PCR檢測瀘州地區男性STD患者感染EB病毒

陳明+顏丹+趙家蘭+卿晟+黃文才

【摘要】 目的 了解瀘州地區門診男性性傳播疾病（STD）患者生殖道感染EB病毒的現況。方法 采用聚合酶鏈反應（PCR）技術檢測328例門診男性STD患者生殖道EB病毒感染情況。結果 328例男性STD患者中， 有86例檢出EB病毒， 其陽性檢出率為26.22%（86/328）。在86例EB病毒感染患者中， 單純感染EB病毒者14例， 占16.28%（14/86）；混合感染者72例， 占83.72%（72/86）。混合感染者中， 合并一種STD病原體（淋球菌、支原體、衣原體、人乳頭瘤病毒）陽性者35例， 占48.61%（35/72）；合并兩種STD病原體（淋球菌+支原體、淋球菌+衣原體、淋球菌+人乳頭瘤病毒、支原體+衣原體、支原體+人乳頭瘤病毒、衣原體+人乳頭瘤病毒）陽性者17例， 占23.61%（17/72）；合并三種STD病原體（淋球菌+支原體+衣原體、支原體+衣原體+人乳頭瘤病毒、淋球菌+衣原體+人乳頭瘤病毒）陽性者13例， 占18.06%（13/72）；同時合并四種STD病原體（淋球菌+支原體+衣原體+人乳頭瘤病毒）陽性者7例， 占9.72%（7/72）。結論 瀘州地區男性STD患者對EB病毒具有易感性， 用PCR技術進行檢測具有簡便、快捷、準確、特異性強的特點， 檢測的結果可作為診斷生殖道感染EB病毒的依據。

【關鍵詞】 瀘州地區；聚合酶鏈反應；男性；性傳播疾病；EB病毒

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.31.016

【Abstract】 Objective To understand the status of EB infection in reproductive tract infections in male outpatients with sexually transmitted diseases （STD） in Luzhou area. Methods Polymerase chain reaction （PCR） technique was used to detect the infection status of genital EB virus in 328 male outpatients with STD. Results Among 328 male STD patients， there were 86 cases with EB virus， with positive rate as 26.22% （86/328）. Among the 86 patients with EB infection， there were 14 cases with EB virus， accounting for 16.28% （14/86）， 72 cases with mixed infection， accounting for 83.72% （72/86）. Among the mixed infected patients， 35 cases were combined with one kind of positive STD pathogen （Neisseria gonorrhoeae， Mycoplasma， chlamydia， human papillomavirus）， accounting for 48.61% （35/72）， 17 cases were combined with two kinds of positive STD pathogens （Neisseria gonorrhoeae + mycoplasma， Neisseria gonorrhoeae + chlamydia， Neisseria gonorrhoeae + Human papillomavirus， Mycoplasma + chlamydia， Mycoplasma + human papillomavirus， chlamydia + human papillomavirus）， accounting for 23.61% （17/72）， 13 cases were combined with three kinds of positive STD pathogens （Neisseria gonorrhoeae + mycoplasma + chlamydia， mycoplasma + chlamydia + human papilloma virus， Neisseria gonorrhoeae + chlamydia + human papillomavirus）， accounting for 18.06% （13/72）， 7 cases were combined with four kinds of positive STD pathogens （Neisseria gonorrhoeae + chlamydia + human papillomavirus）， accounting for 9.72% （7/72）. Conclusion The male STD patients in Luzhou area are susceptible to EB virus， and the detection of PCR is simple， fast， accurate and specific. The detection results can be used as basis of for EB virus diagnosis of genital tract infection EB virus.

【Key words】 Luzhou area； Polymerase chain reaction； Male； Sexually transmitted diseases； EB virusendprint

上個世紀60年代Epstein和Barr發現EB病毒是一種人類皰疹病毒， 是一種嗜B細胞的人皰疹病毒， 可感染上皮細胞、可侵犯B細胞[1， 2]。最近數年來已逐漸開始有報道有關生殖泌尿道EB病毒感染的病例[3]。EB病毒可以感染生殖泌尿道的上皮細胞、B淋巴細胞和口腔上皮細胞[4， 5]。為了進一步了解四川瀘州地區門診就醫的男性STD患者感染EB病毒的現況， 本地區四家醫院的醫務人員于2016年

6月～2017年6月總共收集了門診328例男性STD患者的標本， 采用PCR技術對這些標本進行檢測， 現就將檢測結果報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 標本于2016年6月～2017年6月采自西南醫科大學附屬院皮膚性病科、泌尿外科、婦產科， 瀘州第二人民醫院皮膚性病科， 瀘州納溪區人民醫院皮膚性病科， 瀘州納溪區中醫醫院皮膚性病科及婦產科， 一共收集來自上述醫院性病門診就診的328例男性STD患者的標本， 患者年齡12～56歲， 平均年齡28.6歲；病程9～28 d。

