通過(guò)直接藥敏試驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定的效果探析

李秀君

（勝利石油管理局臨盤醫(yī)院，山東 臨邑 251507）

通過(guò)直接藥敏試驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定的效果探析

李秀君

（勝利石油管理局臨盤醫(yī)院，山東 臨邑 251507）

目的：探討使用直接藥敏試驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定的效果。方法：選取近期在勝利石油管理局臨盤醫(yī)院進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定的80例敗血癥患者和菌血癥患者作為研究對(duì)象。這些患者均存在發(fā)熱、全身性感染的情況。對(duì)這些患者的血液樣本進(jìn)行直接藥敏試驗(yàn)和常規(guī)藥敏試驗(yàn)。將這些患者使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定的結(jié)果作為標(biāo)準(zhǔn)。觀察這些患者使用直接藥敏試驗(yàn)鑒定細(xì)菌種類的準(zhǔn)確率、檢測(cè)細(xì)菌對(duì)抗生素敏感度的準(zhǔn)確率及進(jìn)行細(xì)菌鑒定所用的時(shí)間。結(jié)果：這些患者使用直接藥敏試驗(yàn)鑒定革蘭陽(yáng)性菌的準(zhǔn)確率及鑒定革蘭陰性菌的準(zhǔn)確率與其使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)鑒定上述細(xì)菌的準(zhǔn)確率相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。這些患者使用直接藥敏試驗(yàn)檢測(cè)對(duì)抗生素敏感的革蘭陽(yáng)性菌、對(duì)抗生素敏感的革蘭陰性菌、對(duì)抗生素中度敏感的革蘭陽(yáng)性菌、對(duì)抗生素中度敏感的革蘭陰性菌、對(duì)抗生素耐藥的革蘭陽(yáng)性菌及對(duì)抗生素耐藥的革蘭陰性菌的準(zhǔn)確率與其使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)檢測(cè)上述細(xì)菌的準(zhǔn)確率相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。這些患者使用直接藥敏試驗(yàn)進(jìn)行細(xì)菌鑒定的平均時(shí)間短于其使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)進(jìn)行細(xì)菌鑒定的平均時(shí)間，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：使用直接藥敏試驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定的效果與使用常規(guī)藥敏實(shí)驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定的效果相似。使用直接藥敏試驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定所用的時(shí)間更短。

直接藥敏試驗(yàn)；常規(guī)藥敏試驗(yàn)；血液；細(xì)菌鑒定

敗血癥患者和菌血癥患者的死亡率均較高。在早期對(duì)敗血癥患者和菌血癥患者進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定可明確其致病菌，有助于臨床醫(yī)生為其選擇合適的藥物進(jìn)行治療[1]。過(guò)去，臨床上常使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定。但進(jìn)行常規(guī)藥敏試驗(yàn)的時(shí)間較長(zhǎng)，易延誤患者的治療。相關(guān)的研究結(jié)果證實(shí)，使用直接藥敏試驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定可快速、準(zhǔn)確地明確病原菌的種類及耐藥情況等。為探討使用直接藥敏試驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定的效果，勝利石油管理局臨盤醫(yī)院對(duì)近期收治的80例敗血癥患者和菌血癥患者使用直接藥敏試驗(yàn)和常規(guī)藥敏試驗(yàn)進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定，并將其使用兩種方法進(jìn)行細(xì)菌鑒定的結(jié)果進(jìn)行了對(duì)比。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文的研究對(duì)象為2015年2月至2016年2月期間在勝利石油管理局臨盤醫(yī)院進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定的80例敗血癥患者和菌血癥患者。這些患者均存在發(fā)熱、全身性感染的情況。在這些患者中，有男性患者52例，女性患者38例；其年齡為12.5～84.6歲，平均年齡為（45.8±5.8）歲。在進(jìn)行本次采血前48 h內(nèi)這些患者均未使用任何藥物，未接受任何治療。這些患者均未患有凝血障礙、自身免疫系統(tǒng)疾病、血液病。

1.2 方法

在這些患者空腹的狀態(tài)下采集其10 ml的靜脈血。將血液樣本接種在 BACTEC系統(tǒng)內(nèi)，進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。對(duì)這些患者進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果均呈陽(yáng)性。根據(jù)美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（NCCLS）推薦的選藥標(biāo)準(zhǔn)，選擇苯唑西林、四環(huán)素、紅霉素及克林霉素作為進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的藥品。對(duì)血液樣本進(jìn)行直接藥敏試驗(yàn)。具體的試驗(yàn)步驟為：將10 ml的血液樣本放置到無(wú)菌試管內(nèi)。將樣本以1500 r/min的速度離心處理5 min。收集樣本的上層清液。將上層清液以3000 r/min的速度離心處理15 min，棄去上層清液。將經(jīng)過(guò)處理后的樣本洗滌沉淀2次后重懸。取20 μl的懸液進(jìn)行革蘭染色，在高倍顯微鏡下觀察細(xì)菌的形態(tài)[2]。如果細(xì)菌的形態(tài)為鏈狀革蘭陽(yáng)性菌，則使用濃度為5%的羊血+MH瓊脂進(jìn)行初步藥敏試驗(yàn)。然后將菌液的濃度調(diào)節(jié)為6.8×108 cfu/L，并將菌液放置在NC21 板內(nèi)接種，進(jìn)行藥敏試驗(yàn)和細(xì)菌鑒定。如果細(xì)菌的形態(tài)為非鏈狀革蘭陽(yáng)性菌，則直接將1滴或2滴混懸液接種在MH瓊脂平板內(nèi)，使用無(wú)菌拭子將其涂抹均勻，使用藥敏試紙片進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。對(duì)這些患者的血液樣本進(jìn)行常規(guī)藥敏試驗(yàn)。具體的試驗(yàn)步驟為：將血液樣本接種在 BACTEC系統(tǒng)內(nèi)，進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。從血液培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)抽取少量的血液樣本，將血液樣本接種在血板、麥康凱平板及巧克力平板內(nèi)。在二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)過(guò)夜培養(yǎng)血液樣本17 h。對(duì)菌落進(jìn)行革蘭染色。使用VITEK2-compact 系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)。

