茶樹△12-脂肪酸去飽和酶基因FAD2和FAD6的克隆與表達分析

陳丹，俞瀅，岳川，王鵬杰，陳靜，陳桂信，葉乃興

福建農林大學園藝學院/茶學福建省高校重點實驗室，福建 福州 350002

茶樹△12-脂肪酸去飽和酶基因FAD2和FAD6的克隆與表達分析

陳丹，俞瀅，岳川，王鵬杰，陳靜，陳桂信*，葉乃興*

福建農林大學園藝學院/茶學福建省高校重點實驗室，福建 福州 350002

本研究在茶樹轉錄組測序的基礎上，以鐵觀音茶樹的芽葉為材料，采用 RT-PCR技術，克隆了茶樹不飽和脂肪酸合成途徑中的關鍵限速酶—△12-FAD（△12-脂肪酸去飽和酶）基因的包含完整ORF的cDNA序列（CsFAD2和CsFAD6）。生物信息學分析結果表明，CsFAD2的全長為1 184 bp，其開放閱讀框（ORF）長度1 149 bp，編碼 382個氨基酸，定位于內質網上，其氨基酸序列與油茶FAD2的同源性最高達 97%；CsFAD6的全長為1 425 bp，其ORF長度為1 311 bp，編碼436個氨基酸，定位于葉綠體上,其氨基酸序列與葡萄FAD6同源性達81%。熒光定量PCR結果表明，鐵觀音茶樹幼苗在4℃低溫脅迫處理72 h過程中，這兩個基因的表達均受低溫的誘導，其表達量隨著處理時間的延長而升高，在處理48 h時，表達量水平最高；在100 g·L-1的PEG脅迫處理12 h過程中，這兩個基因的表達均受PEG脅迫處理的誘導；在ABA（100 μmol·L-1）脅迫處理72 h過程中，在處理 6～24 h期間，CsFAD2的表達量顯著升高，而CsFAD6的表達不受 ABA處理的影響，CsFAD6的表達量在處理72 h時顯著降低；在NaCl（250 mmol·L-1）脅迫72 h過程中，CsFAD2的表達量全程降低，而CsFAD6在處理24～72 h期間表達量顯著升高。

茶樹；△12-脂肪酸去飽和酶；非生物脅迫；基因表達

在逆境下，植物細胞中的不飽和脂肪酸的含量及其組成發生改變，以維持細胞膜的流動性和穩定性，降低逆境對膜結構的損害，增強植物的抗逆性，因此，調控植物細胞中不飽和脂肪酸的代謝，對于研究植物的抗逆機制具有重要意義。前人研究結果表明[1-3]，催化不飽和脂肪酸合成的酶基因發生突變，植物細胞中不飽和脂肪酸的含量減少，植物的抗逆性（抗寒性等）減弱。

在植物不飽和脂肪酸的合成代謝途徑中，△12-不飽和脂肪酸合成酶（FAD），是催化油酸脫氫形成亞油酸的關鍵限速酶，FAD是一種膜結合蛋白，存在于植物的內質網膜、質體膜及藍細菌的類囊體膜上，在單不飽和脂肪酸油酸（Oleic acid，18: 1△9）的第 12和 13位碳原子之間插入1個雙鍵，形成2個雙鍵的多不飽和脂肪酸亞油酸（Oleic acid，18：2△9,12）[4]。根據電子供體和細胞定位不同，有 FAD2和FAD6兩種類型，FAD2以細胞色素b5為電子供體，位于植物細胞的內質網上，FAD6以鐵氧還蛋白為電子供體，是 FAD2質體型同工酶，存在于植物細胞的質體中，因此，FAD2和FAD6具有相同的生理功能，但親緣關系較遠[5]。

目前已經在多種植物上分離了△12-FAD基因全長cDNA，研究表明該基因表達受多種逆境脅迫的誘導，并采用轉基因手段驗證了該基因的功能。熒光定量PCR研究結果表明，在低溫脅迫下，佛手香櫞葉的FAD2[6]、棉花葉的FAD2-3和FAD2-4[7]、油橄欖果實的FAD2-1和FAD2-2[8-9]及馬齒莧葉的FAD2-2[10]的表達量隨著溫度的降低而顯著升高；在冷凍脅迫下，白楊PtFAD2過表達轉基因株系的存活率明顯比非轉基因株系和轉基因下調株系要高[11]。油橄欖FAD2和FAD6受光的調節，FAD2表達還受機械損傷的誘導[9,12]，利馬豆FAD2的表達受到NaCl和PEG的誘導[13]。

