠相比，24小時(shí)尿蛋白、血肌酐、尿素都有明顯的增加，血清白蛋白顯著降低，并出現(xiàn)典型的FSGS表現(xiàn)。施嵐等[33]報(bào)道SD大鼠單側(cè)腎切除2周后，尾靜脈注射ADR3mg/kg，制備阿霉素腎病模型，與對(duì)照組相比，模型組大鼠血尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）、24h尿蛋白量、腎小球及腎小管病變積分均顯著升高（P<0.01）。

阿霉素本身具有較強(qiáng)的毒副作用，有研究[34]指出靜脈注射時(shí)的次數(shù)及劑量對(duì)腎臟病變程度都會(huì)有影響。另外，由于建立模型所選用的動(dòng)物種類、品系的差異，對(duì)實(shí)驗(yàn)也會(huì)產(chǎn)生影響。如BALB/C、129/SvJ系小鼠對(duì)阿霉素敏感，而其他品系小鼠對(duì)阿霉素腎毒性作用具有抵抗性[35]。

單側(cè)腎摘除加術(shù)后尾靜脈注射阿霉素的方法可以降低阿霉素的毒副作用，有研究[36]指出此方法較二次尾靜脈注射阿霉素，腎功能及病理改變更為典型穩(wěn)定，效果更佳。

阿霉素腎病模型可用于改善蛋白尿、低蛋白血癥，降低腎小管壓力以及減輕腎小管上皮細(xì)胞損傷的藥物開發(fā)、機(jī)制研究及藥效學(xué)研究。研究人員應(yīng)根據(jù)自身需求，合理選擇的建立方法。

2.1.3腺嘌呤CRF模型腺嘌呤通過黃嘌呤氧化酶的作用生成極難溶于水的2，8-二羥基腺嘌呤，后者沉積于腎小球和腎間質(zhì)部位，逐漸形成肉芽腫并發(fā)生炎癥反應(yīng)，堵塞腎小管腔而引起相應(yīng)的腎小管腔呈囊狀擴(kuò)張。由于腎小管的堵塞，引起腎小管梗阻，影響氮質(zhì)化合物的排泄，導(dǎo)致氮質(zhì)血癥，毒素蓄積及電解質(zhì)和氨基酸代謝紊亂，隨病程進(jìn)展，腎單位大量喪失進(jìn)而導(dǎo)致腎功能衰竭。

腺嘌呤誘導(dǎo)的大鼠CRF模型，方法簡(jiǎn)便，病程穩(wěn)定，表現(xiàn)典型。模型大鼠多出現(xiàn)明顯的毛色干枯、豎毛蜷縮、弓背畏寒等體征。腎臟呈灰白色，增大明顯，表面可見大量白色顆粒密集分布，質(zhì)地堅(jiān)實(shí)，包膜與腎組織結(jié)合不緊密[37]。

腺嘌呤劑量的大小和攝入時(shí)間的長(zhǎng)短是模型制備的關(guān)鍵因素。連續(xù)高劑量攝入腺嘌呤可使大鼠腎功能急劇惡化，死亡率高，不符合臨床CRF發(fā)病特點(diǎn)。小劑量攝入腺嘌呤，腎功能惡化緩慢，臨床相似度高，但需要較長(zhǎng)的造模時(shí)間。

連琦等[38]通過研究認(rèn)為250mg·kg-1·d-1腺嘌呤灌胃5周可成功構(gòu)建以腎間質(zhì)纖維化為主，由輕到重逐漸進(jìn)展且具備多種并發(fā)癥的慢性腎功能衰竭大鼠模型。劉洪彥等[39]報(bào)道以腺嘌呤150mg·kg-1·d-1灌胃12周，可成功構(gòu)建以腎間質(zhì)纖維化病變?yōu)橹鳎邆涠喾NCRF并發(fā)癥，臨床相似度高的腎衰模型。陳俊蓉等[40]學(xué)者認(rèn)為間斷隔日灌胃腺嘌呤的方式可能是制備此類模型的良好方法。

2.2腎切除CRF模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行腎臟部分切除手術(shù)后，殘存的腎單位出現(xiàn)高灌注、高濾過和高壓力，進(jìn)而導(dǎo)致腎小球硬化和剩余腎單位的進(jìn)一步破壞，最終發(fā)展為慢性腎衰竭。

5/6腎臟切除法是目前制備CRF模型較為經(jīng)典的外科手術(shù)方法。孫海艷[41]認(rèn)為5/6腎臟切除法能較好掌握腎切除量，既避免了7/8或其他腎切除過度致大鼠急性腎衰竭死亡，又避免了腎切除過少導(dǎo)致模型造模不成功。余柯娜等[42]通過比較SD大鼠與C57小鼠5/6腎切除CRF模型的異同，在成功建立模型的同時(shí)，發(fā)現(xiàn)兩者慢性腎衰疾病進(jìn)程存在差異。此研究對(duì)探索小鼠動(dòng)物模型，根據(jù)不同動(dòng)物模型出現(xiàn)的腎衰平穩(wěn)期合理選擇動(dòng)物模型提供了有利參考。劉海峰[43]應(yīng)用腹腔鏡技術(shù)，采取5/6腎切除的方法，成功建立具有重復(fù)性高，易于復(fù)制，術(shù)后腎功能逐漸減退等特點(diǎn)的小型豬CRF模型。該研究對(duì)CRF研究領(lǐng)域新型模式動(dòng)物的發(fā)現(xiàn)與運(yùn)用具有重要意義。

5/6腎切除模型能成功模擬人慢性腎衰的病理發(fā)生發(fā)展過程，沙朝暉等[44]研究發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)5/6腎切除后，系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)增生，腎小球硬化，腎小管灶狀萎縮，間質(zhì)纖維化，表現(xiàn)出與人類腎臟纖維化相一致的病理過程。

3結(jié)語

上述為建立ARF動(dòng)物模型和CRF動(dòng)物模型的各種常用方法。各種方法在可行性、操作難易程度、模型病理特征等方面各有特點(diǎn)，在建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型時(shí)，需根據(jù)研究的側(cè)重點(diǎn)，合理選用模型。

由于受到多重因素的影響，每一種模型不能做到與臨床疾病特點(diǎn)完全吻合，所出現(xiàn)腎損傷的程度也輕重不等。因此，進(jìn)一步探索更加符合人類急、慢性腎功能衰竭病理變化特點(diǎn)，尋求統(tǒng)一、穩(wěn)定、簡(jiǎn)便的動(dòng)物模型仍是目前亟待解決的重要問題。

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（收稿日期：2017-11-06）