1.3 觀察指標(biāo)

將這些患者使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定的結(jié)果作為標(biāo)準(zhǔn)，觀察其使用直接藥敏試驗(yàn)鑒定細(xì)菌種類的準(zhǔn)確率。記錄這些患者使用不同方法進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定所用的時(shí)間。根據(jù)NCCLS制定的標(biāo)準(zhǔn)判定對(duì)血液樣本進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的結(jié)果。對(duì)抗生素敏感：細(xì)菌對(duì)本次研究中使用的兩種以上抗生素的敏感度為敏感，或?qū)煞N抗生素敏感且對(duì)至少一種抗生素中度敏感。對(duì)抗生素耐藥：細(xì)菌對(duì)本次研究中使用的兩種以上的抗生素耐藥，或?qū)煞N抗生素耐藥且對(duì)至少一種抗生素中度敏感。對(duì)抗生素中度敏感：細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感度不符合“耐藥”或“敏感”的標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)原理

本次研究的數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 這些患者使用兩種方法鑒定細(xì)菌種類的結(jié)果

這些患者使用直接藥敏試驗(yàn)鑒定革蘭陽(yáng)性菌的準(zhǔn)確率及鑒定革蘭陰性菌的準(zhǔn)確率與其使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)鑒定上述細(xì)菌的準(zhǔn)確率相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳情見(jiàn)表1。

表1 這些患者使用兩種方法鑒定細(xì)菌種類的結(jié)果[n（%）]

2.2 這些患者使用兩種方法檢測(cè)細(xì)菌對(duì)抗生素敏感度的結(jié)果

這些患者使用直接藥敏試驗(yàn)檢測(cè)對(duì)抗生素敏感的革蘭陽(yáng)性菌、對(duì)抗生素敏感的革蘭陰性菌、對(duì)抗生素中度敏感的革蘭陽(yáng)性菌、對(duì)抗生素中度敏感的革蘭陰性菌、對(duì)抗生素耐藥的革蘭陽(yáng)性菌及對(duì)抗生素耐藥的革蘭陰性菌的準(zhǔn)確率與其使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)檢測(cè)上述細(xì)菌的準(zhǔn)確率相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳情見(jiàn)表2。

表2 這些患者使用兩種方法檢測(cè)細(xì)菌對(duì)抗生素敏感度的結(jié)果[n（%）]

2.3 這些患者使用兩種檢測(cè)方法進(jìn)行細(xì)菌鑒定的時(shí)間

這些患者使用直接藥敏試驗(yàn)進(jìn)行細(xì)菌鑒定的時(shí)間為8.24～13.91 h，平均時(shí)間為（9.98±1.28）h。這些患者使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)進(jìn)行細(xì)菌鑒定的時(shí)間為48.52～72.33 h，平均時(shí)間為（62.36±5.18）h。這些患者使用直接藥敏試驗(yàn)進(jìn)行細(xì)菌鑒定的平均時(shí)間短于其使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)進(jìn)行細(xì)菌鑒定的平均時(shí)間，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=11.324，P＜0.05）。

3 討論

菌血癥和敗血癥是比較嚴(yán)重的感染性疾病。及時(shí)對(duì)菌血癥患者和敗血癥患者進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定有利于臨床醫(yī)生為其選擇合適的治療方案，改善其預(yù)后[3]。

過(guò)去，臨床上常使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定。但進(jìn)行常規(guī)藥敏試驗(yàn)通常需要2～3 d。在等待常規(guī)藥敏試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，醫(yī)生僅能憑借臨床經(jīng)驗(yàn)對(duì)患者進(jìn)行治療。1973年，國(guó)外學(xué)者首次將直接藥敏試驗(yàn)法用于臨床檢驗(yàn)。近些年，我國(guó)多家醫(yī)院均使用直接藥敏試驗(yàn)進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定，均取得了較好的成果。此外，直接藥敏試驗(yàn)的操作更為簡(jiǎn)便，基層醫(yī)院也可使用該方法進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定。

本次研究的結(jié)果證實(shí)，使用直接藥敏試驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定的效果與使用常規(guī)藥敏實(shí)驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定的效果相似。使用直接藥敏試驗(yàn)對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌鑒定所用的時(shí)間更短。

[1] 郭蘇珊,林健雄,郭金鎮(zhèn),等.BACTECMGIT960用于結(jié)核分枝桿菌直接藥敏試驗(yàn)的研究[J].中國(guó)病原生物學(xué)雜志,2014(10):946-948.

[2] 李珍,李從榮.細(xì)菌快速藥敏試驗(yàn)方法研究進(jìn)展[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2016,13(8):1142-1144.

[3] 王書俠,張家明,周競(jìng),等.血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本直接藥敏試驗(yàn)臨床應(yīng)用價(jià)值的評(píng)估[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2016,26(10):2270-2272.

R446.5

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2095-7629-（2017）9-0127-02