EGFR、Ki67在三陰性與非三陰性乳腺癌中的表達(dá)及其與TNBC病理特征的相關(guān)性

李華民

EGFR、Ki67在三陰性與非三陰性乳腺癌中的表達(dá)及其與TNBC病理特征的相關(guān)性

李華民

目的探討EGFR、Ki67在三陰性與非三陰性乳腺癌中的表達(dá)差異及兩者的表達(dá)與TNBC臨床病理特征的關(guān)系。方法分析non-TNBC與TNBC 患者的臨床病理資料，采用非生物素二步法檢測(cè)76例乳腺癌標(biāo)本里EGFR、Ki67的表達(dá)，對(duì)比兩者在non-TNBC與TNBC中的區(qū)別。檢測(cè)EGFR與Ki67在TNBC中的陽(yáng)性表達(dá)率，研究其與病理參數(shù)的相關(guān)性。結(jié)果和non-TNBC相比，TNBC多見(jiàn)于絕經(jīng)前婦女，組織學(xué)分級(jí)較差，較易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，且出現(xiàn)較早。EGFR與Ki67在TNBC組織中的陽(yáng)性表達(dá)率均高于在non-TNBC組織中的陽(yáng)性表達(dá)率。EGFR、Ki67的表達(dá)與TNBC腫塊直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、組織學(xué)分級(jí)之間均具有相關(guān)性。結(jié)論EGFR與Ki67在TNBC中表達(dá)均升高。兩者的表達(dá)與腫塊直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、組織學(xué)分級(jí)之間均具有相關(guān)性。

EGFR；Ki67；三陰性乳腺癌；非三陰性乳腺癌

乳腺癌是一種異質(zhì)性較高的惡性腫瘤，在全身惡性腫瘤里，其發(fā)病率占7%～10%[1]，表現(xiàn)為分子生物學(xué)、病理、臨床、預(yù)后等方面的差異性。乳腺癌可以依據(jù)分子分型，分為5種亞型[2]，三陰性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)屬于其中一種，指表皮生長(zhǎng)因子2(human epider growth factor receptor,HER)，孕激素受體(progesterone receptor,PR)，雌激素受體(estrogen receptor,ER)3種受體分子，均表達(dá)為陰性。TNBC具有侵襲性強(qiáng)、無(wú)靶向藥物治療指征、對(duì)激素不敏感、預(yù)后差、發(fā)病年齡相對(duì)較小、復(fù)發(fā)率高等特點(diǎn)[3-4]，因此引起了眾多研究者的廣泛關(guān)注與重視。Ki67、EGFR (epidermal growth factor receptor,表皮生長(zhǎng)因子受體)在腫瘤細(xì)胞增殖過(guò)程里，起著重要的作用。TNBC的發(fā)生發(fā)展與細(xì)胞的異常增殖相關(guān)[5]。本研究對(duì)76例乳腺癌患者進(jìn)行了回顧性分析，旨在分析探討EGFR、Ki67在TNBC與non-TNBC中的表達(dá)差異，及兩者的表達(dá)與TNBC臨床病理特征的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2017年1月我院收治的經(jīng)病理診斷確診為乳腺癌的女性患者76例，其中TNBC 13例，non-TNBC 63例。患者年齡36～73歲。所有患者的病理資料均完整，包括腫瘤大小、年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、臨床分期、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況等。所有患者入院前，均未進(jìn)行任何的治療，入院后，首先采取手術(shù)治療，且術(shù)前均未經(jīng)放療、化療。

1.2 方法

1.2.1 主要儀器與試劑 SP免疫組化試劑盒及DAB顯色試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋生物科技有限公司，兔抗人Ki67單克隆抗體及兔抗人EGFR單克隆抗體均購(gòu)自福州邁新生物科技開(kāi)發(fā)有限公司。

