p27蛋白及cyclin B1在慢性胃病及胃癌患者胃粘膜中的表達及其臨床意義

劉 潤 高海燕 楊春燕

p27蛋白及cyclin B1在慢性胃病及胃癌患者胃粘膜中的表達及其臨床意義

劉 潤 高海燕 楊春燕

目的研究p27蛋白及cyclin B1在慢性胃病及胃癌患者胃粘膜組織中的表達水平，探討p27蛋白及cyclin B1的表達與胃癌演變的關系。方法采用免疫組織化學SP法,檢測慢性非萎縮性胃炎、慢性萎縮性胃炎、腸上皮化生、非典型增生及胃癌患者胃粘膜組織中p27與cyclin B1的表達水平，并進行臨床分析。結果在慢性非萎縮性胃炎、慢性萎縮性胃炎、腸上皮化生、非典型增生、胃癌的演變過程中，p27蛋白表達水平呈現逐級降低的變化規律，cyclin B1表達水平呈現逐級升高的變化規律，兩者的變化呈負相關。結論p27蛋白及cyclin B1在胃粘膜中的表達水平與慢性胃病、胃癌前病變、胃癌的發生發展有關，其在胃癌的演變過程中起著重要的作用。

cyclinB1；p27；慢性胃病；早期胃癌

細胞周期是1個經過嚴格調控、高度有序的過程，細胞的有絲分裂對腫瘤細胞擴增起著十分重要的調節作用。而有絲分裂的偏差往往會導致基因組的不穩定，進而導致腫瘤的發生[1]。p27蛋白是廣譜的細胞周期蛋白依賴激酶抑制劑，它在體內能夠負性調節細胞周期進程，其表達下降或缺失會使那些DNA受到損傷或DNA復制發生錯誤的細胞不斷進入細胞周期，造成組織惡性增生，腫瘤形成。細胞周期蛋白cyclin B1具有調控人類細胞周期G2/M期檢測點的功能，其異常表達是導致細胞周期破壞的主要原因之一[2]。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集我院2010年1月至2013年6月消化科門診胃鏡檢查患者粘膜活檢標本共計155例，其中慢性非萎縮性胃炎32例、慢性萎縮性胃炎25例、腸上皮化生30例、非典型增生32例、胃癌36例，所有患者檢查前均未經過任何治療，均無腫瘤家族史。

1.2 方法與試劑

采用HE染色明確患者分組，免疫組織化學SP法檢測p27蛋白及cyclin B1在胃粘膜中的表達水平，p27多克隆抗體、cyclin B1多克隆抗體、S-P試劑盒及DAB顯色劑均為北京中杉金橋生物技術有限公司產品。福州邁新生物有限公司產品。

1.3 結果判定

p27蛋白以細胞核出現黃色或棕黃色顆粒為陽性標準，cyclin B1以細胞核和細胞質出現棕黃色顆粒為陽性細胞,在每張切片隨機檢測5個視野(倍數×400)，計數200個細胞，計算陽性細胞所占的百分率，作為該項指標的陽性表達率。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 p27蛋白在慢性胃病、胃癌前病變及胃癌胃粘膜組織中的表達

p27蛋白陽性染色呈黃色或棕黃色顆粒，定位于細胞核，極個別病例中在細胞核周圍緊鄰細胞核胞質處也可見陽性著色；在胃癌組織淺表部位著色相對較強，而深部著色較弱。隨著慢性非萎縮性胃炎、慢性萎縮性胃炎、腸上皮化生、非典型增生、胃癌的演變，p27蛋白表達水平呈現逐級降低，兩兩組間比較差異有顯著性，見表1。

2.2 cyclin B1在慢性胃病、胃癌前病變及胃癌胃粘膜組織中的表達

cyclin B1陽性染色呈棕黃色顆粒，定位于細胞核和(或)細胞質；在胃癌組織的邊緣區多余中央區，深層多于淺層。隨著慢性非萎縮性胃炎、慢性萎縮性胃炎、腸上皮化生、非典型增生、胃癌的演變，cyclin B1表達水平呈現逐級升高，兩兩組間比較差異有顯著性，見表1。

表1 慢性胃病及胃癌患者胃粘膜組織中p27及cyclinB1的表達情況

2.3 p27及cyclin B1蛋白在慢性胃病、胃癌前病變及胃癌胃粘膜組織中的表達相關性

慢性非萎縮性胃炎、慢性萎縮性胃炎、腸上皮化生、非典型增生、胃癌患者胃粘膜中，p27蛋白與cyclin B1蛋白表達水平無顯著相關性(P>0.05)，各組織間胃粘膜中p27蛋白表達與cyclin B1蛋白表達呈負相關性(P≤0.05)。

2.4 p27與cyclin B1蛋白表達與其他臨床參數的關系

p27與cyclin B1蛋白表達水平均與患者年齡、性別、腫瘤部位及大小無關。

3 討論

在腫瘤的發生、發展過程中，無論何種途徑最終都會反應到細胞周期調控機制上來，細胞周期調控紊亂導致惡性腫瘤最終的發生。p27是細胞周期依賴激酶抑制劑家族中的一員，它在C-末端有一核定位信號，并在近氨基末端有一保守區，科作用于各種細胞周期蛋白，發揮其抑制活性，使細胞周期停滯，阻斷細胞增殖，誘導細胞凋亡[3]。