在茶樹上，僅在龍井43上克隆了2個不飽和脂肪酸合成酶基因（FAD7和FAD8）[14]，并研究了這 2個基因在非生物脅迫下表達量的變化，其他有關茶樹不飽和脂肪酸合成酶基因與逆境脅迫關系的研究甚少，因此，揭示茶樹FAD的功能及其對逆境脅迫響應的分子機制，對于茶樹抗逆性育種具有重要的理論意義和實踐價值。本研究在茶樹轉錄組分析的基礎上，以鐵觀音茶樹芽葉為材料，采用RT-PCR技術，獲得鐵觀音不飽和脂肪酸合成代謝關鍵限速酶——△12-FAD的包含完整ORF的cDN A，并對該基因進行生物信息學分析，采用實時熒光定量PCR（qRT-PCR）技術，檢測該基因在低溫、干旱、高鹽脅迫和ABA處理下，其表達量的變化，初步揭示△12-FAD基因在逆境脅迫下的表達調控機制。

1 材料與方法

1.1 材料

取生長良好、大小一致的兩年生盆栽鐵觀音品種茶樹為材料，茶苗的種植、生長均在露天茶園。

分子生物學試劑：pEASYT?-T1載體、T1感受態細胞、TransTaq HiFi DNA Polymerase、Easyscript One-step gDNA Removal and cDNA synthesis superMix和Transstart? Tip Green qPCR superMix 試劑盒購自全式金生物技術（北京）有限公司；多糖多酚植物總RNA提取試劑盒購于天根生化科技（北京）有限公司。

1.2 方法

1.2.1 總RNA提取及cDNA合成

茶樹芽葉總RNA提取方法按天根多糖多酚植物總RNA提取試劑盒方法進行，對RNA進行濃度、完整性等質量檢驗。參照全式金Easyscript One-step gDNA Removal and cDNA synthesis superMix試劑盒的說明合成 cDNA用于RT-PCR。

1.2.2 基因ORF全長克隆

在前期鐵觀音茶樹芽葉轉錄組測序的數據庫中，根據序列注釋的信息，從中篩選出相關的FAD編碼的EST序列，通過序列比對獲得與其他植物中報道的FAD2和FAD6高度同源的片段序列，DNAstar軟件拼接，分別獲得含有兩個基因包含完整 ORF的 cDNA序列，它們均具有完整開放閱讀框。為了進一步驗證序列在鐵觀音品種中的準確性，在起始密碼子上游和終止密碼子下游設計RT-PCR引物（表 1），進行PCR擴增，RT-PCR反應體系和程序參照姚雪倩等[15]的方法；反應條件為 94℃，30 s；60℃，30 s；72℃，2 min，35個循環，后續克隆試驗參照俞瀅等[16]的方法進行。PCR產物回收、連接、轉化、測序后，得到這兩個基因包含完整ORF的cDNA序列。

1.2.3 生物信息學分析

用 DNAstar軟件包對序列進行拼接；用DNAMAN 軟件進行開放閱讀框查詢；核酸序列及氨基酸序列分別在 NCBI數據庫中用BLAsTn和BLAsTx分析；在 MEGA5.0軟件中用鄰近相連法構建系統進化樹；在EXPASY（http://expasy.org/tools）中用 ProtParam 及TargetP、singalP、TMHMM、Wolf Psort等工具對氨基酸序列進行生物信息學分析；用SOPMA模擬蛋白質二級結構。

表1 試驗引物及其序列Table1 Primer Sequences of this study

1.2.4 茶樹逆境脅迫實驗

露天茶園中取生長健壯的2年生盆栽茶樹分別用于低溫（4℃）、ABA（100 μmol·L-1）、高鹽（250 mmol·L-1NaCl）和干旱（100 g·L-1PEG）處理。低溫處理：調節氣候箱溫度，維持在(4±1)℃，將整株茶樹迅速置于氣候箱中，進行低溫脅迫處理，根據前期的研究結果[14]，在處理后的 0、1、3、6、12、24、48、72 h取樣。ABA處理參考曹紅利等[17]的方法，用100 μmol·L-1ABA 溶液噴灑茶樹，進行 ABA脅迫處理，分別在處理后的0、6、12、24、48、72 h取樣；NaCl和PEG處理方法參考岳川等[18]方法，用 250 mmol·L-1NaCl溶液噴灑茶樹，進行鹽脅迫處理，分別在處理后的0、6、12、24、48、72 h取樣；將茶樹從花盆中取出，用自來水洗凈根上泥土后浸入純凈水中平衡約15 min，將茶樹移入提前配制好的 100 g·L-1PEG溶液中處理12 h，分別在處理后的0、6、12 h取樣。在每個時間點上分別從至少3個枝條上取頂端第二、三片成熟葉混合為試驗材料，用錫箔紙包裹并標記，所有樣品采摘后液氮速凍，于－80℃保存用于提取茶樹總RNA。每個處理每個時期取樣設置3個生物學重復。

