急性胰腺炎患者血清HMGB-1、PCT水平變化及意義

楊劍,姚玉玲,吳萬桂

(1南京市仙林鼓樓醫院,南京 210000；2南京大學醫學院附屬鼓樓醫院)

急性胰腺炎患者血清HMGB-1、PCT水平變化及意義

楊劍1,姚玉玲2,吳萬桂1

(1南京市仙林鼓樓醫院,南京 210000；2南京大學醫學院附屬鼓樓醫院)

目的觀察急性胰腺炎(AP)患者血清高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)、降鈣素原(PCT)水平變化，并探討其臨床意義。方法選擇經CT檢查確診的AP患者116例，根據疾病的嚴重程度分為輕癥AP(MAP)組69例和重癥AP(SAP)組47例，同時按照臨床結局分為存活組27例和死亡組89例。另選擇同期于我院體檢中心查體健康志愿者63例作為對照組，對比三組受試者血清HMGB-1和PCT水平及急性生理與慢性健康(APACHEⅡ)評分，并分析患者血清HMGB-1和PCT水平與APACHEⅡ評分的相關性，同時比較不同預后效果患者血清中HMGB-1和PCT水平，分析血清HMGB-1和PCT單獨診斷及聯合診斷AP的臨床價值。結果與對照組相比，MAP組和SAP組患者血清HMGB-1、PCT水平和APACHEⅡ評分升高(P均lt;0.05)，而SAP組血清HMGB-1、PCT水平和APACHEⅡ評分高于MAP組(P均lt;0.05)；AP患者血清HMGB-1、PCT水平與APACHEⅡ評分均呈正相關(r分別為0.735、0.711，P均lt;0.05)；死亡組血清HMGB-1和PCT水平高于存活組(P均lt;0.05)；聯用HMGB-1和PCT診斷AP的準確度、靈敏度和特異度均高于單獨診斷(P均lt;0.05)。結論AP患者血清HMGB-1和PCT水平異常升高，聯合檢測血清HMGB-1和PCT有助于病情判斷及預后評估。

急性胰腺炎；高遷移率族蛋白B1；降鈣素原

胰腺是消化系統的重要組成部分，分泌液中含有大量的消化酶輔助機體消化食物，急性胰腺炎(AP)作為消化系統常見的急腹癥，主要因胰腺內的胰酶被激活，釋放大量的炎性物質，消化自身胰腺組織，導致其出血，甚至壞死[1]。患者臨床表現為腹痛、腹脹、惡心嘔吐及體溫異常升高等，另外可能伴隨發生器官功能性病變。AP是一種自限性疾病，約25%的患者能度過危險期，總體病死率約為7.5%[2]。根據AP的嚴重程度可將患者分為輕癥急性胰腺炎(MAP)和重癥急性胰腺炎(SAP)[3]，以MAP為主,10%～20%的MAP患者病情惡化可發展為SAP，SAP病死率超過20%，因此對AP患者的病情發展進行準確的預測和診斷有重要意義[2]。目前實驗室中主要通過臨床癥狀和影像學檢查，但檢查費用高、耗時長，傳統指標如胰淀粉酶、C反應蛋白，特異性和靈敏度低[1]。高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)是新型的促炎性因子，與AP的發生發展有關。降鈣素原(PCT)作為次級炎癥因子參與AP的炎癥反應，可用于判斷AP患者病情程度[2]。2015年5月～2017年3月，我們觀察了AP患者血清HMGB-1、PCT水平變化，并探討其意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2015年5月～2017年3月我院消化科收治的疑似AP患者208例，經CT檢查確診AP患者為116例，且均符合AP的診治指南[4]。納入標準：①血清和尿液中淀粉酶水平升高；②均為首次發作；③CT檢查結果顯示胰腺腫大，且存在浸潤現象；④患者的臨床資料完整，且依從性高；⑤經患者及其家屬同意并簽署治療知情同意書。排除標準：①合并心、肝、腎等重大臟器病變患者；②合并患有糖尿病及慢性炎癥等全身性疾病患者；③處于特殊時期患者，如妊娠期和哺乳期；④入組前半個月服用非甾體抗炎藥物。參照文獻[3]標準，根據疾病的嚴重程度，分為輕癥AP(MAP)組69例和重癥(SAP)組47例。MAP組中男37例，女32例；年齡29～65(46.23±5.13)歲；疾病類型：酒精性16例，飲食性18例，特發性17例，混合性18例；SAP組中男25例，女22例；年齡28～67(46.35±5.07)歲；疾病類型：酒精性11例，飲食性13例，特發性12例，混合性11例。另選擇同期于我院體檢中心查體健康志愿者63例作為對照組，其中男37例，女26例；年齡28～65(46.27±5.15)歲。三組基本資料具有可比性。研究過程均符合我院醫學倫理委員會的相關規定。