1. 2 方法 采用PCR技術檢測328例門診男性STD患者生殖道EB病毒感染情況。

1. 2. 1 取材方法 用消毒棉簽插入男性尿道1.0～1.5 cm處取材， 將所取標本浸在含內裝生理鹽水的試管里， 待檢。

1. 2. 2 試劑 PCR檢測試劑盒是美利堅合眾國森特公司的產品， 檢測的引物按EBNA-1順序設計， 序列如下。

EB-A：5′GT CATC AT CA TC CG GG TC TC3′EB-B：5′TT CG GG TT GG AA CC TC CT TG3′擴增產物片段為269 bp。

1. 2. 3 模板DNA的擴增 按操作規程將引物、模板DNA、Tag酶等放入FR-900DNA擴增儀中進行反應， 經變性、退火、延伸共進行35個循環可得到產物。

1. 2. 4 結果判斷標準 以2%瓊脂糖凝膠對擴增的產物進行電泳分析， 用溴乙淀進行染色， 在紫外燈下觀察， 如果有擴增帶為陽性。

2 結果

328例男性STD患者中， 有86例檢出EB病毒， 其陽性檢出率為26.22%（86/328）。在86例EB病毒感染患者中， 單純感染EB病毒者14例， 占16.28%（14/86）；混合感染者72例， 占83.72%（72/86）。混合感染者中， 合并一種STD病原體（淋球菌、支原體、衣原體、人乳頭瘤病毒）陽性者35例， 占48.61%（35/72）；合并兩種STD病原體（淋球菌+支原體、淋球菌+衣原體、淋球菌+人乳頭瘤病毒、支原體+衣原體、支原體+人乳頭瘤病毒、衣原體+人乳頭瘤病毒）陽性者17例， 占23.61%（17/72）；合并三種STD病原體（淋球菌+支原體+衣原體、支原體+衣原體+人乳頭瘤病毒、淋球菌+衣原體+人乳頭瘤病毒）陽性者13例， 占18.06%（13/72）；同時合并四種STD病原體（淋球菌+支原體+衣原體+人乳頭瘤病毒）陽性者7例， 占9.72%（7/72）。

3 討論

EB 病毒是在上個世紀60年代科學家Epstein和Barr在進行兒童惡性淋巴瘤病因病理的探索過程中， 從這些患病兒童的惡性淋巴瘤組織中培育瘤細胞時發現的一種病毒[6-8]。有許多的權威文獻報道， EB病毒與Burkitts淋巴瘤、鼻咽癌、機體免疫力下降致某些淋巴增生性疾病密切關聯[9-12]。近些年來陸續有報道一些STD患者泌尿生殖道感染EB病毒病例[13-16]。但是， 目前少有文獻報道關于泌尿生殖道感染EB病毒的感染途徑、感染后的臨床表現、有關檢測EB病毒的方法及手段等。為了更加深入了解EB病毒在門診男性STD患者生殖泌尿道中的感染現狀， 本地區四家醫院的醫務人員采用特異性強、敏感性好、快捷、簡便的PCR技術對328例男性STD患者進行檢測， 結果顯示， 328例男性STD患者中， 有86例檢出EB病毒， 其陽性檢出率為26.22%（86/328）。在86例EB病毒感染患者中， 單純感染EB病毒者14例， 占16.28%（14/86）；混合感染者72例， 占83.72%（72/86）。混合感染者中， 合并一種STD病原體（淋球菌、支原體、衣原體、人乳頭瘤病毒）陽性者35例， 占48.61%（35/72）；合并兩種STD病原體（淋球菌+支原體、淋球菌+衣原體、淋球菌+人乳頭瘤病毒、支原體+衣原體、支原體+人乳頭瘤病毒、衣原體+人乳頭瘤病毒）陽性者17例， 占23.61%（17/72）；合并三種STD病原體（淋球菌+支原體+衣原體、支原體+衣原體+人乳頭瘤病毒、淋球菌+衣原體+人乳頭瘤病毒）陽性者13例， 占18.06%（13/72）；同時合并四種STD病原體（淋球菌+支原體+衣原體+人乳頭瘤病毒）陽性者7例， 占9.72%（7/72）。通過患者臨床表現及各種特征發現， 已經感染了EB病毒的患者， 都有各種各樣不同程度的分泌物增多、泌尿生殖道不適、疼痛感等現象， 說明EB病毒完全可以在生殖泌尿道產生病變。另外， 從檢測的結果可知， 在已經感染了EB病毒的患者中， EB病毒混合在其他性病感染患者所占比例較大， 這顯示， 已患性病的患者對EB病毒具有明顯的易感性， 醫務人員要加強對STD患者的監測， 及時對就診的STD患者進行EB病毒的檢測、監控和治療。

總之， 瀘州地區男性STD患者對EB病毒具有易感性， 用PCR技術進行檢測具有簡便、快捷、準確、特異性強的特點， 檢測的結果可作為診斷生殖道感染EB病毒的依據。

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