尋常型銀屑病外周循環血miRNA的差異表達及柚皮提取物的臨床干預作用

項瑜+吳星+江敏瑩+韓華麗+吳錦輝

摘 要 目的：觀察柚皮提取物對尋常型銀屑病的治療效果及患者外周循環血miRNA的差異表達。方法：選擇50例尋常型銀屑病患者隨機分為試驗組（柚皮王止癢潤膚沐浴露外洗疊加西藥局部用藥）和對照組（西藥局部用藥）。治療療程為8周，觀察治療效果和不良情況的發生狀況。結果：治療組的PASI 改善率明顯高于對照組，PASI評分降低明顯優于對照組（P<0.05）；兩組尋常型銀屑病患者血漿中5個差異性miRNAs，分別與組內治療前后做出對比，結果差異均有顯著性意義（P<0.05）。結論：柚皮王止癢潤膚沐浴露外洗疊加西藥局部用藥比單純西藥局部用藥治療尋常型銀屑病療效明顯，且對尋常型銀屑病患者5個特異性miRNA有顯著性調控作用。

關鍵詞 尋常型銀屑病 miRNA差異表達 療效

中圖分類號：R758.63 文獻標識碼：B 文章編號：1006-1533（2017）21-0031-03

Differential expression of miRNA in peripheral blood of psoriasis vulgaris and clinical intervention of pomelo extract*

XIANG Yu1**， WU Xing2***， JIANG Minying1， HAN Huali1， WU Jinhui3（1. Guangdong Pharmaceutical University， Guangzhou 510006， China； 2. Guangzhou University of Chinese Medicine，

Guangzhou 510006， China； 3. Fujiang Pinghe Nanhai Biotechnology Company， Zhangzhou 363000， China）

ABSTRACT Objective： To explore the differential expression of miRNA in peripheral blood of psoriasis vulgaris patients and the effect of the pummelo pericarp extract. Methods： Fifty patients with psoriasis vulgaris were randomly divided into an experimental group （the pomelo peel antipruritic lotion， the external wash combined with topical use of Western Medicine） and a control group （only topical use of Western medicine）. The course of treatment was lasted 8 weeks and the treatment effect and adverse reactions were observed. Results： The improvement rate of PASI was significantly higher and the decrease of PASI scores was significantly better in the treatment group than in the control group （P<0.05）. The comparison of the differences of 5 miRNAs in plasma of the patients in a group before and after treatment showed to have significance （P<0.05）. Conclusion： The efficacy in the experimental group is much better than that in the control group with significant regulatory effect on 5 specific miRNA in patients with psoriasis vulgaris.

KEy WORDS psoriasis vulgaris； miRNA significant expression； curative effect

銀屑病，以皮膚紅斑、丘疹或斑片上蓋有銀白色麟屑以及不同程度的瘙癢為主要表現，發病率占世界人口的 0.1%～3%[1-2]。隨著國內外學術界在小分子 RNA 領域研究的逐步深入，發現多種miRNA在皮膚生理病理等過程中發揮了極其重要的作用，如皮膚腫瘤、銀屑病、特應性皮炎等，因此可以通過對miRNA的研究深入了解疾病的發病機制[3]。銀屑病嚴重影響著患者的工作生活，很大程度上降低了患者的生活質量[4]。本研究對銀屑病患者使用柚皮王止癢潤膚沐浴露，取得了較好的效果，現報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

所有病例均來源于廣東藥科大學附屬門診部尋常型銀屑病病人，樣本量為50例。年齡在18～65歲，7分0.05，表1）。

1.2 方法

試驗組給予柚皮王止癢潤膚沐浴露外洗，疊加西藥局部用藥（國際公認用于中重度患者的鈣泊三醇倍他米松軟膏），對照組給予單純西藥局部用藥。

1.3 療效判定方法

主要結局指標：治療和隨訪期間銀屑病的復發率、銀屑病皮損面積與嚴重程度指數（psoriasis area and severity index， PASI），客觀指標：miRNA（miR-146a、miR-155、miR-210、miR-142-3p、miR-181a），次要結局指標：首次復發間隔時間、起效時間、視覺模擬評分（visual analogue scale， VAS）、皮膚病生活質量指數（dermatology life quality index， DLQI）。

1.4 miRNA樣本提取和檢測

采用Trizol法提取血漿總RNA，行 RT 反應。cDNA合成，按試劑盒（superscript II reverse transcriptase， Invitr-ogen公司）說明，采用 Oligo（dT）逆轉錄。熒光定量PCR反應，選取miR-146a、miR-155、miR-210、miR-142-3p、miR-181a，檢測各樣本中的miRNA的相對表達水平。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 PASI改善率比較