1.2 血清HMGB-1和PCT測定 患者于入院后第1、4、7天空腹采集肘靜脈血4 mL，置于未涂有肝素鈉的采血管中，室溫下靜置20 min，3 500 r/min離心10 min，分離上清液，置于-80 ℃冰箱中。采用酶聯免疫吸附法檢測血清HMGB-1和PCT水平，試劑盒購自北京中杉金橋生物技術有限公司，嚴格按照試劑盒說明進行操作。另外，以CT檢查聯合臨床診斷標準為基準，觀察血清HMGB-1和PCT單獨診斷及聯合診斷的臨床價值。準確度=(真陽性+真陰性)/患者總數、靈敏度=真陽性/(真陽性+假陽性)、特異度=真陰性/(真陰性+假陰性)。比較不同預后效果患者血清中HMGB-1和PCT水平。

1.3 急性生理與慢性健康狀況評分Ⅱ(APACHEⅡ)評價 參照文獻[5]評價標準，得分越高，病情越嚴重。分析血清HMGB-1和PCT水平與APACHEⅡ評分的相關性。

2 結果

2.1 三組血清HMGB-1、PCT水平及APACHEⅡ評分比較 三組血清HMGB-1、PCT水平和APACHEⅡ評分差異有統計學意義(P均lt;0.05)。MAP組和SAP組血清HMGB-1、PCT水平及APACHEⅡ評分高于對照組(P均lt;0.05)，而SAP組血清HMGB-1、PCT水平和APACHEⅡ評分高于MAP組(P均lt;0.05)，見表1。

表1 三組血清HMGB-1、PCT水平及APACHEⅡ評分比較

注：與對照組相比，*Plt;0.05；與MAP組相比，#Plt;0.05。

2.2 AP患者血清HMGB-1、PCT水平與APACHEⅡ評分的相關性 AP患者血清HMGB-1、PCT水平與APACHEⅡ評分均呈正相關(r分別為0.735、0.711，P均lt;0.05)。

2.3 不同預后患者血清HMGB-1、PCT水平比較 按照臨床結局，AP患者分為存活組27例和死亡組89例，存活組、死亡組血清HMGB-1水平分別為(8.31±1.38)、(19.53±3.62)μg/L，血清PCT水平分別為(1.87±0.52)、(3.61±0.71)μg/L，兩組血清HMGB-1、PCT水平比較，P均lt;0.05。

2.4 單獨和聯用血清HMGB-1、PCT對AP的診斷價值比較 血清HMGB-1診斷AP的準確度、靈敏度、特異度分別為86.21%(100/116)、86.54%(180/208)、86.96%(80/92)，PCT診斷AP的準確度、靈敏度、特異度分別為84.48%(98/116)、86.06%(179/208)、88.04%(81/92)，血清HMGB-1、PCT聯合診斷AP的準確度、靈敏度、特異度分別為98.28%(114/116)、98.08%(204/208)、97.83%(90/92)，聯用HMGB-1和PCT診斷AP的準確度、靈敏度和特異度均高于單獨診斷(P均lt;0.05)，而單獨血清指標診斷AP的準確度、靈敏度和特異度差異無統計學意義(P均gt;0.05)。

3 討論

近年來，AP患者數量逐年升高，多種因素導致的局部胰腺炎癥反應，不良的飲食習慣、酗酒和膽結石均可致AP的發生[6]。研究發現，AP患者在發病15 min后胰腺間質的白細胞被浸潤后激活，上調炎癥細胞因子的釋放，加重細胞因子的級聯反應，從而誘發過度的炎癥反應，加重胰腺和遠隔臟器的損傷，最終導致多器官功能綜合征的發生，這是導致AP患者死亡的重要原因，因此炎癥因子成為AP患者的特異性指標[2]。炎癥介質的級聯反應是造成AP患者發展為全身炎癥反應綜合征和多器官功能障礙綜合征的始動因素[4]。AP患者早期體內炎癥介質產生的炎癥反應瀑布效應增加，最終失去控制，導致全身炎性反應。腫瘤壞死因子和白細胞介素是機體損傷的重要因子，但對AP發生發展的預測作用并不顯著，可能由于AP患者早期腫瘤壞死因子和白細胞介素水平達到峰值，與炎性反應程度間的關聯性并不顯著，因此臨床需更精確的炎癥因子對AP病情發展及預后進行評估[7]。SAP患者多合并全身炎癥反應綜合征、多器官功能障礙綜合征等，病情兇險，病死率超過80%，對于AP患者進行準確分級對治療及預后效果的評估有重要意義[3,8]。