1.2.5 實時熒光定量PCR表達分析

以4種逆境脅迫處理的樣品總RNA為模板，按照全式金的Easyscript One-step gDNA Removal and cDNA synthesis superMix試劑盒的說明合成cDNA作為熒光定量PCR模板。采用Bio-Rad的CFX96 Touch熒光定量PCR儀進行 qRT-PCR檢測基因表達，以茶樹TATA-box binding protein gene（TBP）作為內參基因[19]，熒光定量引物列于表1，設置3個生物學重復。反應體系參照 Transstart?Tip Green qPCR superMix試劑盒的方法。反應程序及數據處理參考陳靜等[20]的方法：94℃，30 s；94℃，5 s；60℃，30 s，40個循環；試驗數據釆用2-ΔΔCT法進行定量分析。

2 結果與分析

2.1 CsFAD2和CsFAD6克隆及序列分析

通過實驗室前期的轉錄組數據庫分析，篩選出茶樹中可能的FAD基因序列，用DNAstar軟件包對序列進行拼接，經NCBI BLASTx比對，從中獲2條具有完整開放閱讀框（ORF）的茶樹FAD基因序列，分別在開放閱讀框上下游設計引物RT-PCR擴增出1 184 bp和1 524 bp的條帶（圖1），測序驗證其序列正確性。分別對它們進行BLASTn和BLASTx比對分析，結果顯示在獲得的序列中均具有完整的ORF，且均編碼完整的△12-不飽和脂肪酸合成酶，分別與其他植物中的FAD2和FAD6具有較高的相似性，因此將它們分別命名為CsFAD2和CsFAD6。CsFAD2序列全長 1 184 bp，包含1 149 bp的ORF，編碼382個氨基酸；CsFAD6序列全長1 524 bp，包含1 311 bp的ORF，編碼436個氨基酸。

2.2 CsFAD2和CsFAD6的蛋白質理化性質及結構預測分析

Protparam在線軟件預測CsFAD2蛋白分子式為C2074H3062N532O536S13，相對分子質量為44.44 kDa，理論等電點為 8.51。該蛋白的不穩定系數為 39.69，推測該蛋白為穩定蛋白。CsFAD6蛋白分子式為C2376H3571N613O603S17，相對分子質量為 50.92 kDa，理論等電點為9.33。該蛋白的不穩定系數為 52.52，推測該蛋白為不穩定蛋白。

圖1 CsFAD2和CsFAD6 RT-PCR產物電泳圖Fig. 1 Electrophoresis of RT-PCR products of CsFAD2 and CsFAD6

TMHMM server V.2.0對CsFAD2和CsFAD6氨基酸序列的跨膜結構域進行預測。結果顯示 CsFAD2蛋白的 53～75、82～104、114～136、173～195、222～244、249～271 位氨基酸之間形成 6個典型的跨膜螺旋區，預測CsFAD2蛋白是膜蛋白。CsFAD6蛋白的138～160、264～283、287～306位氨基酸之間形成3個典型的跨膜螺旋區，預測CsFAD6蛋白是膜蛋白（圖2）。

singalP進行信號肽預測顯示 CsFAD2和CsFAD6蛋白N端不存在信號肽，屬于非分泌性蛋白。Wolf Psort亞細胞定位預測顯示CsFAD2定位在內質網上，CsFAD6定位在葉綠體上。SOPMA分析顯示，CsFAD2和CsFAD6蛋白主要以α-螺旋、無規則卷曲、延伸鏈和 β-轉角構成，CsFAD2中分別占32.98%、30.10%、26.18%、10.73%；CsFAD6中分別占28.90%、43.81%、22.48%、4.82%。

圖2 CsFAD2和CsFAD6蛋白跨膜結構預測Fig. 2 Predicted transmembrane helices in proteins of CsFAD2 and CsFAD6