1.2.2 檢測(cè)方法 切除乳腺癌組織標(biāo)本，以4%甲醛固定腫瘤標(biāo)本，以石蠟包埋，經(jīng)切片機(jī)，取得4 μm厚切片，將切片放在烤片機(jī)上，烘烤2 h，置于60 ℃恒溫箱中一夜，以防脫片。采用非生物素二步法。染色結(jié)果采用DAB顯色。每次實(shí)驗(yàn)用陽(yáng)性組織切片(已知)作為陽(yáng)性對(duì)照，用PBS液代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定

EGER判斷標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞膜出現(xiàn)連續(xù)性的棕黃色為EGER陽(yáng)性細(xì)胞，按比例計(jì)數(shù)后，按百分比分類。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占比(細(xì)胞總數(shù)為200個(gè))≤5%為陰性(-)，>5%～25%為弱陽(yáng)性(+)，>25%～50%為陽(yáng)性(++)，>50%就為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

Ki67判斷標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞核內(nèi)有棕黃色顆粒為Ki67陽(yáng)性細(xì)胞，按比例計(jì)數(shù)后，按百分比分類。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占比(細(xì)胞總數(shù)為200個(gè))≤5%為陰性(-)，>5%～25%為弱陽(yáng)性(+)，>25%～50為陽(yáng)性(++)，>50%就為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

選擇SPSS 17.0軟件，計(jì)數(shù)資料用%表示，不同組別之間的比較采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 non-TNBC與TNBC患者的臨床病理特征比較

在76例患者里，經(jīng)病理檢查證實(shí)為非三陰性乳腺癌患者63例(82.89%)，三陰性乳腺癌患者13例(17.11%)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，non-TNBC與TNBC在年齡、腫塊直徑、TNM分期、病理學(xué)類型方面相比，差異不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TNBC相比non-TNBC，多見(jiàn)于絕經(jīng)前婦女，組織學(xué)分級(jí)較差，較易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，較易發(fā)生復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移且較早出現(xiàn)，較易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 non-TNBC與TNBC 患者的臨床病理資料分析

2.2 EGFR與Ki67在non-TNBC與TNBC中的表達(dá)

EGFR與Ki67在TNBC組織中的陽(yáng)性表達(dá)率均高于在non-TNBC組織中的陽(yáng)性表達(dá)率，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 EGFR與Ki67在non-TNBC與TNBC中的表達(dá)(例，%)

2.3 EGFR與Ki67的表達(dá)與TNBC 病理參數(shù)的關(guān)系

在13例TNBC患者中，EGFR、Ki67的表達(dá)與絕經(jīng)狀態(tài)、發(fā)病年齡、病理學(xué)類型之間無(wú)相關(guān)性(P>0.05)，與腫塊直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、組織學(xué)分級(jí)之間均具有相關(guān)性(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 EGFR與Ki67的表達(dá)與TNBC 病理參數(shù)的關(guān)系(例，%)

注：各分層EGFR總陽(yáng)性例數(shù)應(yīng)為9例、Ki67總陽(yáng)性例數(shù)應(yīng)為12例。

3 討論

EGFR為酪氨酸激酶受體家族，其與乳腺癌的增殖、生長(zhǎng)有密切的關(guān)系[6-7]。據(jù)報(bào)道，在乳腺腫瘤患者里，有27%～30%的患者有EGFR過(guò)表達(dá)，在TNBC里，更是有45%～70%的高表達(dá)概率[8]。在本次研究里，EGFR在TNBC里有69.23%的表達(dá)率，高于其在non-TNBC里的表達(dá)率，差異明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。同時(shí)，在TNBC里，EGFR的陽(yáng)性表達(dá)率與腫塊直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、組織學(xué)分級(jí)相關(guān)(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示EGFR的高表達(dá)極有可能在TNBC的增殖發(fā)展中起著重要的作用。EGFR是通過(guò)調(diào)控細(xì)胞增殖、分裂以及血管形成等過(guò)程，來(lái)增加乳腺癌的侵襲性[9]，因而，若是能找到抑制EGFR蛋白作用的作用靶點(diǎn)，就可能抑制部分non-TNBC向TNBC轉(zhuǎn)化，以阻斷惡性增殖的能力。所以，可以考慮將EGFR作為靶向藥物治療TNBC的重要突破口。

