腫瘤患者細胞免疫功能的影響因素分析*

楊偉 賀彬彬

(重慶市墊江縣人民醫(yī)院醫(yī)學檢驗科，重慶 408300)

腫瘤患者細胞免疫功能的影響因素分析*

楊偉 賀彬彬

(重慶市墊江縣人民醫(yī)院醫(yī)學檢驗科，重慶 408300)

目的：旨在探討各相關因素對腫瘤患者的細胞免疫功能的影響。方法采用我院檢驗科的BD FACSCantoⅡ流式細胞儀分析2016年6月至2017年4月期間67例肺癌、胃癌及結直腸癌腫瘤患者體內CD4+、CD8+細胞計數(shù)及CD4+/CD8+，將CD4+細胞計數(shù)或CD4+/CD8+低于正常范圍最低值的患者定義為其細胞免疫功能低下，使用SPSS19.0統(tǒng)計分析軟件全方位分析各相關因素與CD4+、CD8+細胞計數(shù)、CD4+/CD8+及細胞免疫功能低下之間的關系，最后客觀地討論出可能會受到影響的相關因素。結果男性及年齡≤60歲的患者的CD4+、CD8+細胞計數(shù)和CD4+/CD8+比值均高于女性及>60歲的患者，且總蛋白(Total protein，TP)降低組、白蛋白(Albumin，ALB)降低組、血紅蛋白(Hemoglobin，HGB)降低組及癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen，CEA)升高組的CD4+、CD8+細胞計數(shù)和CD4+/CD8+比值均低于各分組的正常組，其中性別組、TP組及CEA組的細胞計數(shù)具有顯著性差異(P<0.05)；單因素分析的細胞免疫功能低下的患者中，CEA升高組的比例低于CEA正常組，其差異具有顯著性(P<0.05)；但在多因素分析中并無具有顯著差異性的相關因素(P>0.05)。結論隨時關注患者營養(yǎng)狀況并及時進行糾正能有效地保護患者的細胞免疫功能，這也在臨床的抗腫瘤免疫過程中發(fā)揮著重要作用。

腫瘤患者；細胞免疫功能；影響因素

當前我國腫瘤的發(fā)病率和死亡率仍處于極其嚴峻的形勢中，近幾年的日益增長趨勢讓醫(yī)學界高度重視對抗腫瘤治療的研究。諸多研究均表明腫瘤的發(fā)生發(fā)展、預后等環(huán)節(jié)與機體的免疫狀態(tài)都息息相關，所以臨床上針對腫瘤患者細胞免疫狀態(tài)的評估與測定對掌握病情、抗腫瘤治療等具有重要意義[1]。既往研究報道，腫瘤患者的細胞免疫功能常常呈現(xiàn)低下狀態(tài)[2]，臨床上常通過檢測患者體內的CD4+、CD8+細胞計數(shù)以及CD4+/CD8+來直接反映腫瘤患者的細胞免疫功能[3]。現(xiàn)通過分析腫瘤患者的部分臨床因素及檢測的一些常規(guī)指標與CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值間的關系，探討各相關因素對腫瘤患者的細胞免疫功能的影響，為臨床上腫瘤的治療過程中能及時發(fā)現(xiàn)并糾正患者的細胞免疫狀態(tài)起提示作用。

1 臨床資料與方法

1.1 研究對象

選取2016年6月至2017年4月到我院中醫(yī)腫瘤科進行住院治療的腫瘤患者67例，其中男性26名，女性41名，60歲以上32名，60歲以下35名，平均年齡57歲，總蛋白正常38名，總蛋白降低29名，其他詳見表1。納入標準為患者需要具有完善的臨床資料且完成了血常規(guī)、肝功及癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen，CEA)的檢測，同時剔除患有能影響細胞免疫功能的基礎性疾病(如糖尿病、高血壓、結核等)，以及在細胞免疫功能檢測前未使用過免疫調節(jié)劑、激素等藥物，最后經篩選得到這67例樣本。

1.2 儀器與試劑

本研究全程使用美國Becton Dickinson公司生產的BD FACSCantoⅡ流式細胞儀。檢測CD4+、CD8+細胞計數(shù)所用試劑為淋巴細胞亞群檢測試劑和BD Trucount絕對計數(shù)管。當全血加入到試劑中時，試劑中熒光標記的抗體會和白細胞表面抗體特異性結合，在采集時，細胞通過激光束使激光散射，被染色的細胞就會發(fā)出熒光。這些被熒光檢測到的散射光和熒光信號提供了關于細胞大小、內部復雜程度和相對熒光強度等信息。一個有著精確體積的樣本在BD Trucount絕對計數(shù)管中被直接染色。管中低壓凍干的絮狀沉淀物被溶解，釋放出已知數(shù)量的熒光微球。在分析過程中，通過比較細胞事件數(shù)和微球事件數(shù)可以確定樣本陽性細胞的絕對數(shù)量。