2.3 CsFAD2和CsFAD6的同源比對和蛋白系統進化分析

在 NCBI中對獲得的核苷酸序列進行BLASTx同源比對，結果顯示，CsFAD2與油茶（AIN52150.1）、珙桐（ABZ05022.1）、芝麻（XP_011080226.1）、水黃皮（AGZ02022.1）和油橄欖（AAW63040.1）等植物的FAD2的相似性分別達到 97%、84%、81%、81%和82%；CsFAD6與葡萄（XP_003634863.1）、棗（XP_015892777.1）、橙（XP_006488208.1）、可可（XP_017983888.1）、麻風樹（ABU96742.1）FAD6的氨基酸序列相似性分別達到81%、79%、77%、78%和77%。序列保守結構域分析和氨基酸序列同源比對結果顯示CsFAD2和CsFAD6蛋白與其他植物中的相應FAD序列同源性較高（圖3）。

選取不同植物中的FAD2和FAD6構建系統進化樹分析（圖 4），結果顯示茶樹 FAD2與油茶的親緣關系最近聚為一類；從進化樹中可以看出內質網CsFAD2和CsFAD6各聚為一類，CsFAD2屬于內質網型FAD2一類，CsFAD6聚在葉綠體型FAD6中。根據亞細胞定位預測、同源性比對和進化樹結果分析推測，本研究獲得的兩條茶樹△12-FAD分別屬于內質網型FAD2和葉綠體型FAD6。

2.4 逆境脅迫下CsFAD2和CsFAD6的表達分析

CsFAD2和CsFAD62個基因對低溫（4℃）的響應模式相同（圖 5-A）。在 1～24 h低溫處理期間，CsFAD2和CsFAD6的表達受低溫抑制，表達量均被下調，但差異不顯著。在24～48 h低溫處理期間，CsFAD2相對表達量開始上升，在低溫處理 48 h時CsFAD6相對表達量開始上升。在處理48 h時CsFAD2和CsFAD6相對表達量被誘導表達達到最高，顯著高于低溫處理的其他時期基因的相對表達量。在處理 72 h時CsFAD2和CsFAD6相對表達量下調。

ABA誘導CsFAD2和CsFAD6的表達（圖5-B）。ABA（100 μmol·L-1）處理后，CsFAD2的表達顯著上調，在6 h時相對表達量達到最高為 5.73，后隨著處理時間的延長到 72 h，CsFAD2的相對表達量仍處于上調，在處理時間達 24 h之前均顯著高于處理前的相對表達量。然而，ABA對CsFAD6的表達誘導作用沒有對CsFAD2的顯著，在處理 12 h時CsFAD6被誘導相對表達量最高至1.79，其他處理階段除了 72 h時的相對表達量下調，相對表達量均上調，但差異不顯著，說明 ABA對CsFAD6的表達影響較小。

CsFAD2和CsFAD6受高鹽（250 mmol·L-1NaCl）脅迫的調控，但其表達模式不相同（圖5-C），CsFAD2在72 h內的處理過程中表達受抑制，而CsFAD6在處理后的表達顯著上調，在72 h時相對表達量達到最高為391.81。

100 gL·-1的PEG處理12 h過程中，CsFAD2和CsFAD6均被誘導表達，6 h的相對表達量分別為 2.06和1.83，12 h的相對表達量分別達到了4.65和1.96（圖5-D）。

圖3 CsFAD2和CsFAD6與其他植物FAD2、FAD6同源比對Fig. 3 Alignment of the deduced CsFAD2, CsFAD6 proteins and homologous proteins from other plants

圖4 CsFAD2和CsFAD6與其他植物FAD2和FAD6氨基酸序列的系統進化分析Fig. 4 Phylogenetic analysis of CsFAD2, CsFAD6 and homologous proteins from other plants

圖5 逆境脅迫下CsFAD2和CsFAD6的表達分析Fig. 5 Expression analysis of CsFAD2 and CsFAD6 in the leaves of tea plants under stresses