Cyclin B1是細胞周期內蛋白的一種，具有調控人類細胞周期G2/M期檢測點的功能，是驅動細胞周期時相轉換關鍵的調控因素[4]，表達異常將導致細胞周期相應監測點功能的破壞，使腫瘤細胞周期阻滯或促凋亡功能喪失，是造成細胞失控生長、細胞惡性轉化的關鍵原因[5]。

本研究中我們應用免疫組織化學法觀察了p27和cyclin B1在胃粘膜癌變多階段中的表達及相關性，探討兩者的變化與胃癌及慢性胃病臨床病理特征的關系，發現在慢性非萎縮性胃炎、慢性萎縮性胃炎、腸上皮化生、不典型增生和胃癌中p27蛋白的表達水平逐漸降低；cyclin B的表達水平逐漸升高，這與其他學者發現其在食管癌、乳腺癌等惡性腫瘤中的表達結果相一致[6-7]。

研究發現，27蛋白在慢性胃病中呈高表達狀態，cyclin B1呈低表達狀態，隨著慢性非萎縮性胃炎、慢性萎縮性胃炎、腸上皮化生、非典型增生、胃癌的疾病進展，p27是細胞周期負性調節蛋白，可通過競爭性地與cyclins或cyclin-CDK復合物結合，導致cyclins生物活性喪失，從而維持胃粘膜上皮細胞增殖與凋亡平衡，當p27蛋白的表達水平逐漸下降，導致此時其作為細胞周期依賴激酶抑制劑的活性減低，從而導致cyclin B1表達水平逐漸升高，兩者存在負相關性，這與本研究結果相符合，當cyclinB1活性增加，就會出現G2/M檢測點功能失靈，使胃粘膜上皮細胞出現G2/M時相轉換，大量上皮細胞進入細胞周期下一階段，出現無序失控生長，細胞出現惡性轉化，最終導致胃癌的發生。

總之，p27蛋白及cyclin B1的異常表達與胃癌的發生發展有關，在胃粘膜癌變的過程中兩者的表達均呈逐及變化的規律，表明了胃癌是一類漸進性細胞周期調控機制破壞的疾病，進一步研究兩者對細胞周期的破壞機制，有望為預防胃癌的發生提供新的干預方式，為早期發現胃癌提供新的臨床思路。

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[3] Polyak K,Lee MH,Erdjument-Bromage H,et al.Cloning of p27kip1 a cyclin-dependent kinase inhibitor and a potential mediator of extracelluar antimitogenic signals〔J〕.Cell,1994,78(1):59-66.

[4] von Bergwelt-Baildon MS,Kondo E,Klein-González N,et al.The cyclins:a family of widely expressed tumor antigens?〔J〕.Expert Rev Vaccines,2011,10(3):389-395.

[5] Pommier Y,Kohn KW.Cell cycle and checkpoints in oncology;new therapeutic targets〔J〕.Med Sci(Paris)，2003,19(2):173-186.

[6] 劉馨蓮,李淑蓉,孫 靜,等.細胞周期蛋白在食管癌中的表達及意義〔J〕.中國實驗診斷學，2012,16(7):1249-1252.

[7] 趙全良,高宇飛,李 芳,等.乳腺癌中Cyclin B1表達及臨床病理意義〔J〕.內蒙古民族大學學報，2006,21(2):197-200.

ExpressionandClinicalSignificanceofp27ProteinandCyclinB1inGastricMucosainPatientswithChronicGastritisandGastricCancer

LIURun,GAOHaiyan,YANGChunyan.

TheFirstHospitalofShijiazhuang,Shijiazhuang,050010

ObjectiveTo study the expression of p27 proteins and cyclin B1 in gastric mucosa in patients with chronic gastritis and gastric carcinoma,and their correlations with pathogenesis of gastric carcinoma.MethodsImmunohistochemical SP method was used to investigate the expression levels of p27 and cyclin B1 in chronic non-atrophic gastritis,chronic atrophic gastritis,intestinal metaplasia,atypical hyperplasia and gastric carcinoma.ResultsFrom chronic non-atrophic gastritis to chronic atrophic gastritis,intestinal metaplasia,atypical hyperplasia and the final gastric carcinoma,the expression levels of p27 proteins decreased while cyclin B1 increased,showed a negative correlation.ConclusionThe expression levels of p27 proteins and cyclin B1 are related to chronic gastritis,gastric lesion and gastric carcinoma,both take significant roles in the development of gastric carcinoma.

CyclinB1;p27;Chronic gastritis;Early gastric carcinoma

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1931～1933)

050010 石家莊市第一醫院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.12.005

R735.2

A

1001-5930(2017)12-1931-03

2017-05-17

2017-10-20)

(編輯：吳小紅)