治療組的PASI 有效率明顯高于對照組（P<0.05），且未出現加重的病例（表2）。

2.2 PASI 評分比較

治療前兩組PASI評分無顯著差異，治療后兩組均降低，以治療組降低更顯著（P<0.05，表3）。

2.3 差異性miRNAs表達分析結果

治療組miRNA-146a、micRNA-210、miRNA-155，miRNA-181a與治療前比較表達下調（P<0.05）；miRNA-142-3p與治療前比較表達上調（P<0.05）。

兩組治療前后的外周血漿中miR-146a、miR-155、miR-210、miR-142-3p、miR-181a水平的差值比較差異均無統計學意義（P>0.05）。

2.4 DLQI評分及VAS評分比較

治療后兩組DLQI和VAS評分均有下降，但組間比較差異不顯著（P>0.05，表4、表5）。

3 討論

前期試驗證明，長期使用柚皮王止癢潤膚沐浴露可緩解皮膚瘙癢及干燥等癥狀，在一定程度上提高銀屑病患者生活質量[5-6]。隨著醫學模式逐漸向“生理-心理-社會”模式轉化，中西醫結合治療、生理、心理、社會綜合治療成為中西醫結合治療銀屑病的方向[7]。

本研究結果表明，治療組用藥對5個特異性miRNA有顯著性調控作用。其中miRNA-146a，microRNA-210，miRNA-155，miRNA-181a與治療前比較表達下調，miRNA-142-3p與治療前比較表達上調。因此我們推測，治療組也許可以通過調控某些miRNAs影響某些分子、蛋白的表達，從而影響炎性因子變化，但具體過程及通路仍有待今后進一步研究[8-10]。此外，本研究中治療組尋常型銀屑病PASI評分改善程度達52%，臨床療效明顯優于對照組。治療組可有效改善患者的DLQI和VAS，即能有效改善患者的生活質量。

由于時間和經費的限制，本研究尚未對差異表達的miRNAs與其靶基因及基因調控功能展開深入研究。在今后的工作中，我們將進一步探討與銀屑病相關的miRNA基因缺失或突變，以期尋找特定的靶基因，全面了解miRNA在細胞中的功能機制。

參考文獻

[1] 蔣俊青， 顧安康. miRNA-210在尋常型銀屑病皮損中的表達研究[J]. 中國實驗診斷學， 2016， 20（9）： 1466-1468.

[2] 徐虹， 張亞敏， 孫華， 等. 針刺對腦缺血大鼠外周血miRNA-126和VEGF表達的干預作用[J]. 針灸臨床雜志， 2016， 32（10）： 80-84.

[3] 王曉華， 饒朗， 鄭道城， 等. 4種microRNAs在尋常型銀屑病患者外周血中的表達[J]. 皮膚性病診療學雜志， 2016， 23（6）： 372-375.

[4] 項瑜， 吳星， 盧傳堅， 等. 銀屑病的中西醫結合治療策略[J]. 中國醫學文摘：皮膚科學， 2014， 31（3）： 143-145.

[5] 項瑜， 徐賢琦， 李其林. 柚皮在皮膚美容中的應用[J]. 皮膚性病診療學雜志， 2016， 23（4）： 292-294.

[6] 張芳， 姜媛媛， 楊洋， 等. 柚提取物含量測定及其抗氧化、抑菌活性研究[J]. 食品工業科技， 2015， 36（3）： 65-69.

[7] 黃乾元， 徐玲玲， 李斌. 中醫藥治療銀屑病的研究進展[J].內蒙古中醫藥， 2013， 32（14）： 106-107.

[8] 梅沉成， 張云璧， 霍春波， 等. miRNA調控銀屑病角質形成細胞增殖機制的研究進展[J]. 中國麻風皮膚病雜志， 2016， 32（11）： 699-701.

[9] 汪海珍， 張予晉， 楊志波. 潤膚保濕軟膏對血虛風燥證銀屑病皮膚屏障功能干預作用及機制的研究[J]. 湖南中醫藥大學學報， 2016， 36（6）： 78-81.

[10] 王丹， 楊志波， 諶莉媚. 尋常型銀屑病miR-155與Th17型細胞因子相關及竹黃顆粒對其的干預作用[J]. 江西中醫藥大學學報， 2016， 28（6）： 17-22.endprint