3 討論

脂肪酸去飽和作用是植物防御系統中的一個重要組成部分，FAD是參與此調控的關鍵酶，在植物體中由多基因家族編碼。所有已知的 ω-3和 ω-6FAD以位于高度保守區的HXXXH，HXX（X）HH和HXXHH 3個組氨酸簇為特征。這些面向細胞質一側的組氨酸簇可能和鐵原子構成了酶的活性中心[3]。本研究克隆得到 2個茶樹△12-脂肪酸去飽和酶酶基因，CsFAD2和CsFAD6分別編碼382和 436個氨基酸。通過亞細胞定位預測、同源比對、保守結構域預測和進化樹等分析表明，CsFAD2在氨基酸序列高度保守區具有3個保守的組氨酸簇HECGHH、HRRHH和HVAHH，分別位于此序列的第 105～110、140～144和314～318位氨基酸殘基；并在進化樹中與其他植物FAD2聚為一類；亞細胞定位預測位于內質網上，因此推測CsFAD2屬于內質網型FAD2基因。而CsFAD6在氨基酸序列高度保守區同樣具有3個保守的組氨酸簇；在進化樹中與葉綠體型FAD6聚為一類；亞細胞定位預測位于葉綠體上，因此推測CsFAD6屬于葉綠體型FAD6基因。

本研究結果表明，茶樹CsFAD2和CsFAD6在低溫、ABA、高鹽和干旱逆境脅迫處理下均有表達且表達受到不同程度的誘導。在4℃低溫脅迫下，CsFAD2和CsFAD6的表達先下調，在24～48 h低溫處理期間，CsFAD2表達量開始上升；在低溫處理 48 h時CsFAD6表達量開始上升。在處理48 h時，CsFAD2和CsFAD6表達量被誘導表達達到最高，與前人的研究結果相近，表明茶樹中CsFAD2和CsFAD6與低溫逆境脅迫響應密切相關。Ma等[14]研究表明，在茶樹中FAD7和FAD8的表達量在4℃低溫處理1 h時表達量先下降，后上升，處理24 h時達到最高，后又下降。目前已經有多種脂肪酸去飽和酶基因分別從不同種植物中分離出來，并進行了功能的驗證，表明植物脂肪酸去飽和酶基因在抵抗低溫逆境脅迫中具有重要作用。Wada等[21]從抗寒藍藻（Anacystis nidulans）中克隆了△12-脫飽和酶基因，并將其導入寒敏感的藍藻，結果不飽和脂肪酸含量大為增加，受體對低溫的抗性明顯增強。Matos等[22]研究表明，在 22℃下擬南芥FAD2突變體的線粒體表現出多不飽和脂肪酸含量較低，而且比野生型具有更高的膜微粘度。在低溫逆境脅迫前期，CsFAD2和CsFAD6的表達變化較小，后期對低溫脅迫處理更敏感。茶樹在低溫脅迫處理達到一定程度時，茶樹中不飽和脂肪酸的含量發生相應變化，以維持膜的流動性和穩定性，降低逆境對膜結構和功能的損害，從而增強植物的抗逆性。由此推測茶樹CsFAD2和CsFAD6在相應低溫逆境脅迫中可能發揮重要作用。

在高鹽脅迫下，本研究中CsFAD2和CsFAD6均被誘導，但其表達模式不相同（圖5），CsFAD2在72 h內的處理過程中表達受負調控，均被下調。CsFAD6在處理后的表達顯著上調，在 72 h時表達量達到最高為391.81，在處理 48～72 h期間，CsFAD6的表達量顯著高于未處理前。Zhang等[23]結果表明，與野生型相比，缺乏FAD2功能的擬南芥突變體液泡和質膜的多不飽和水平較低，液泡和質膜囊泡中的 Na+/H+交換活性降低。根細胞的細胞質中積累更多的Na+，在種子萌發和幼苗生長早期對鹽脅迫比較敏感，說明了FAD2介導的高水平液泡和質膜的脂肪酸去飽和對于膜附著的 Na+/H+交換器的正常功能是必需的。在酵母中轉入向日葵的FAD2-1、FAD2-3，提高了對NaCl脅迫的耐受性[24]。由此可以推測茶樹在高鹽逆境脅迫下，影響了細胞膜系統的脂肪酸多不飽和水平，而CsFAD2和CsFAD6在參與植物鹽脅迫響應中起到了調節細胞膜系統脂肪酸不飽和水平的重要作用。

在干旱脅迫下，CsFAD2和CsFAD6表達量在100 g·L-1PEG處理0～12 h過程中被誘導表達，與前人研究結果一致，說明CsFAD2和CsFAD6能響應茶樹干旱逆境脅迫。Paula等[25]研究表明，干旱脅迫影響豇豆脂肪酸合成及造成不飽和脂肪酸的降解。Zhang等[26]檢測過表達的 ω-3FAD番茄植株，能夠提高對干旱（PEG）脅迫的耐受性。利馬豆的FAD2在干旱（PEG）脅迫下表達量顯著提高[13]，這些研究說明植物對干旱的耐受性與植物膜脂的去飽和化存在關系[27]。