Ki67位于細(xì)胞核內(nèi)，與細(xì)胞增殖密切相關(guān)[10-12]。Ki67為目前較為確定的核增殖標(biāo)志物，其半衰期很短，脫離了細(xì)胞周期后就會(huì)快速降解[13]，因而在評(píng)估腫瘤細(xì)胞增殖活性時(shí)，其成為了重要標(biāo)志物。在本次研究里，TNBC里Ki67的陽(yáng)性表達(dá)率，明顯高于non-TNBC里Ki67的陽(yáng)性表達(dá)率，正如Bauer等研究所表明的，在多種惡性腫瘤實(shí)體里，Ki67的表達(dá)率會(huì)遠(yuǎn)高于正常的組織，與多種惡性腫瘤的發(fā)展，轉(zhuǎn)移以及預(yù)后相關(guān)[14]。

Ki67在TNBC里的陽(yáng)性表達(dá)率為92.31%，為高度表達(dá)。同時(shí)，在TNBC里Ki67的陽(yáng)性表達(dá)率與腫塊直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、組織學(xué)分級(jí)相關(guān)(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示Ki67陽(yáng)性者易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，癌細(xì)胞增殖程度增高，乳腺癌易生長(zhǎng)，侵襲能力增強(qiáng)。 Ki67的表達(dá)可作為判斷TNBC惡性程度的重要指標(biāo)，對(duì)臨床治療方案的制定有重要影響。

綜上所述，三陰性乳腺癌在乳腺癌里為一種高危的類型，其多見(jiàn)于絕經(jīng)前婦女，患者較易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級(jí)較差。EGFR的表達(dá)在TNBC的增殖發(fā)展中起著重要的作用，可將EGFR作為靶向藥物治療TNBC的重要突破口。Ki67的表達(dá)可作為判斷三陰性乳腺癌惡性程度的重要指標(biāo)，指導(dǎo)臨床治療方案的制定。

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TheExpressionofEGFRandKi67inTripleNegativeandNon-TripleNegativeBreastCancerandtheRelationshipwithClinicalPathologyofTNBC

LIHuamin.

WeinanCentralHosptial,Weinan,714000

ObjectiveTo analyze the differential expression of EGFR and Ki67 in triple negative and non-triple negative breast cancer (TNBC),and the relationship with TNBC clinical pathology.MethodsThe clinicopathologic data of 76 patients with non-TNBC and TNBC were analyzed,and Two-Step Non-biotin was used to detect the expression of EGFR and Ki67 in 76 patients with non-TNBC and TNBC.Compared the difference of the expression of EGFR and Ki67 in non-TNBC and TNBC,the positive expression rates of EGFR and Ki67 were detected in TNBC.The relationship between the positive expression rate and pathological parameters in TNBC was analyzed.ResultsCompared with non-TNBC,TNBC was more common in premenopausal women,who had poor histologic grade and were prone to lymph node metastasis,recurrence metastases and distant metastases at early time.EGFR and Ki67 have higher positive expression rates in TNBC than non-TNBC.The positive expression of EGFR and Ki67 was relevant to the diameter of the tumor,lymph node metastasis,TNM staging,and histological gradation.ConclusionPositive expression rate of EGFR and Ki67 in TNBC are higher than non-TNBC,And the positive expression of EGFR and Ki67 is relevant to the diameter of the tumor,lymph node metastasis,TNM staging,and histological gradation.

EGFR；Ki67;Triple negative breast cancer(TNBC);Non-TNBC

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1759～1762)

714000 陜西省渭南市中心醫(yī)院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.11.006

R737.9

A

1001-5930(2017)11-1759-04

2017-05-09

2017-07-10)

(編輯：甘艷)