1.3 方法

患者在入院完善臨床資料及各種化驗檢查后采集全血標本，應用BD FACSCanto Ⅱ流式細胞儀檢測全血中的CD4+、CD8+細胞計數(shù)以及CD4+/CD8+，同時收集相關檢查的結果，按性別、分段年齡、總蛋白(Total protein，TP)、白蛋白(Albumin ，ALB)、血紅蛋白(Hemoglobin，HGB)、癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen，CEA)的水平進行分組。

1.4 統(tǒng)計學處理

本研究全程使用SPSS13.0軟件進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析，采用t檢驗對各組間的CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的平均值進行組內分析比較；將CD4+細胞計數(shù)或CD4+/CD8+低于正常范圍最低值的患者定義為其細胞免疫功能低下，再通過卡方檢驗對細胞免疫功能低下的組進行組內比較。為避免各種因素的相互影響，再應用Logistic回歸分析對細胞免疫功能低下的分組進一步進行組間比較。將P值<0.05判定為其比較差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 腫瘤患者的性別、年齡、TP高低、白蛋白高低、血紅蛋白高低與細胞免疫功能的關系

此次研究中的CD4+、CD8+細胞計數(shù)及CD4+/CD8+比值參考我院檢驗科的正常值范圍，分別為550-1440個·L-1、320-1250個·L-1、0.71-2.87。分析統(tǒng)計結果顯示，男性腫瘤患者CD4+、CD8+細胞計數(shù)顯著高于女性(P<0.05)，這提示男性腫瘤患者的細胞免疫功能明顯好于女性患者的細胞免疫功能；腫瘤患者小于60歲的CD4+、CD8+細胞計數(shù)顯著性高于大于60歲的腫瘤患者(P<0.05)，這提示小于60歲的患者的細胞免疫功能明顯好于大于60歲的腫瘤患者；總蛋白降低的腫瘤患者的CD4+、CD8+細胞計數(shù)明顯低于總蛋白正常的腫瘤患者(P<0.05)，這提示當總蛋白水平降低的時候，影響了患者的細胞免疫功能，具體詳見表1。

2.2 癌胚抗原CEA的高低與細胞免疫功能之間的關系

將CD4+細胞計數(shù)或CD4+/CD8+低于正常范圍最低值的患者定義為其細胞免疫功能低下，將CEA分為正常組和升高組，再將各組分為細胞免疫功能低下組和細胞免疫功能正常組。對各分組進行卡方檢驗，由統(tǒng)計分析結果顯示，CEA正常組細胞免疫功能低下與CEA升高組的細胞免疫功能比差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，且CEA水平升高組明顯低于正常組，具體見表2。

表1 按不同標準分組后CD4+、CD8+、CD4+/CD8+計數(shù)

注：與女性組相比，男性組CD4+、CD8+的值明顯偏高(P<0.05)，與大于60歲以上組相比，小于60歲組的CD4+、CD8+的值明顯偏高(P<0.05)，與白蛋白降低組相比，白蛋白正常組CD4+、CD8+的值明顯偏高(P<0.05)。

表2 腫瘤患者CEA升高與正常時細胞免疫功能低下的情況與比較(例)

注：與CEA正常組相比，*P<0.05。

3 討論

在機體的抗腫瘤免疫過程中，由T細胞介導的特異性免疫起著主要作用，各T細胞亞群發(fā)揮著其不同的細胞免疫功能，其中發(fā)揮主導作用的為CD4+、CD8+這兩類T細胞。CD4+T細胞，稱輔助性T細胞[4]，對Tc、Ts、B等免疫細胞均具有輔助作用，可協(xié)助機體完成抗腫瘤免疫，不僅如此，CD4+T細胞在腫瘤發(fā)生的早期還可以起到免疫監(jiān)視的作用；CD8+T細胞，稱細胞毒性T細胞，能高效殺傷腫瘤細胞，但異常增多后會抑制機體的免疫應答。當兩種細胞數(shù)量或比例失衡時，其細胞免疫功能便會出現(xiàn)異常。

有研究表明，不同腫瘤的細胞免疫功能變化會有所不同，但常見的是CD4+和(或)CD4+/CD8+的降低，CD8+的升高，患者表現(xiàn)為細胞免疫功能的低下[5-6]。其中可能影響其細胞免疫功能的因素有很多，患者性別、年齡、腫瘤分期、是否放化療、是否使用一些激素或免疫調節(jié)劑、是否輸血、手術方式及患者營養(yǎng)狀況等[11-12]。本次研究主要探討的是患者的一般情況及常規(guī)檢驗項目與細胞免疫功能間的影響關系。