ABA（100 μmol·L-1）脅迫處理 72 h 過程中，CsFAD2在處理6～24 h期間表達量被顯著上調，而CsFAD6的表達在此期間不受 ABA影響，但在 72 h時顯著降低，表明CsFAD2和CsFAD6可能參與ABA脅迫誘導反應。目前尚未有FAD基因與激素脅迫響應相關性的研究，有待后續試驗探究。

本研究在茶樹中克隆并分析了CsFAD2和CsFAD6在不同脅迫中的表達模式，初步確定CsFAD2和CsFAD6參與的不飽和脂肪酸代謝在茶樹抵御逆境脅迫中起到重要作用。CsFAD2和CsFAD6對逆境不同程度的響應表達，可能與茶樹細胞膜中不飽和脂肪酸的含量發生相應變化，以維持膜的流動性和穩定性，降低逆境對膜結構和功能的損害，從而增強植物的抗逆性有關，為后續研究不飽和脂肪酸代謝在茶樹抗逆中的作用提供了基礎。目標基因抵抗逆境脅迫的功能有待通過轉基因技術將其轉入楊樹等模式植物中作深入研究。同時，FAD2可能還受光、植物生長激素和還原性輔酶的調控并參與植物對逆境的應答，因此，對△12-脂肪酸脫氫酶基因的研究不應局限于植物組織中脂肪酸組成的變化，以及不飽和脂肪酸改變所引起的生物膜的變化，應拓展到激素調控、光調控、電子傳遞和逆境應答等更廣泛的領域。高等植物中FAD2基因是以多拷貝形式存在的，不同FAD2基因拷貝具有不同的序列特征、編碼區、內含子、5′UTR 和 3′UTR長度、表達特性和功能，后續可通過克隆茶樹上的FAD2基因家族的其他基因來全面研究不飽和脂肪酸合成酶基因在茶樹抵御逆境脅迫中的作用。

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Cloning and Expression Analysis of △12-fatty Acid Desaturase in Tea Plants

CHEN Dan, YU Ying, YUE Chuan, WANG Pengjie, CHEN Jing, CHEN Guixin*, YE Naixing*
College of Horticulture，Fujian Agriculture and Forestry University/Key Laboratory of Tea Science at Universities in Fujian, Fuzhou 350002, China

Based on the transcriptome database of tea plants, the cDNAs (CsFAD2 and CsFAD6) including full ORFs of the key rate-limiting enzyme-FAD (△12-fatty acid desaturase) in the unsaturated fatty acid synthesis pathway were cloned from the buds and leaves of tea cultivar Tieguanyin by RT-PCR .The full length of cDNA ofCsFAD2was 1 184 bp, which contained a 1 149 bp ORF encoding 382 amino acids with 97% homologous to theCoFAD2.Subcellular localization prediction showed thatCsFAD2was localized to the endoplasmic reticulum. The full length of cDNA ofCsFAD6was 1 425 bp and contained a 1 311 bp ORF encoding 436 amino acids, which was 81%homologous toVvFAD6. It was predicted to be located on the chloroplast. Quantitative PCR analysis showed that the expression ofCsFAD2andCsFAD6were induced by cold stress (4℃), which had the highest expression levels at 48 h.Similarly,CsFAD2andCsFAD6were induced by 100 g·L-1PEG treatment for 12 h. The expression ofCsFAD2was significantly up-regulated under the treatment of ABA(100 μmol·L-1) for 6-24 h. While the expression ofCsFAD6was not affected by ABA during this period and dramatically down-regulated at 72 h. The expression ofCsFAD2was repressed under NaCl (250 mmol·L-1) treatment. Inversely, the expression ofCsFAD6was significantly induced by NaCl treatment from 24 to 72 h.

Camellia sinensis, △12-fatty acid desaturase enzyme, abiotic stresses, gene expression

TS272.5+1；Q946.84+1

A

1000-369X(2017)06-541-10

2017-03-27

2017-06-13

國家自然科學基金項目（31270735，31600555）、福建省“2011協同創新中心”中國烏龍茶產業協同創新中心專項（閩教科〔2015〕75號）、福建省自然科學基金（2017J01616）、國家現代農業（茶葉）產業技術體系建設專項資金項目（CARS-19）

陳丹，女，在讀碩士生，研究方向為茶樹栽培育種與生物技術。*通信作者：ynxtea@126.com，guixinchen@126.com