HMGB分為HMGB-1、2和3，其中HMGB-1作為廣泛存在于真核細胞的非組蛋白染色體蛋白，由215個氨基酸殘基組成，分布在淋巴、肺、脾、心、腎等組織中，對于穩定核小體和調節基因轉錄有重要作用[9]。HMGB-1作為新型的促炎性因子，主要由巨噬細胞/單核細胞分泌，并從壞死的宿主細胞中釋放出來，當機體處于正常狀態時，體內HMGB-1水平低，不易被測到[4]。導致體內HMGB-1水平升高的原因分為三種[9]：①凋亡細胞內HMGB-1大量釋放；②活化的單核細胞和巨噬細胞將HMGB-1分泌至細胞外；③活化的單核細胞和中性粒細胞增加HMGB-1的分泌量，正向調節炎癥反應的級聯反應，加劇機體的炎癥反應。

PCT是一種糖蛋白，主要由甲狀腺髓質細胞分泌，機體一旦被微生物感染，誘發大的全身炎癥反應阻滯PCT降解為降鈣素，從而導致PCT水平升高[2,10]。PCT的半衰期長，穩定性好，用于臨床感染監測，在全身感染性疾病的診斷中特異性和敏感性較高[5,8]。PCT近年來用于評估AP的發生及發展程度，健康機體血清中PCT水平低于0.1 μg/L，當機體出現病毒感染、自身免疫性疾病時只是輕微升高，而在AP、系統炎性反應綜合征、敗血癥及創傷等全身系統性感染時急劇升高[3,8]。APACHEⅡ評分多用于AP患者預后效果，可動態評估AP患者病情程度，受外界因素影響較低[11]。本研究結果發現，與對照組相比，MAP組和SAP組血清HMGB-1、PCT水平和APACHEⅡ評分升高，差異有統計學意義，而SAP組血清HMGB-1、PCT水平和APACHEⅡ評分高于MAP組，差異有統計學意義，提示AP患者血清HMGB-1、PCT水平異常升高，而SAP患者濃度更高；進一步相關性分析結果表明，血清HMGB-1、PCT水平與APACHEⅡ評分均呈正相關，說明血清HMGB-1、PCT水平與APACHEⅡ評分關系密切。另外，本研究結果顯示，聯用HMGB-1和PCT診斷AP的準確度、靈敏度和特異度均高于單獨診斷，且差異均有統計學意義，表明聯合診斷的價值更高。

AP患者的胰腺細胞受損，HMGB-1在體內其他炎癥因子釋放量達到高峰后，通過被激活的單核巨噬細胞炎癥因子刺激釋放到細胞外，誘發單核巨噬細胞分泌炎癥因子，炎癥因子又可促進HMGB-1的分泌，形成惡性循環[12]。機體被細菌感染后，血清中PCT水平升高，是由于巨噬單核細胞被內毒素刺激產生大量的PCT，同時細胞因子和外毒素亦可致PCT的產生[13]。同時PCT誘發促炎因子水平的升高，反過來炎性因子加速PCT合成，另外PCT通過影響機體內中性粒細胞的功能從而清除大腸埃希菌及白色念珠菌，同時PCT還可激活淋巴細胞[14]，因此PCT被作為次級炎癥因子參與AP的炎癥反應。而單獨使用血清指標HMGB-1、PCT診斷AP的準確度、靈敏度和特異度間的差異無統計學意義，說明兩種指標對AP的診斷差別不大，具體原因需進一步研究。

綜上所述，AP患者血清HMGB-1和PCT水平異常升高，聯合檢測有助于AP患者病情判斷及預后評估。

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吳萬桂(E-mail:ta2016126@126.com)

2017-07-10)