研究首先對患者的性別與細胞免疫功能進行了分析，其中男性患者的CD4+細胞計數(shù)較女性患者升高，且具有顯著差異，結果提示女性比男性更容易出現(xiàn)細胞免疫功能低下，雖然研究腫瘤的細胞免疫功能與性激素的文章較少，但研究細胞免疫功能與性激素關系的報道提示，雌二醇作為一種誘導因子通過雌激素受體α誘導胸腺細胞的凋亡，其具體的作用機制還有待進一步去研究[7]。在年齡的分析中，年齡>60歲患者的CD4+、CD8+細胞計數(shù)以及CD4+/CD8+的比值均低于年齡≤60歲的患者，但其差異無統(tǒng)計學意義，對細胞免疫功能低下的比例的單因素和多因素分析也無顯著性差異，分析結果提示年齡較大的患者細胞免疫功能有趨向低下的可能。

有研究顯示，臨床上惡性腫瘤患者常呈現(xiàn)營養(yǎng)不良的狀態(tài)[8]，因此本文分析了代表營養(yǎng)狀況的部分指標TP、ALB及HGB與細胞免疫功能的關系。其中TP、ALB及HGB降低組患者的CD4+、CD8+細胞計數(shù)及CD4+/CD8+的比值均低于正常組，結果提示營養(yǎng)狀況較差的患者細胞免疫功能更為低下，有研究也表明營養(yǎng)不良的腫瘤患者會導致其體液免疫和細胞免疫功能均受損[9-12]。但結果顯示這些營養(yǎng)指標水平的差異無顯著性，原因可能是營養(yǎng)指標選擇不全面或在劃分范圍的選擇上出現(xiàn)了問題。

最后對患者的CEA水平進行分析發(fā)現(xiàn)，CEA正常組的CD4+細胞計數(shù)高于升高組，其差異具有顯著性；在單因素分析的卡方檢驗中也發(fā)現(xiàn)，其升高組內患者細胞免疫功能低下的比例要低于正常組，且差異具有顯著性；但在多因素logistic回歸分析中，差異卻無顯著性。結果提示，可能CEA這種物質對機體的細胞免疫功能具有一定的刺激作用。

綜上可知，能影響腫瘤患者的細胞免疫功能的因素為患者的營養(yǎng)狀況，在臨床腫瘤治療過程中隨時關注患者營養(yǎng)狀況并及時進行糾正能有效地保護患者的細胞免疫功能，這也在臨床的抗腫瘤免疫過程中發(fā)揮著重要作用。

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Analysisofinfluencingfactorsofcellularimmunefunctionincancerpatients*

Yang-Wei, He-Bin-bin

(Medical Laboratory of the Dianjiang People′s Hospital of Chongqing, Chongqing 408300)

Objective： To explore the impact of various factors on the cellular immune function of cancer patients.MethodsThe CD4+, CD8+cells absolute value and the ratio of CD4+and CD8+cells in 67 blood specimens collected from patients with lung cancer, gastric cancer or colorectal cancer during June 2016 to April 2017 were analyzed by BD FACSCantoII flow cytometry. And then the patients were diagnosed with low cellular immune function when the absolute value and the ratio of CD4+and CD8+ cells is lower than the normal range. The relationship between CD4+, CD8+cell count, CD4+/CD8+and low cellular immune function were analyzed by SPSS19.0 statistical analysis software. Finally, the factors that might be affected were discussed objectively. Results: The CD4+, CD8+cell count and CD4+/CD8+ratio among male younger than 60 years were higher than those in female older than 60 years. And the CD4+ , CD8+ cells absolute value and the ratio of CD4 + and CD8 + cells in TP+group, ALB reduction group, HGB reduction group and CEA group were lower than the normal group. The cells count was significantly different in sex group, TP group and CEA group (P<0.05). In patients with low immunologic function of single factor analysis, the proportion of CEA was lower than the normal group of CEA, and the difference was significant (P<0.05). However, there was no significant difference by multifactor analysis (P>0.05).ConclusionConcerned about the nutritional status of patients and timely correction can effectively protect the patient′s cellular immune function, which is also in the clinical anti-tumor immune process plays an important role.

Cancer patients; Cellular immune function; Influence factors

重慶市墊江縣科委基金項目(編號：djkjxm2016jsyfysfyy025)

楊偉，男，檢驗師，主要從事分子及遺傳相關疾病和腫瘤細胞免疫功能方面的研究，Email：673571090@qq.com。

2017-6-26)